عنوان پایان‌نامه
بررسی اثرات in vitro نورو پروتکتیو نانو کمپلکس های ND-۱-s
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی - علوم سلولی وملکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس کیش شماره ثبت: 1442;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 63357;کتابخانه پردیس کیش شماره ثبت: 1442;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 63357
- تاریخ دفاع
- ۲۷ دی ۱۳۹۲
- دانشجو
- امیر حسین مقصودی
- استاد راهنما
- شاهرخ صفریان
- چکیده
- تجمع آهن یک ویژگی پاتولوژیک است که در مغز افراد مبتلا به بیماری‌های نورودژنراتیو دیده می‌شود. مقادیر بالای آهن در مغز بیماران دچار پارکینسون، آلزایمر، هانتینگتون، آتاکسی فردریش و ... دیده شده است، که با پیشرفت و درجه‌ی گرفتاری بیمار به شدت مرتبط است. وجود این تجمعات آهن موجب ایجاد تنش اکسیداتیو، صدمه به ساختارهای سلولی و بیومولکول‌ها از قبیل چربی، پروتئین و نیز ایجاد فضایی مملو از عامل‌های التهابی می‌گردد. در واقع به نظر می‌رسد که درکلیه‌ی بیماری‌های نورودژنراتیو وجود سوءتنظیم آهن دیده می‌شود. شواهدی این چنین موجب شده است که ساختارهای کلاته‌کننده‌ی آهن به عنوان مولکول‌های اثرگذار بر متابولیسم این یون در بدن، به عنوان عواملی جهت اصلاح سوءتنظیم این فلز و به تبع آن درمان اختلالات نورودژنراتیو مطرح باشند. در این بررسی اثر نانوکمپلکس‌های طراحی شده NDc-1-s , NDc-1-f , NDc-1-c بر پایه‌ی تکنولوژی Nano chelating را در مدل سلولی نورودژنراسیون بررسی نمودیم. از یک نوع لاین سلول عصبی PC-12 جهت ایجاد مدل سلولی بیماری پارکینسون به عنوان یک بیماری نورودژنراتیو استفاده شده است. معمولا برای ایجاد شرایط مشابه پارکینسون در محیط کشت سلول از سم MPTPاستفاده می‌شود. از آنجا که ایجاد تنش اکسیداتیو و مرگ نورونی از وجوه غالب پاتولوژیک بیماری پارکینسون هستند، این سم نیز با ایجاد چنین رویدادهایی در سلول قادر به شبیه سازی وضعیت بیماری مزبور در محیط کشت می‌باشد. از این رو جهت آماده سازی شرایط، ابتدا سلول را با غلظت‌های مختلف از سم MPTP برای مدت 24 ساعت تحت تیمار قرار داده، سپس با استفاده از سنجش Viability (زیستایی سلول‌ها) به کمک تست MTT assay از ایجاد وضعیت مطلوب برای شبیه سازی بیماری پارکینسون در سلول‌ها اطمینان حاصل شد. سپس تیمار‌های سلولی با غلظت‌های مختلف از نانوکمپلکس‌های ابداعی NDc-1-s , NDc-1-f , NDc-1-c صورت گرفت و اثرات این نانوکمپلکس‌ها به کمک روش وسترن‌بلاتینگ برای سنجش پروتئین‌های کاسپاز- 3، Bax وBcl-2 بررسی شدند و دقیقا همان طور که انتظار می‌رفت تاثیرات نوروپروتکتیو و مثبت نانوکمپلکس‌های طراحی شده بر پایه‌ی تکنولوژیNano chelating در بهبود وضعیت سلول‌های مبتلا به پارکینسون مشاهده شد. کلید واژه: بیماری‌های نورودژنراتیو، پارکینسون، کلاته‌کننده‌ها‌ی آهن، نانوکمپلکس‌های NDc-1-s , NDc-1-f , NDc-1-c.
- Abstract
- Iron accumulation is a pathologic property seen in the brain of affected individuals to neurodegenerative diseases. The elevated amounts of Iron has seen in Parkinson’sdisease, Alzheimer’s disease, Huntington disease, Friedreich’s ataxia and etc; which severely has correlation to progression and degree of involvement. Ocuurence of these iron aggregations cause in oxidative stress, damaging to cellular structures and biomolecules such as lipids, proteins and creating a space full of inflammatory factors. Indeed, it appears, there is Iron irregulation in all neurodegenerative diseases. Such evidence has resulted in introducing Iron chelators as effective molecules on the metabolism of this ion in the body, as an element of improving the irregulation of metal and as a result, treatment of neurodegenerative disorders. In this research,we would investigate the effect of designed nanocomplexes NDc-1-c, NDc-1-f and NDc-1-s based on Nano chelating technology in a cell model of degeneration. It is used a type of neural cell line PC-12 to create a cell model of PD (Parkinson’s disease) as a neurodegenerative disease. Usually, the toxin MPTP is used to generate the same conditions. Since the creation of oxidative stress and neural death are the dominant pathological features of PD, the toxin is able to simulating the same conditions in the cell culture by generating such events. Hence, to preparation the conditions, the cells are first treated with various concentrations of the toxin MPTPfor 24 hours, then it is assured the generation of desirable conditions to simulating the PD in the cells via Viability (cell viability) test by the aid of MTT assay. Afterwards, treating with various concentrations of the inventionalnanocomplexes NDc-1-c, NDc-1-f and NDc-1-s occurred. In addition, the effects of these nanocomplexes are investigated by the method of western blotting to evaluating Caspase-3, BAX and Bcl-2. And, the positiveneuroprotective effects of designed nanocomplexes has been observed based on Nano chelating technology in improvement of the condition of affected cells to PD, exactly as expected. Key Words: Neurodegenerative diseases, Parkinson, Iron chelators, NDc-1-c, NDc-1-f and NDc-1-snanocomlexes
