عنوان پایان‌نامه
مقایسه ای مخمر های دهان و معده از نظر دارا بودن هی لی بکتور پی لری و پسودوموس آیروگینوسا به عنوان اندوسمبیونت
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی علوم میکروبیولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 4421;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 47382
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۸۹
- استاد راهنما
- علی هاتف سلمانیان, فریده سیاوشی
- دانشجو
- شهرزاد پدرام نیا
- چکیده
- مقدمه: در این مطالعه گونه های مختلفCandida معده ای و مری جداشده از 9 بیمار دارای مشکلات گوارشی با نمونه های دهانی همان بیماران از لحاظ وجود ژن های اختصاصی P.aeruginosa و H.pylori مقایسه شدند. هدف از این تحقیق بررسی امکان زندگی درون سلولی باکتری های P.aeruginosa و H.pylori در مخمرCandida است. روش ها: 12 مخمر دهانی ، 7 مخمر معده ای و 3 مخمر مری مرتبط از 9 بیمار دارای مشکلات گوارشی جدا شد که 4 بیمار دارای باکتری H.pylori جدا شده از معده نیز بودند. همچنین 12 مخمر روده ای و 5 مخمر معده ای مستقل نیز برای این مطالعه انتخاب شد. مخمرها بر روی محیط کروم آگار شناسایی شده و بیش از 10 بار بر روی محیط دارای کلرامفنیکل کشت داده شدند تا عاری از هر گونه آلودگی سطحی احتمالی به باکتری باشند. DNA کامل این مخمرها استخراج شده و PCR برای ژن های 16S rDNA اختصاصی P.aeruginosa و H.pylori انجام شد. نمونه های مثبت از لحاظ ژن 16S rDNA اختصاصی H.pylori با پرایمرهای سایر ژن های اختصاصی H.pylori مانند cagA، jhp0947 و vacA(s,m) نیز PCR شدند. نتایج: قطعات ژن های 16S rDNA اختصاصی P.aeruginosa (bp 618) و H.pylori (bp 519) به ترتیب در 5 و 19 مخمر تکثیر شد. نتایج تعیین توالی قطعات تکثیر شده از ژن 16S rDNA اختصاصی H.pylori در مخمر دهانی و معده ای و باکتری جدا شده از یک بیمار یکسان بود. بعلاوه محصولات PCR حاصل از تکثیر ژن های jhp0947 (bp 611)، cagA (bp 298) و vacA (bp 286 :s2 و bp 259 :s1 ، bp 630 :m2 ، bp 570 :m1) در جفت مخمر و باکتری این بیمار، از لحاظ اندازه مشابه بود. بحث: سمبیوز یکی از راهکارهای کهن میکروارگانیسم ها برای فرار از شرایط استرس محیطی محسوب می شود. نتایج به دست آمده در این مطالعه نشان می¬دهد که مخمرها به عنوان فلور طبیعی دستگاه گوارش و همچنین به عنوان یک تک سلولی آزادزی مقاوم در طبیعت که اندرکنش بسیاری با انواع باکتری¬ها دارند، می¬توانند به عنوان پناهگاهی امن و محافظ برای باکتری¬های Pseudomonas و H.pylori مطرح شوند.
- Abstract
- Background: In this study gastric and esophageal candida spp. of 9 dyspeptic patients were compared with their oral counterparts for carrying species-specific genes of P.aeruginosa and H.pylori. The aim of this study was assessment of the possibility of endosymbiotic life of P.aeruginosa and H.pylori in Candida. Materials & Methods: 12 oral, 7 gastric and 3 esophageal Candida yeasts were isolated from 9 individual dyspeptic patients and four of them had H.pylori isolates from the stomach. Furthermore, 12 Fecal and 5 other gastric yeasts were choosen for this study. Yeasts were subcultured more than 10 times on Yeast extract Glucose Chloramphenicol (YGC) Agar to eliminate any possible bacterial contamination and were identified on CHROM Agar. Total DNAs were extracted and PCR was performed to amplify P.aeruginosa & H.pylori 16s rDNA genes. Furthermore, PCR was performed to amplify other H.pylori - specific genes; cagA, jhp0947 and vacA(s,m) from H.pylori 16s rDNA - positive yeasts and bacteria of one patient. Results: P.aeruginosa-specific (618bp) & H.pylori-specific (519bp) 16s rDNA genes were amplified from 5 and 19 yeasts, respectively. Sequencing results revealed 100% homology between the amplified products from oral and gastric yeasts and the H.pylori isolate of one patient. Furthermore, PCR products of cagA (298bp), jhp0947 (611bp) and vacA (m1:570bp, m2:630bp, s1:259bp & s2:286bp) genes amplified from yeasts and H.pylori of this patient showed similarity in size. Discussion: Symbiosis is one of the old strategies of microorganism to escape from environmental stresses. Results of this study indicate that yeasts which are members of gastrointestinal tract microflora could be considered as persistent free-living unicellular microorganisms which can act as protective niche for bacteria such as P.aeruginosa and H.pylori.
