عنوان پایان‌نامه
ساخت و بررسی ویژگی داربست های نانوفیبری ژلاتین کایتوزان در مهندسی بافت شبکیه
- رشته تحصیلی
- مهندسی بافت
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 61444;کتابخانه دانشکده علوم و فنون نوین شماره ثبت: 40
- تاریخ دفاع
- ۰۲ بهمن ۱۳۹۲
- دانشجو
- بهنام نورانی
- استاد راهنما
- قاسم عموعابدینی
- چکیده
- درصورتی که عملکرد سلول‌های اپیتلیوم رنگدانه(RPE) و سلول‌های عصبی شبکیه به دلایل مختلفی از بین برود انواعی از بیماری‌ها مانند تخریب ماکولا ناشی از پیری(AMD) و رتینیت پیگمنتوزا (RP) ایجاد می‌شود. امروزه محققان در تلاش هستند با جایگزینی سلول‌های از دست رفته در شبکیه با سلول‌های سالم و کارا، شرایط مناسب برای بهبود این بیماری‌ها فراهم کنند. در این تحقیق، به کمک مهندسی بافت، داربست نانو فیبری ژلاتین-کیتوسان با میانگین قطر در حدود 180 نانومتر برای حضور در فضای زیر شبکیه از طریق دستگاه الکتروریسی طراحی شد. بررسی تخلخل، ضخامت و مورفولوژی داربست‌های ژلاتین-کیتوسان از طریق میکروسکوپ الکترونی روبشی(SEM) انجام شد که ضخامت و تخلخلی در حدود 2±30 میکرون و 57 درصد داشتند. بررسی تخریب‌پذیری داربست‌های ساخته شده در حضور آنزیم لیزوزیم نشان داد که داربست‌ها سرعت تخریب بالای دارند و بعد از گذشت 1 ماه تا 90 درصد تخریب شدند. برای بررسی سمیت داربست‌های ساخته شده، سلول‌های اپیتلیوم رنگدانه شبکیه بر روی داربست کشت داده شد و نتایج تست MTT نشان‌دهنده تکثیر سلول‌های RPE و زیست‌سازگاری مناسب داربست‌ها بود. عکس‌های میکروسکوپ الکترونی روبشی نشان داد که سلول‌های RPEبه ساختار داربست به نحوه مناسبی چسبیدند. حفظ ماهیت سلول‌های RPE بر روی داربست از طریق بررسی بیان فاکتورهای اختصاصی RPE مانند RPE65 و Cytokeratin 8/18 بررسی شد و بیان مارکرهای مورد نظر و حفظ ماهیت سلول‌ها بر روی داربست مشاهده شد.
- Abstract
- Damage of the pigmented epithelial cells (RPE) and retinal nerve cells cause various diseases such as Age-related Macular Degeneration (AMD) and Retinitis pigmentosa in retinal tissue. Nowadays, scientists are attempting to replace lost retinal cells with healthy and efficient cells which provide better conditions for recovering and preventing blindness. In this study, gelatin-chitosan nanofibrous scaffolds with mean diameters of 180 nm were fabricated for subretinal space through electrospinning. Porosity, thickness and morphology of the gelatin-chitosan scaffolds were analyzed by scanning electron microscopy (SEM). The biodegradation of the scaffolds was studied by exposure of the scaffolds to lysozyme; showing high rate of degradation i.e. 90% damage after one month. The cell viability and cytotoxicity of gelatin-chitosan nanofibers were measured by MTT assay. The cell proliferation ratio confirmed the biocompatibility of the scaffolds. The SEM results of cultured RPE on gelatin-chitosan scaffolds showed the appropriate adhesion of cells on the substrate. Besides, the identity of RPE cells cultured on the scaffolds was examined by the presence of the RPE cell-specific markers of RPE65 and Cytokeratin 8/18.
