تراریزش گردو juglans regialبا استفاده از ژن های fldبه منظور افزایش تحمل به شوری
- رشته تحصیلی
- مهندسی تولیدات گیاهی- اصلاح گیاهان باغبانی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 45110;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 358
- تاریخ دفاع
- ۲۹ خرداد ۱۳۸۹
- دانشجو
- محمدعلی شیخ بیگ گوهرریزی
- استاد راهنما
- کورش وحدتی
- چکیده
- تنش¬های محیطی تاثیر بسیار مهمی بر رشد و بقای گیاهان دارند. بیان تعداد زیادی از ژن¬ها در اثر تأثیر خشکی و دمای پایین القاء می¬شوند. فلاودوکسین ها ناقل¬ الکترونی و پروتئین کوچک قابل حل به اندازه تقریبا 19 کیلو دالتون بوده و حاوی یک مولکول غیر کوالانت متصل به فلاوین تک نوکلئوتیدی به عنوان گروه پروستتیک می باشند. ثابت شده است fld سیانو باکتریایی به طور موثری می تواند جایگزین فردوکسین در شرایط احیای نوری NADP+ ، تثبیت نیتروژن و احیای سولفیدی شود. برای افزایش تحمل به تنش¬های خشکی و شوری، انتقال ژن fld تحت راه انداز دائمی CaMV/35S از طریق آگروباکتریوم به رویان¬های بدنی گدو ایرانی صورت گرفت. به همراه ژن fld ژن مقاومت به هیگرومایسن (hpt) برای وکتورp6u-ubi-FVTI و ژن گزینش¬گر (ntpII) برای وکتور pBI121 به عنوان گزینشگر استفاده شد. همچنین تست هیستوشیمیایی gus به منظور آنالیز گیاهان انتخابی (احتمالاً تراریخت) و DNA ژنومی گیاهان تراریخته و شاهد به روش (CTAB) موری تامسون (1980) استخراج گردیدند. حضور و بیان این ژن در گیاهان تراریخته با استفاده از روش¬های PCR به کمک آغازگرهای طراحی شده به اثبات رسید. واژه¬های کلیدی: انتقال ژن، گردو، fld ، تنش¬های غیر¬زیستی، آگروباکتریوم
- Abstract
- Abiotic stresses greatly affects growth and survival of plants. Expressions of a number of genes are induced by both drought and low temperature. Flavodoxin is an important transcription factor that induces some of genes related to abiotic stresses. FLD contains a flavin mononucleotide as a prosthetic group that act as a redox centre transferring electrons at low potentials. Flavodoxin is expressed under stress conditions, replacing ferredoxin in the photosynthetic electron transport from photosystem I to NADP+, and in oxidat stress. To increase tolerance to cold, drought and salinity, the embryos of walnut were transformed with the fld gene under the control of CaMV35S promoter through Agrobacterium-mediated method. In this study with fld gene, selective marker gene that confers resistance to hygromycin (hpg) was applied. Regenerated plants on selective media contain hygromycin selected for confirming of inserted gene. Then insertion and expression of gene was confirmed with PCR methods. Keywords: Gene transformation, walnut, fld, Abiotic stress