عنوان پایان‌نامه
بهینه سازی کشت درون شیشه ای و بررسی اثر الیسیتورها بر میزان رشد گیاهان درون شیشه ای گل راعی بومی ایران Hypericum perforatum L
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 5375;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 58075
- تاریخ دفاع
- ۲۹ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- منیژه عبدالله پور
- استاد راهنما
- سیامک کلانتری
- چکیده
- گل راعی (Hypericum perforatum L.) یکی از مهم ترین گیاه دارویی بوده و در درمان افسردگی به کار برده می شود. عصاره این گیاه محتوی بیش از 25 ترکیب فعال است که هیپریسین، هیپرفورین و فلانویید های دیگر به عنوان متابولیت های اصلی آن گزارش شده اند. این تحقیق با هدف مطالعه تکثیر و تولید ترکیبات دارویی ارزشمندگل راعی در شرایط کشت درون شیشه ای انجام شده است. برای این منظور در سه آزمایش جداگانه جنبه های مختلف کشت درون شیشه ای گل راعی بومی ایران (توده آزادشهر) مورد بررسی قرار گرفت. در آزمایش اول با استفاده از گیاهچه های استریل حاصل از بذر، اثر غلظت و نوع سایتوکنین و اکسین بر شاخه زایی، کال زایی و ریشه زایی این گیاه ارزیابی شد. نتایج این قسمت نشان داد که 1/0 میلی¬گرم در لیتر BA به همراه 05/0 میلی¬گرم در لیتر IBA قادر به تولید شاخساره مناسب و نرمال می¬باشد و به غلظت بالای BA حساس بوده بطوریکه در غلظت بالای 25/0-1/0 میلی¬گرم در لیتر شاخساره¬های غیر نرمال تولید می کند. همچنین این گیاه از قدرت شاخه¬زایی بالای برخوردار می¬باشد و این شاخساره ها به راحتی و در محیط کشت بدون تنظیم کننده رشد، نیز ریشه¬دار می شوند. بهترین غلظت برای ریشه¬زایی شاخساره¬ها غلظت 5/0 میلی¬گرم در لیتر IBA بدست آمد. کالوس¬ها در ریزنمونه برگ و شرایط تاریکی رشد بیشتری داشته و بیشترین وزن¬تر کالوس درغلظت 25/0 میلی¬گرم در لیتر 2,4-D و یک میلی¬گرم در لیتر KIN و نیز 5/0 میلی¬گرم در لیتر 2,4-D و یک میلی¬گرم در لیتر BA بدست آمد. کالوس¬های تولید شده فشرده بوده و پس از مدت کوتاهی قهوه¬ای ¬شدند. استفاده از PVP منجر به کنترل قهوه-ای شدن کالوس¬ها نشد اگرچه رشد کالوس¬ها را بهبود بخشید و بیشترین وزن تر کالوس در غلظت 100 میلی¬گرم در لیتر PVP و ریزنمونه برگ بدست¬آمد. در آزمایش دوم اثر متیل جاسمونات و کیتوزان بر رشد کالوس و شاخساره¬ها مورد بررسی قرار گرفت که نتایج حاکی از کاهش رشد در شاخساره¬ و کالوس توسط متیل جاسمونات و افزایش بیوماس کالوس و شاخساره در کاربرد کیتوزان بود. در نهایت بازده و آنالیز اسانس شاخساره¬های درون شیشه¬ای با استفاده از دستگاه GC/MS اندازه¬گیری و با گیاهان طبیعی مقایسه شد. که سسکوئی ترپن¬های هیدروکربنه (72/51%) با جزء غالب گاما گوجونن (42/22%) به عنوان بیشترین ترکیب اسانس شناخته شد از طرف دیگر اسانس های حاصله از لحاظ کمیت و کیفیت با اسانس گیاهان طبیعی تفاوت داشتند.
- Abstract
- Hypericum perforatum L. (St. John’s wort) is the one of the most important medicinal plant and is used to treat depression. Essential of this plant was contained more than 25 active compounds. Hypericin, Hyprforin and other Flanoid have been reported as its the main secondary metabolites. This study aimed to investigate the proliferation and production of medicinal compounds in vitro culture of Hypericum. For this purpose, three separate experiments were carried out for studying various aspects of the in vitro culture of Iranian native Hypericum (Azadshahr). In the first experiment, by using sterile seedlings, effects of type and concentration of cytokinin and auxin were evaluated on the shoot, callus and root induction. The results showed that the medium containing low BA concentration (0.1mg/l BA) with 0.05 mg/l IBA is the best medium for producing maximum shoot number as well as normal shoots. However, high concentrations of BA (0.1 to 0.25 mg/l) were produced abnormal shoots. This plant also had high ability of shoot induction. These shoots were rooted easily even in culture medium free growth regulators.0.5 mg/l IBA was the best IBA concentration for root induction from produced shoots. Callus obtained from leaf explants had more growth in darkness. The highest callus fresh weight was observed on 0.25mg/l 2,4-D and 1 mg/l kin and also 0.5 mg/l 2,4-D and 1 mg/l BA. The achieved calli was compact, but they were brown shortly. To prevent browning of calli, PVP were used. It improved the callus growth. However, PVP was not able to control browning of calli. The highest callus fresh weight was obtained on 100 mg/l PVP and leaf explants. In the second experiment, the effect of methyl jasmonate and chitosan was studied on callus growth and shoot. The results showed that shoot and callus growth were reduced by methyl jasmonate. However chitosan increased callus and shoot biomass. Analysis of the essential oil yield of shoots was measured by using GC / MS. They were compared with normal plants. The Sesquiterpene Hydrocarbons (51.72%), with most of the gamma Gamma -Gurjunene (22.34%) was identified as the most essential compound. The quality and quantity of essential oils from in vivo plants and essential oils from in vitro shoots were different.
