عنوان پایان‌نامه

بررسی اثر سالیسیلیک اسید و B.subtilis بر کنترل پوسیدگی فوزاریومی ساقه و ریشه خیار با عامل F.oxysporum f.sp.radicis-cucumerinum



    دانشجو در تاریخ ۱۵ اسفند ۱۳۸۸ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "بررسی اثر سالیسیلیک اسید و B.subtilis بر کنترل پوسیدگی فوزاریومی ساقه و ریشه خیار با عامل F.oxysporum f.sp.radicis-cucumerinum" را دفاع نموده است.


    محل دفاع
    کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 44939;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 344
    تاریخ دفاع
    ۱۵ اسفند ۱۳۸۸
    دانشجو
    حدیث یوسفی
    استاد راهنما
    نوازاله صاحبانی

    یکی از مهمترین بیماریهای خیار ، پوسیدگی ساقه و ریشه خیار با عامل Fusarium oxysporum f.sp. radicis cucumerinum می باشد. در این تحقیق اثرات احتمالی کاربرد سالیسیلیک اسید و باکتری Bacillus subtilis در امکان آلودگی به بیماری پوسیدگی ساقه و ریشه و القاء مقاومت میزبان در مقابل این پاتوژن در شرایط آزمایشگاه و گلخانه مورد بررسی قرار گرفت. در محیط پتری اثر غلظت های مختلف سالیسیلیک اسید (8-2 میلی مولار) بر رشدFusarium oxysporum f.sp. radicis cucumerinum و B.subtilis آزمایش شد. نتایج نشان داد که همه غلظتهای سالیسیلیک اسید بطور مستقیم روی رشد باکتری اثر منفی داشتند، همچنین غلظتهای بیشتر از 5 میلی مولار آن نیز به طور کامل از رشد قارچ عامل بیماری جلوگیری کرد. برای آزمایشهای گلخانه ای سه غلظت 3 ، 5 و 7 میلی مولار انتخاب شدند. این آزمایشها به دو روش، کاربرد باکتری و سالیسیلیک اسید قبل و یا بعد از آلودگی قارچی انجام شدند. شدت بیماری، وزن تر ریشه، اندامهای هوایی و ارتفاع بوته در بررسی های گلخانه ای مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج این بررسی ها نشان داد که گیاهان خیار تیمار شده با سالیسیلیک اسید به عنوان یک محرک واکنشهای دفاعی گیاه و B.subtilis به عنوان عامل بیو کنترل، قبل از مایه زنی با عامل بیماری سبب کاهش شدت بیماری و افزایش برخی فاکتورهای رشد در مقایسه با گیاهان شاهد آلوده شدند. کاربرد سالیسیلیک اسید 7 میلی مولار (بصورت اسپری برگها) و B.subtilis (بصورت خیساندن خاک) قبل از آلودگی قارچی نسبت به شاهد آلوده و سایر تیمارها سبب کاهش بیماری و افزایش رشد گیاه شد. اهداف دیگر این تحقیق، بررسی اثر باکتری و سالیسیلیک اسید روی نشانگرهای مقاومت القائی شامل آنزیم های فنیل آلانین آمونیالیاز، پلی فنل اکسیداز و محتوای فنل کل در شرایط گلخانه بود. ارزیابی محتوای فنل کل و میزان فعالیت آنزیم های فنیل آلانین آمونیالیاز و پلی فنل اکسیداز در تیمار کاربرد تلفیقی هر دو نوع القاء کننده در مقایسه با کاربرد هر کدام از القاء کننده ها به تنهایی و نیز گیاهان شاهد سالم و آلوده افزایش یافته بود. بالاترین مقدار این ترکیبات به ترتیب در روزهای هفتم، ششم و پنجم بعد از کاربرد القاء کننده ها مشاهده شد. در حالیکه گیاهان تیمار شده با سالیسیلیک اسید در روزهای هفتم، هفتم و ششم بیشترین مقدار مشاهده شد. همچنین گیاهان القاء شده با باکتری بیشترین مقدار این ترکیبات در روزهای هفتم، ششم و پنجم بعد از کاربرد القاء کننده بود. با توجه به نتایج بدست آمده، پیشنهاد می شود که سالیسیلیک اسید به عنوان یک محرک شیمیایی دفاع گیاه و B.subtilis به عنوان عامل کنترل بیولوژیک و افزایش دهنده رشد گیاه، به عنوان دو روش سالم مبارزه، می توانند در برابر عوامل بیماریزای گیاهی مانند Fusarium oxysporum f.sp. radicis cucumerinum ، با هم استفاده شوند.
    Abstract
    One of the important diseases of cucumber is Fusarium root and stem rot caused by Fusarium oxysporum f.sp. radicis cucumerinum. In this study, the possible effects of exogenous application of Salicylic acid and Bacillus subtilis on infection potential of root and stem rot disease and induction of resistance against this pathogen were investigated in laboratory and greenhouse conditions. In vitro, the effectiveness of SA concentrations (2-8 mM) on growth F.oxysporum f.sp. radicis cucumerinum and B.subtilis was tested. Results showed that all concentrations of SA on growth B.subtilis had negative effect, also SA completely inhibited the mycelial development of F.oxysporum f.sp. radicis cucumerinum at concentrations more than 5mM. For pot experiments three concentrations of SA 3,5 and 7mM were selected. These experiments carried out at two methods. Using SA and B.subtilis post or/ and prior inoculation with pathogen. In greenhouse experiments disease severity and plant growth factors such as root and shoot fresh weight and length shoot were evaluated. Results demonestrated that cucumber plants treated by SA as a plant defense elicitor and inoculated with B.subtilis as a biocontrol agent, prior to fungal infection separately ,caused reduce disease index and increase some growth factors as compared to infected control. Application of 7mM SA (foliar spray) and B.subtilis (soil drench), prior to fungal infection reduced fungal infection and induce plant growth as compared to control and other treatments. The other aims of this research were to study of the involvement of induced resistance mechanisms in this interaction. Evaluation of total phenol content and phenylalanine ammonia lyase and polyphenol oxidase activities showed that, combined application of SA and B.subtilis significantly increased above plant defense compounds compared to SA and B.subtilis alone and control. Maximum level of them were observed at 7, 6 and 5 days after elicitors application respectively.while in treatment of SA, days of 7th, 7th and 6th post using SA higher level of them were observed. Also plants induced with B.subtilis maximum level of this compounds were observed at 7, 6 and 5 days after application elicitor respectively. In summary results suggest that SA as a chemical elicitor and B.subtilis as biocontrol agent and plant growth promoter, as two safe methods, can be integrated against phytopathogens such as F.oxysporum f.sp. radicis cucumerinum. Key words : salicylic acid, Bacillus subtilis , Fusarium oxysporum f.sp. radicis cucumerinum , phenylalanine ammonia lyase, polyphenol oxidase.