عنوان پایان‌نامه
اثر دابلیو Wnt۳a بر تمایز سلول های بنیادی بند ناف به نورون های دو پامینرژیک
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی -سلولی تکوینی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 4419;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 47448
- تاریخ دفاع
- ۲۶ بهمن ۱۳۸۹
- دانشجو
- آناهیتا شهراز
- استاد راهنما
- بهمن زینلی
- چکیده
- امروزه سلول درمانی از روش های مورد استفاده جهت درمان بیماری های تخریبی مانند پارکینسون است. به علت مزایای استفاده از سلول های بنیادی خون بند ناف از جمله تلومر بلندتر، قدرت تکثیر بیشتر، ریسک پایین انتقال ویروسی، حالت نابالغ HLA و عدم آسیب به مادر و جنین، این سلول های بنیادی چندتوان منبعی مناسب جهت سلول درمانی در نظر گرفته می شوند. مطالعات بسیاری بر روی تمایز سلول های بنیادی بند ناف به سمت سلول های عصبی صورت گرفته و نشان داده شده که در حضور ریز محیط مناسب (از جمله مولکول های Wnt) ، این سلول ها قادر به تمایز به نورون، آستروسیت و الیگودندروسیت می باشند. سلول های سوماتیکی نامحدود خون بند ناف (USSCs) از جمله سلول های بنیادی خون بند ناف هستند که بیان پروتئین Wnt3a در آن ها نشان داده شده است. بنابراین در این پژوهش نقش مسیر کانونیکال Wnt بر تمایز سلول های USSC به سمت نورون های دوپامینرژیک مورد بررسی قرار گرفت. به این منظور، اثر BIO و پروتئین نوترکیب Wnt3a بر بیان دو ژن ?-tubulinIII و Nurr1 با استفاده از تکنیک های RT-PCR و real-time PCR، همچنین بیان پروتئین Nurr1 با استفاده از تکنیک های ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفت. نتایج بدست آمده نشان داد که مولکول های دخیل در مسیر کانونیکال Wnt در این سلول ها بیان می شوند و افزودن Wnt3a و BIO به محیط تمایزی این سلول ها سبب افزایش فعالیت این مسیر می گردد. در نهایت مشاهده شد که فعال کردن مسیر کانونیکال Wnt در سلول های USSCs سبب افزایش تمایز این سلول ها به سمت سلول های پیش ساز دوپامینرژیک خواهد شد. در مجموع نتایج این پژوهش پیشنهاد کننده ی نقش مثبت مسیر کانونیکال Wnt در روند تمایز سلول های USSC به سمت سلول های عصبی است. دوم
- Abstract
- Today, cell therapy techniques are potential tools to treat neurodegenerative diseases such as skin and neurological destructive diseases and autoimmune diseases. Parkinson is a common neurological destruction that is created followed the devastation of dopaminergic neurons located in the substantia nigra. Due to the advantages of using cord blood stem cells, including longer telomere, lower risk of viral transmission, immature state of HLA and non-harm to mother and fetus, this source of stem cells are considered as a suitable source for cell therapy. During the past 10 years, many studies have been carried out on the differentiation of umbilical cord blood stem cells into nerve cells and they have shown that in the presence of suitable microenvironment, these cells are capable of differentiation into all three neural phenotypes including neurons, astrocyte and oligodendrocyte. Unrestricted somatic stem cells (USSCs) are a group of cord blood stem cells in which the expression of the Wnt3a protein has been shown. Since many reports indicating the role of canonical Wnt pathway in differentiation of cord blood stem cells into nerve cells is presented, so in this study the role of canonical Wnt signaling pathway on the differentiation of USSCs into dopaminergic neurons were examined. To study this, the effects of Wnt3a recombinant protein and BIO on expression of Nurr1 and ?-tubulinIII genes by RT-PCR and real-time PCR, as well as Nurr1 protein expression using Immunofluorescence and Flow cytometry were examined. The results showed that the components of Wnt Canonical pathway are expressed in these cells and addition of Wnt3a and BIO to the culture media of these cells increases the activity of this pathway. Finally, we found that activation of canonical Wnt pathway in USSCs would increase differentiation of these cells towards the dopaminergic precursor cells.
