عنوان پایان‌نامه
تشخیص miRNA های مرتبط با سرطان مبتنی بر نانو خوشه های نقره
- رشته تحصیلی
- نانوبیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72538
- تاریخ دفاع
- ۰۲ اسفند ۱۳۹۳
- دانشجو
- اعظم اکبری
- استاد راهنما
- سید مرتضی حسینی
- چکیده
- microRNA ها، دسته ای از RNAهای کوچک با حدود 22 نوکلئوتید در سلول‌های یوکاریوتی هستند که نقش مهمی در تنظیم بیان ژن از طریق کنترل فرآیند ترجمه دارند. میزان بیان miRNA ها می‌تواند شاخص مفیدی برای تشخیص‌های بالینی و پیش آگهی از سرطان‌های انسانی باشد. بنابراین، به کارگیری ابزاری جدید برای تشخیص سریع، خاص و حساس miRNA ها جزء مهم‌ترین زمینه‌های پژوهشی در عصر حاضر است. با استفاده از خواص فلورسانس نانوخوشه های نقره مبتنی برDNA می‌توانmiRNA هدف را به طور اختصاصی و بدون استفاده از مولکول‌های تقویتی اضافی و برچسب زدن، شناسایی کرد. نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA متشکل از چند اتم، یک نوع جدید از نانومواد کامپوزیت آلی / غیرآلی است که نشر فلورسانس آن در طیف وسیعی از طول موج‌های مرئی تا نزدیکی مادون قرمز، به سادگی با طراحی توالی الگو، قابل تنظیم است. نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA در مقایسه با رنگ‌های آلی، روشن تر است و پایداری نوری بیشتری دارد و در مقایسه با نقاط کوانتومی، کوچک‌تر و کمتر در معرض چشمک زدن در بازه‌های زمانی طولانی است و هسته‌ی سمی ندارد. آماده سازی نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA ساده است و نیازی به حذف پیش سازهای اضافی ندارد. در این پروژه، یک روش جدید برای تشخیص microRNA-155 بر اساس فلورسانس نانوخوشه ی نقره الیگونوکلئوتیدی (DNA-AgNCs) معرفی شده است. داربست DNA با دو قطعه نوکلئوتید مختلف مورد استفاده قرار گرفته است: یک توالی غنی از سیتوزین (C12) که می‌تواند با عملکرد کوانتومی بالا از طریق یک روش کاهش شیمیایی منجر به تشکیل نانوخوشه های نقره شود؛ و از سوی دیگر قطعه‌ی پروب (5?-CTGTTAATGCTAATCGTG-3?) که به صورت انتخابی می‌تواند به miR155متصل شود. بنابراین، نانوخوشه های نقره، زمانی که به توالی هدف متصل می‌شوند خاموشی فلورسانس نشان می‌دهند. فلورسانس نانوخوشه های نقره، به شیوه ای خطی متناسب با غلظت هدف در محدوده 0.2 نانو¬¬مولار تا 30 نانو¬مولار با حد تشخیص 0.1 نانو¬مولار خاموش شد. لغات کلیدی : نانوخوشه نقره مبتنی بر DNA، miRNA، فلورسنس، نانوبیوحسگر
- Abstract
- microRNA ها، دسته ای از RNAهای کوچک با حدود 22 نوکلئوتید در سلول‌های یوکاریوتی هستند که نقش مهمی در تنظیم بیان ژن از طریق کنترل فرآیند ترجمه دارند. میزان بیان miRNA ها می‌تواند شاخص مفیدی برای تشخیص‌های بالینی و پیش آگهی از سرطان‌های انسانی باشد. بنابراین، به کارگیری ابزاری جدید برای تشخیص سریع، خاص و حساس miRNA ها جزء مهم‌ترین زمینه‌های پژوهشی در عصر حاضر است. با استفاده از خواص فلورسانس نانوخوشه های نقره مبتنی برDNA می‌توانmiRNA هدف را به طور اختصاصی و بدون استفاده از مولکول‌های تقویتی اضافی و برچسب زدن، شناسایی کرد. نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA متشکل از چند اتم، یک نوع جدید از نانومواد کامپوزیت آلی / غیرآلی است که نشر فلورسانس آن در طیف وسیعی از طول موج‌های مرئی تا نزدیکی مادون قرمز، به سادگی با طراحی توالی الگو، قابل تنظیم است. نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA در مقایسه با رنگ‌های آلی، روشن تر است و پایداری نوری بیشتری دارد و در مقایسه با نقاط کوانتومی، کوچک‌تر و کمتر در معرض چشمک زدن در بازه‌های زمانی طولانی است و هسته‌ی سمی ندارد. آماده سازی نانوخوشه های نقره مبتنی بر DNA ساده است و نیازی به حذف پیش سازهای اضافی ندارد. در این پروژه، یک روش جدید برای تشخیص microRNA-155 بر اساس فلورسانس نانوخوشه ی نقره الیگونوکلئوتیدی (DNA-AgNCs) معرفی شده است. داربست DNA با دو قطعه نوکلئوتید مختلف مورد استفاده قرار گرفته است: یک توالی غنی از سیتوزین (C12) که می‌تواند با عملکرد کوانتومی بالا از طریق یک روش کاهش شیمیایی منجر به تشکیل نانوخوشه های نقره شود؛ و از سوی دیگر قطعه‌ی پروب (5?-CTGTTAATGCTAATCGTG-3?) که به صورت انتخابی می‌تواند به miR155متصل شود. بنابراین، نانوخوشه های نقره، زمانی که به توالی هدف متصل می‌شوند خاموشی فلورسانس نشان می‌دهند. فلورسانس نانوخوشه های نقره، به شیوه ای خطی متناسب با غلظت هدف در محدوده 0.2 نانو¬¬مولار تا 30 نانو¬مولار با حد تشخیص 0.1 نانو¬مولار خاموش شد. لغات کلیدی : نانوخوشه نقره مبتنی بر DNA، miRNA، فلورسنس، نانوبیوحسگر
