عنوان پایان‌نامه
نقش پیوند دی سولفیدی در فرایند تجمع ایزوفرم ۴Rپروتئین تاو)
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11169ب;کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11169ب;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 59192
- تاریخ دفاع
- ۲۹ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- لیلا یوسفی
- استاد راهنما
- غلامحسین ریاضی
- چکیده
- تاو یکی از پروتئین هایی است که ساختارهای فیبریلی پلی مورفیک را ایجاد می کند. اگرچه عملکرد فیزیولوژیکی پروتئین تاو پایدارسازی میکروتوبول ها است ولی فیبریل های تاو غیرمحلول به عنوان تغییر پاتولوژیکی اصلی در چندین بیماری تحلیل سیستم عصبی که تائوپاتی نامیده می شوند،شکل می گیرد. تائوپاتی شامل بیماری هایی مثل بیماری آلزایمر و بیماری پیک است. در سیستم عصبی مرکزی ،پروتئین تاو در اثر آلترنیتیو اسپلایسینک شش ایزوفرم ایجاد میکند که دارای یک ژن منفرد بر روی کروموزوم 17 است. آلترنیتیو اسپلایسینگ mRNA پروتئین تاو ،دو نوع ایزوفرم تولید می کند که تفاوت آنها در حضور سه (3R) و یا چهار (4R) توالی تکراری پشت سر هم است. تاو یک پروتئین بسیار محلول است و نسبت به حرارت و اسید مقاوم است.پروتئین تاو دارای دو سیستئین است که می توانند باند دی سولفیدی بین مولکولی و باند دی سولفیدی درون مولکولی تشکیل دهند. ما پلیمریزاسیون تاو نوترکیب انسانی به فیبریل های هلیکال را در حضور و عدم حضور هپارین توسط سنجش فلوئورسانس تیوفلاوین T و ژل الکتروفورز و میکروسکوپ الکترونی مورد بررسی قرار دادیم. در این مطالعه هدف ما بررسی اثر باند دی سولفیدی در ساختار و عملکرد پروتئین تاو می باشد.به این نتایج دست یافتیم که سیستئین 291 و سیستئین 322 برای عملکرد این پروتئین بسیار مهم است و اثر اصلی شکل گیری باند دی سولفیدی درون مولکولی ، پایدارسازی کنفورماسیون در مکان هایی است که مستعد ایجاد تجمعات است ،پس شکل گیری باند دی سولفیدی درون مولکولی ایجاد تجمعات را در شرایط آزمایشگاهی به تاخیر می اندازد.
- Abstract
- Tau is one of such proteins that form polymorphic fibrillar structures. Although a physiological function of Tau is to stabilize microtubules, formation of insoluble Tau fibrils is a major pathological changein several neurodegenerative disease called Tauopathies. Tauopathies include a variety of diseases such as Alzheimer disease (AD) and Pick disease(PiD). In the human CNS, tau exists as six alternatively spliced isoforms,coded on a single gene on chromosome 17. Alternative splicing of Tau mRNA generates two type of repeat isoforms, which differ by the presence of either three(3R Tau) or four(4R Tau) tandem repeat sequences. Tau is a highly soluble protein and consistent with its resistance to heat and acid treatment. Tau protein, which contains two naturally occurring cystine residues, can form both intermolecular disulfide bonds and intramolecular disulfide bonds. We report heparin –dependent and heparin-independent in vitro polymerization of human recombinant Tau into paired helical filaments(PHF) as characterized by thioflavine T fluorescence assay, SDS-PAGE, and electron microscopy. In this study we aim to evaluate the effect of disulfide bonds onto the structure and function of Tau. We report that cys291 and cys322, whitin th Tau, is crucial for its function and the main effect of intramolecular disulfide formation is to stabilize conformers within the place the aggregation-prone Tau subsequences and intramolecular disulfide bonds formation retards aggregation in vitro. Key Words: tau polymerization; heparin; disulfide bonds; thioflavin T ;Alzheimer diseases.
