عنوان پایان‌نامه
بررسی کالوس زایی و جنینین زایی در گیاه زعفران
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی-اصلاح نباتات
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 49480;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 524
- تاریخ دفاع
- ۱۵ آذر ۱۳۸۹
- دانشجو
- نرگس شرفی نیا
- استاد راهنما
- علی ایزدی دربندی
- چکیده
- زعفران با نام علمی Crocus sativus L. به دلیل کلاله گرانبهایش کشت و استفاده می¬شود از آنجا که زعفران یک گیاه تریپلوئید و عقیم است و با توجه به مشکلاتی که در زمینه تکثیر سنتی این گیاه وجود دارد در این تحقیق سعی شد با استفاده از تکنیک¬های کشت بافت، بهینه¬سازی کالوس¬زایی، القای جنین¬زایی رویشی و سپس مطالعه شرایط بلوغ جنین¬ها بررسی گردد. بدین منظور ابتدا پیازهای زعفران جمع آوری و پس از ضدعفونی سطحی، در محیطMS حاوی غلظت¬های مختلفی از تنظیم کننده¬های رشدی 2,4-D و BAP کشت شدند. کشت¬ها در شرایط دمایی 2 ± 24 درجه سانتی¬گراد و تاریکی مطلق نگهداری شدند 3 ماه بعد میزان کالوس-زایی اندازه¬گیری شد. بالاترین میزان کالوس¬زایی در ترکیب 1 2,4-D و 5/0 BAP مشاهده شد. سپس کالوس¬های جنین¬زا جهت جنین¬زایی بررسی شد. بیشترین تعداد ریز نمونه جنین¬زا در 5/0 2,4-D و 2 BAP بدست آمد. TDZ به میزان 75/0 میلی¬گرم در لیتر موثرترین تیمار جهت القا جنین¬زایی بود. نتایج بررسی بلوغ جنین¬ها نیز نشان داد که وقتی قند محیط به 5/4 % رسید جنین بالغ در هر پتری افزایش یافت (50/12 عدد). جنین¬های بالغ به منظور باززایی به محیط¬های مورد نظر در دمای 2 ± 24 و فتوپریود 16 ساعت روشنایی 8 ساعت تاریکی منتقل شدند. مشخص شد بیشترین تعداد جوانه¬ با میانگین25/13 مربوط به محیطی با قند 5/4 % و 1 BA است. همچنین آزمون¬هایی جهت کشت میکروسپور انجام شد و مشخص گردید بهترین زمان نمونه برداری زمانی است که طول غلاف حاوی گل 5-4 سانتی¬¬متر است. در این حالت کلاله کوتاه تر از بساک است.
- Abstract
- Saffron (Crocus sativus L.) is cultivated and used for its valuable stigmas. As it is a triploid and sterile plant and due to problems related to its classical propagation, in this research attempt was made for improvement of tissue culture technique to investigate the optimization of callus induction, somatic embryogenesis and than the using tissue culture techniques. For this purpose, saffron corms were collected and after disinfection, they were cultured on MS medium containing different concenterations of 2,4- D and BAP. Culturs were incubated under a dark condision with tempreture of 24±2 °C. After three months, callus induction was measured. The highest degree of callus induction was observed in medium supplemented with 1 mg/l 2,4- D and 0.5 mg/l BAP.Then, that embryogenic calli were evaluated for embryogenesis. The highest number of embryogenic explants was obtained in 0.5 mg/l 2,4- D and 2 mg/l BAP. The best treatment for embryogenesis was 0.75 mg/l TDZ. The number of mature embryos was increased 12.5 embryos as sucrose raised to 4.5 %. Mature embryos were transferred to a condition with the temperature of and period of 24±2°C photoperiod of 16/8 h regeneration. The results indicated that the highest number of axillury bud was obtained in medium including 4.5% sucrose and 1 mg/l BA. Also in experiments for microspore culture it was determined that best time for sampling is when the length of flower bud is 4.5 cm. At this stage stigma is shorter than anther.
