عنوان پایان‌نامه
شناسایی پادگن تشخیص دیکلو سیلم
- رشته تحصیلی
- انگل شناسی دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 45253;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 5A ارشد;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 5A ارشد
- تاریخ دفاع
- ۱۲ تیر ۱۳۸۹
- دانشجو
- مهدی خداویسی
- استاد راهنما
- بهنام مشگی
- چکیده
- دیکروسلیازیس ناشی از دیکروسلیوم دندریتیکوم (رودلفی 1819) بیماری ترماتودی با گستردگی جهانی است. آلودگی با این انگل کرمی با توجه به محل استقرار کرم بالغ که در مجاری صفراوی کبد نشخوارکنندگان کوچک و بزرگ است نه تنها از حیث ضرر و زیان اقتصادی که از دیگر ابعاد نظیر پاسخ نسبتاً سخت به درمان نبود ایمنی محافظتی علیه آن جنبه های بیماری زایی در میزبان و ...متضمن اهمیت ویژه ان می باشد. در بررسی حاضر پروتئین اختصاصی دیکروسلیوم دندریتیکوم با استفاده از دو نوع انتی ژن تهیه شده از کرم بالغ مورد شناسایی قرار گرفت. برای تهیه پلی کلونال آنتی بادی از خرگوش بعنوان مدل آزمایشگاهی استفاده شد.بدین منظور سه گروه خرگوش در نظر گرفته شد, یک گروه بهنوان کنترل و دو گروه دیگر تحت تزریق دو نوع آنتی ژن مربوط بهمراه ادجوانت کامل و سپس ناقص فروند قرار گرفتند. در ادامه سرم های ایمن در برابر آنتی ژن های اخیر و دیگر آنتی ژن های کرمی ایمونوبلات شدند.نتایج بررسی نشان داد که در آنتی ژن های بدنی و دفعی ترشحی به ترتیب 4و6 باند پروتئنی با وزن مولکولی در محدوده 25 تا بیش از 170 کیلو دالتون و 25 تا 70 کیلو دالتون وجود دارند ولی یک باند مشترک در بین دو آنتی ژن تحت آزمایش در محدوده 25 تا27 کیلودالتون دیده شد. با توجه به بررسی واکنش متقاطع با سایر آنتی ژنها آزمایش شده و مقایسه نتایج با سرم کنترل این باند پروتئنی بعنوان آنتی ژن اختصاصی معرفی می شود. مسلماً پروتئین شناسایی شده می تواند بعنوان آنتی ژن تشخیصی بعد از استخراج و خالص سازی توسط یک روش سرمی انتخابی در تشخیص دیکروسلیازیس مورد استفاده قرار گیرد.
- Abstract
- Dicrocoeliasis due to Dicrocoelium dendriticum (Rudolphi, 1819) is a widespread disease which mainly affects the liver of small and large ruminants. Parasitological methods are not enough reliable for diagnostic of this trematode infection In the present study, identified specific antigens of this trematode by hyperimmune sera of rabbit. Live adult of D. dendriticum were collected from condemned livers of sheep at a local abattoir. The excretory secretory product and somatic antigens were prepared through homogenzation and incubation of trematodes respectively. Polyclonal antibodies were raised in rabbits which after inoculated with two antigens with emulsified Freunds adjuvant and followed by booster injection. Comparative study was carried out between D. dendriticum antigens and those of Fasciola, cysticercus tenuicollis and hydatid cyst fluids antigens were tested. SDS-PAGE of antigens was performed and for immunoblotting analysis used hyperimmune sera from inoculated rabbits of case and control groups. Immunoblotting analysis of hyperimmune sera against somatic and excretory secretory antigens of D. dendriticum showed 6 and 4 protein bands ranging from 25 to >170 and 25 to 70 kDa molecular weight, respectively. Although cross reaction was observed with Fasciola exretory-secretory antigen, hydatid cyst and cysticercus tenuicollis fluids antigens. The results demonstrated that the 25-27 kDa proteins were strongly recognized by both hyperimmune sera and were common in both somatic and exretory-secretory antigens. According to our findings this low molecular weight pepetide would appear to be the most suitable candidate antigens for using in the serodiagnosis of dicrocoeliasis and probably produce protective immunity against dicrocoeliasis.
