عنوان پایان‌نامه
بهینه سازی کشت بافت رازیانه
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی-اصلاح نباتات
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 66729
- تاریخ دفاع
- ۱۵ بهمن ۱۳۹۳
- دانشجو
- شیوا شاهی
- استاد راهنما
- حسین رامشینی, علی ایزدی دربندی
- چکیده
- بهینه¬سازی کشت بافت رازیانه از طریق آزمایشی به‌صورت فاکتوریل با 4 تکرار در قالب طرح کاملاً تصادفی انجام شد. گیاهچه¬های سترون‌شده از بذرهای ضدعفونی شده سه اکوتیپ فسا، مشکین¬شهر و حاجی-آباد به¬ترتیب با تیپ¬های رشدی زودرس، میان¬رس و دیررس در محیط حداقل (MS 2/1) تولید شدند. جداکشت¬¬های متفاوت (برگ، ریشه، هیپوکوتیل، اپی¬کوتیل و نوک ساقه) در 12 محیط با غلظت¬های متفاوت از هورمون¬های Kin، BAP و2,4-D در محیط کشت پایه MS به‌منظور یافتن بهترین محیط باززایی، کشت گردید. در آزمایش دیگری، ریزنمونه جنین در محیط کشت پایهB5 شامل هورمون¬های BAP (با غلظت¬های صفر، 5/0 ، 1 و 5/1 میلی¬گرم بر لیتر)، NAA (با غلظت¬های صفر و 2/0 میلی¬گرم برلیتر) و IAA ( با غلظت-های صفر ، 4/0 و 75/0 میلی¬گرم بر لیتر) با چهار غلظت متفاوت آنتی¬بیوتیک سفاتوکسیم (صفر، 50، 100 و 250 میلی¬گرم بر لیتر) کشت گردید. نتایج حاصل از تجزیه واریانس داده¬های پنج ریزنمونه نشان داد که بهترین محیط کشت جهت کالوس¬زایی برای هر پنج ریزنمونه، محیط کشت با ترکیب هورمونی BAP با غلظت 25/0 میلی¬گرم بر لیتر و 2,4-D با غلظت 2 میلی¬گرم بر لیتر بوده و بهترین ریزنمونه باززا شده، ریزنمونه نوک ساقه بود. در آزمایش ریزنمونه جنین، کالوس¬زایی ریزنمونه¬ها در ترکیب هورمونی 2/0 میلی¬گرم برلیترNAA ، 4/0 میلی-گرم بر لیتر IAAو 100 میلی¬گرم بر لیتر سفاتوکسیم، باززایی مستقیم در 5/0 میلی¬گرم بر لیتر BAP و 4/0 میلی¬گرم بر لیتر IAA فاقد آنتی¬بیوتیک، باززایی غیرمستقیم در محیط کشت حاوی 2/0 میلی¬گرم بر لیتر NAA و 4/0 میلی¬گرم بر لیتر IAA با هر غلظت آنتی¬بیوتیک و چند شاخه¬زایی برای ریزنمونه جنین در محیط -کشت شامل 4/0 میلی¬گرم بر لیتر NAA و 1 میلی¬گرم بر لیتر IAA حاوی 100میلی¬گرم برلیتر آنتی¬بیوتیک بالاترین درصد را نشان داد. در ریزنمونه جنین، اکوتیپ¬ها از نظر صفات کالوس¬زایی و باززایی غیرمستقیم اختلاف معنی¬داری داشتند اما برای سایر ریزنمونه¬ها تفاوتی دیده نشد. اثرهای متقابل محیط کشت با آنتی-بیوتیک، محیط کشت با رقم، آنتی¬بیوتیک در رقم و محیط کشت با آنتی¬بیوتیک و رقم برای ریزنمونه جنین معنی¬دار شد. کلمات کلیدی: رازیانه ،کشت بافت، جنین، آنتی بیوتیک
- Abstract
- In order to optimize fennel tissue culture, an experiment was conducted in a completely randomized design with four replications. For this purpose, three ecotypes of seeds as early, middle and late growth term named Fasa, Meshkin shahr and Haji abad, respectively were surface sterilized and cultured in 1/2 MS medium without growth regulators. Different explants (leaf, root, hypocotyl, epicotyl and shoot apex) were cultured in 12 medi supplemented with different BAP, Kinetin and 2,4-D. The embryo explant was also cultured in B5 medium supplemented with BAP (0, 0.5 ,1 and 1.5 mg/l), NAA (0 and 0.2 mg/l) and IAA (0, 0.4 and 0.75 mg/l) with four different Cefotaxime concentration (0, 50, 100, 250 mg/l). According to the results of analysis of variance for five explants, the best medium for callus induction was the combination of 0.25 mg/l BAP and 2 mg/l 2,4-D and the best regenerated explant was known as shoot apex. The best mediums for the callus induction_ of embryo was NAA (0.2 mg/l), IAA (0.4 mg/l) with 100 mg/l of Cefatoxime. Also the efficient mediums for direct regeneration_ and indirect regeneration of embryo explant were 0.5 mg/l BAP and 0.4 mg/l IAA, and 0.2 mg/l NAA with the combination of 0.4 mg/l IAA with each concentration of antibiotics and the best medium for proliferation was 0.4 mg/l NAA, 1 mg/l IAA with the combination of 100 mg/l antibiotics. There were no sgnificant differences among ecotypes in five explants for the callus induction and indirect regeneration features but this was significant for embryos. The intractions of medium with antibiotic, medium with ecotype, antibiotic with ecotype and medium with antibiotic and ecotype were significant. Keywords: Fennel, tissue culture, embryo, antibiotic
