عنوان پایان‌نامه
مطالعه اندرکنش و تخریب هیم در هموگلوبین انسانی تحت تاثیر سدیم دودسیل سولفات و مواد افزودنی صنعتی
- رشته تحصیلی
- بیوفیزیک
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11079ب;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56771
- تاریخ دفاع
- ۰۲ اسفند ۱۳۹۱
- دانشجو
- نجمه صالحی
- استاد راهنما
- علی اکبر موسوی موحدی
- چکیده
- هموگلوبین یک پروتئین تنفسی شامل آهن در گلبول های قرمز همه عروق می‌باشد که نقش مهمی را در انتقال اکسیژن به بافت‌ها و انتقال کربن دی اکساید به طور مستقیم و غیر مستقیم دارد. سدیم بنزوات و پتاسیم سوربات به طور گسترده به عنوان نگهدارنده مواد غذایی مورد استفاده قرار می‌گیرد. این افزودنی های غذایی ضد باکتری و ضد قارچ بوده و به عنوان نگهدارنده مواد غذایی در آب میوه‌ها و دیگر نوشیدنی‌ها، لبنیات، مرباها و ترشی ها، ماهی های عمل آوری شده، چاشنی های غذایی و بسیاری از مواد غذایی دیگر مورد استفاده قرار می‌گیرد. از طرف دیگر سدیم دودسیل سولفات به عنوان عامل امولسیون کننده در بسیاری از مواد غذایی (مانند: سفیده تخم مرغ ، شیرینی¬ها ) در داروها به عنوان عامل ضد یبوست و به عنوان عامل رقیق کننده و عامل کشنده باکتری در درمان ویروس های پیشرفته و غیر پیشرفته استفاده می شود. همچنین تقریباً در تمام لوازم شوینده، بهداشتی و آرایشی کاربرد دارد. در این تحقیق با استفاده از دستگاه‌های طیف سنجی ( فرابنفش-مرئی، فلورسانس، دو رنگ نمایی حلقوی) و روش¬های مختلف مانند کمی لومینسانس و اکسیژن سنجی به بررسی اندرکنش هموگلوبین با این لیگاندها و تأثیرات این لیگاندها بر تخریب هِم پرداخته شد. نتایج حاکی از تأثیرات این لیگاندها بر ساختار و عملکرد پروتئین بوده و همچنین باعث تخریب هِم می‌شوند. سدیم دودسیل سولفات تأثیر بیشتری را نسبت به سدیم بنزوات و پتاسیم سوربات بر هموگلوبین و تخریب هِم داشته است. در این راستا با بررسی های کمی لومینسانس انجام گرفته، حضور پراکسید هیدروژن در اثر اندرکنش سدیم دودسیل سولفات با هموگلوبین بررسی شد که احتمال تخریب هِم مربوط به حضور پراکسید هیدروژن در محیط هموگلوبین می‌باشد. همچنین برای بررسی تغییر عملکرد هموگلوبین از روش اکسیژن سنجی به بررسی عملکرد هموگلوبین پرداخته شد. که نتایج حاکی از تاثیر منفی سدیم دودسیل سولفات در غلظت های بالا بر عملکرد هموگلوبین همراه با آزاد سازی بیشتر اکسیژن بوده است.
- Abstract
- Hemoglobin (Hb) is a tetrameric allosteric protein in erythrocytes. Potassium sorbate (PS) and sodium benzoate (SB) are widely used food preservatives to inhibit molds and yeasts in many foods. Sodium dodecyl sulfate (SDS) is an anionic surfactant used in many cleaning products, foods, cosmetic and pharmaceutical products. In the present study, the interaction between PS and SB with human Hb was investigated by fluorescence, synchronous fluorescence, UV–vis absorption, circular dichroism spectroscopic methods under physiological conditions. On other hand, the reaction of heme degradation of Hb by SDS and producing of hydrogen peroxide during this reaction has been studied using UV-vis and fluorescence spectroscopy and chemiluminescence methods, respectively. The fluorescence results of Hb with PS and SB showed that fluorescence quenching of Hb and also static status. The binding process is a spontaneous molecular interaction procedure, in which van der Waals and hydrogen bonds interaction and electrostatic interaction were the predominant intermolecular forces to stabilize the complex by PS and SB, respectively. The results indicated that function and Tyr and Trp environments were altered in the interaction of Hb with PS, but in the interaction of Hb with SB, just Trp were altered. Results of Hb with SDS showed heme degradation was occurring during this reaction. Hydrogen peroxide which was produced during this reaction causes heme degradation. Endogenous versus exogenous effect of hydrogen peroxide indicated that endogenous hydrogen peroxide on Hb was greater than exogenous. This is because of changing of Hb to aquametHb and hemichrome in the interaction of Hb with SDS (making endogenous hydrogen peroxide), but no changed of Hb was shown in the interaction of equivalent concentration of hydrogen peroxide that was produced during the reaction of SDS with Hb exogenously.
