عنوان پایان‌نامه
ارزیابی کاربرد همزمان سلول های بنیادی مزانشیمی تیمار شده با anti-mir۲۲۱ و داربست نانو الیاف دارای نانو ذرات هیدروکسی آپاتیت به روش مهندسی بافت استخوان در ترمیم نقیصه ایجاد شده در جمجمه رت
- رشته تحصیلی
- مهندسی شیمی- بیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس کیش شماره ثبت: 1881;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 68391
- تاریخ دفاع
- ۳۰ بهمن ۱۳۹۳
- دانشجو
- محیا صادقی شیخ طبقی
- استاد راهنما
- بهناز بخشنده
- چکیده
- در هنگام بروز ضایعات گسترده استخوانی فرآیند ترمیم طبیعی کافی نبوده و نیاز به پیوند بافت استخوانی ضرورت می یابد. روش های معمول درمان، پیوند استخوان بصورت آتولوگ، آلولوگ و زنولوگ می باشدکه هرکدام از این روش ها علی رغم مزیت ها دارای محدودیت های بسیاری از جمله هزینه بالا،کمبود عضو اهدایی، مسائل ایمونولوژیکی و آلودگی احتمالی عضو اهدا شده می باشند. به منظور کاهش این محدودیت ها و دستیابی به بهترین نتیجه در درمان از روش های مهندسی بافت به منظور ساخت جایگزین استخوانی بهره میگیرند. در این پژوهش سعی بر این است که از تمایز سلول های بنیادی به سلول های استخوانی درجهت فرآیند استخوان سازی استفاده شود. سلول های مورد استفاده " سلول های بنیادی مغز استخوان ران موش صحرایی" میباشند، که بعد از جداسازی مغز استخوان از ران موش در محیط مناسب کشت و براساس تصاویر میکروسکوپی و آنالیزهای مناسب تعیین هویت شدند، سپس ترانسفکشن سلول ها با anti miR- 221 صورت گرفت.ساخت داربست با روش الکتروریسی انجام وسطح آن توسط نانو ذرات هیدروکسی آپاتیت پوشش داده شد. به منظور بررسی خصوصیات داربست آنالیزهایی همچون contact angle ، FTIR و SEM صورت گرفت. کاشت سلول های ترانسفکت شده روی داربست های استریل به منظور بررسی زیست سازگاری داربست ها و نیز بررسی قدرت القایی تشکیل استخوان توسط داربست نانو الیاف پلی کاپرولاکتون پوشیده با نانو ذرات هیدروکسی آپاتیت از طریق پیوند در محل آسیب دیده جمجمه موش صحرایی از جمله نکات حائز اهمیت در این تحقیق بود. دو ماه بعد از پیوند و پس از تهیه لام بافت شناسی مشاهده شد که این نوع داربست به همراه سلول های مزانشیمی کاشته شده روی آن قابلیت القاء تشکیل استخوان را در محل آسیب دارا میباشد و نمایانگر عملکرد ایده آل نانو ذرات هیدروکسی آپاتیت روی سطح داربست و هم چنین افزایش و تسریع تمایز سلول های بنیادی به سلول های استخوانی است. نتایج رادیوگرافی و اسکن و ارزیابیهای هیستولوژی، اثرات معنی دار هم افزایی تمایز استخوانی و ترمیم جمجمه را در استفاده هم زمان از داربست پلی کاپرولاکتون پوشیده با نانو ذرات هیدروکسی آپاتیت و سلول های بنیادی مزانشیمی ترانسفکت شده با anti-miR 221 در مقایسه با سایر گروهها نشان داد. واژگان کلیدی: نانوذرات هیدروکسی آپاتیت، مهندسی بافت استخوان، سلول های بنیادی مزانشیمی، anti miR- 221
- Abstract
- Co-application of tissue engineering methods and molecular triggers could have suitable effects of bone healing. Previous studies of this team revealed the individual effects of hydroxyapatite nanoparticles and anti-mir 221 on osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells. In this research, the synergism of simultaneous application of anti-mir221 and nanohydroxy apatite grafted nanofibrous scaffold in bone healing of rat skull is investigated. The scaffolds were characterized using contact angle measurement, tensile test, scanning electron microscope and fourier transform infrared spectroscopy. The bone marrow isolated mesenchymal stem cells were transfected by anti-mir221 and seeded on scaffolds after flowcytometry characterization. Scaffolds with treated cells, pure scaffolds and scaffold with un-treated cells were transplanted to defected rat skull for two months. Radiographic and histological results demonstrated significant bone healing in the co-application of anti-mir221 and nanohydroxy apatite compared to other groups. In addition, osteogenesis was observed in scaffolds with cells in comparison to pure scaffolds in earlier phases. Keywords: anti-mir 221, mesenchymal stem cell, bone tissue engineering, nanohydroxy apatite
