عنوان پایان‌نامه
شناسایی ژن های اختصاصی هلیکوباکترپلوری ۱۶srRNA و VOCA در مخمر های جدا شده از پلاک دندانی و دهان افراد دارای دندان مصنوعی
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی علوم میکروبیولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 59835
- تاریخ دفاع
- ۱۴ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- سلماز صادقی
- استاد راهنما
- فریده سیاوشی
- چکیده
- چکیده شناسایی ژنهای اختصاصی Helicobacter pylori ; vac A و 16srRNA، در مخمرهای جدا شده از پلاک دندانی و دهان افراد دارای دندان مصنوعی مقدمه: H. pylori عامل چندین مورد از بیماری های گوارشی می باشد، اما راه انتقال آن هنوز شناخته نشده است. حفره ی دهانی به عنوان مخزنی برای این باکتری مطرح است زیرا ژن های اختصاصی این باکتری در بزاق و پلاک دندانی با استفاده از PCR تشخیص داده شده است. مطالعات اخیر نشان می دهد که مخمرها و H. pylori، هر دو می توانند در پلاک دندانی حضور داشته باشند. به علاوه حضور میزان بالایی از مخمرها در دهان افراد دارای دندان مصنوعی گزارش شده است. در این مطالعه، مخمرهای دهانی جدا شده از پلاک دندانی و دهان افراد دارای دندان مصنوعی، به عنوان مخزن احتمالی H. pylori مورد بررسی قرار گرفتند. روش ها: نمونه گیری از دهان 44 نفر از افراد دارای دندان مصنوعی و پلاک دندانی فوق لثه ای 30 فرد سالم انجام شد. 38 مخمر از 26 فرد دارای دندان مصنوعی و 5 مخمر از 4 نمونه پلاک دندانی جدا شد. مخمرها برای حذف هرگونه آلودگی باکتریایی احتمالی، بر روی محیط Yeast extract Glucose Chloramphenicol کشت داده شدند. مشاهدات میکروسکوپی انجام شد. DNAی ژنومی مخمرها استخراج شد و PCR برای تکثیر ژن های اختصاصی H. pylori (16srRNA و vacA(s1/s2)) صورت گرفت. نتایج: اجسام شبه باکتریایی در مخمرها توسط میکروسکوپ نوری و فلئورسنت مشاهده شدند. ژن H. pylori-16srDNA در 21 مخمر از 43 مخمر تکثیر شد. PCR ژن vacA(s1/s2) برای این 21 مخمرانجام شد و این ژن در تمام آن ها تکثیر شد. اندازه محصولات PCR مشابه کنترل بود. بحث: تشخیص ژنهای اختصاصی H. pylori در مخمر، نشان دهنده ی حضور درون سلولی باکتری در مخمر است که می تواند باکتری را از شرایط سخت دهانی حفظ کند و سبب انتقال آن در جمعیت شود. با توجه به آشکار شدن توانایی نفوذ این باکتری به سلول های یوکاریوت، مخمر می تواند یک کنام مناسب برای باکتری فراهم کند.
- Abstract
- Introduction: H.pylori is responsible for several gastric diseases but its route of transmission is still not clear. The oral cavity has been proposed as a reservoir for gastric H.pylori because the bacterial genes were detected in both dental plaque and saliva by PCR. Current studies indicate that both yeast and Helicobacter pylori occur in dental plaque. Furthermore a significantly high density of oral yeasts has been observed in humans with dentures. In this study we examined yeast isolates from dental plaque and oral cavity of denture wearers as the possible reservoirs of H. pylori. Methods: samples were collected from oral cavity of 44 humans with denture and supragingival dental plaque of 30 individuals. 38 yeasts were isolated from 26 humans with denture and 5 yeasts from 4 dental plaque samples. Samples were cultured on Yeast extract Glucose Chloramphenicol Agar to eliminated any bacterial contamination. Microscopic observations were performed, total DNAs were extracted from yeasts and PCR was performed to amplify H.pylori- 16s rRNA and vacA (s1/s2) genes. Results: bacterium –like bodies were observed in yeasts with light and fluorescent microscopy. H.pylori-16sr RNA gene was amplified from 21/43 yeasts. The size of the PCR products (519 bp) of all yeasts was similar to that of control. Furthermore, vacA (s1/s2) gene was amplified from all 21 mentioned yeasts. Discussion: Detection of H.pylori-specific gene in oral yeast indicate the intracellular existence of H. pylori in yeast, protecting the bacterium against stressful conditions of the oral cavity. Recent studies have shown the invasive nature of H.pylori and its ability to penetrate into different eukaryotic cells. It is proposed that yeast could provide a safe niche for H. pylori with amplesupply of nutrients to growth and spread of infection among human populations.
