عنوان پایان‌نامه
تاثیر لیتیوم بر تکوین کورتکس مغز جنین موش نژاد NMRI
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی- علوم‌جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5389;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 63555
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۸۶
- دانشجو
- فاطمه اسماعیلی
- استاد راهنما
- بهمن زینلی
- چکیده
- علاوه بر نقش دارویی، لیتیوم اخیرأ به عنوان القاءکننده مسیر اصلی Wnt, که نقش مهمی در تکوین جنینی دارد, شناخته شده است. گرچه مطالعات In vitro اهمیت مسیر Wnt را در مهاجرت, تقسیم, تمایز و بقاء نورونها نشان داده‌اند، اما شواهدIn vivo کافی در دسترس نمی‌باشد. در این کار تحقیقاتی, اثر لیتیوم به عنوان القاءکننده مسیراصلی سیگنال‌دهی Wntدر تکوین و تشکیل لایه کورتیکال مغز جنین موش به عنوان یک مدل تحقیقاتی مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله اول پژوهش، زمانبندی مراحل طبیعی تشکیل لایه کورتیکال موشهای نژاد NMRI مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله دوم، دوز مؤثر کربنات لیتیوم تعیین گردید و درمرحله سوم، در روز ??/?جنینی تزریق کربنات لیتیوم به موشهای گروه تجربی و تزریق کربنات سدیم به موشهای گروه شم بصورت داخل صفاقی انجام شد. موشهای دست نخورده به عنوان موشهای شاهد در نظر گرفته شدند.12 ساعت (روز 14 جنینی) و24 ساعت (روز ?/??جنینی) و 48 ساعت (روز?/??جنینی) پس از تزریق جنینها در هر یک از گروه‌های مذکور از رحم موشهای باردار خارج، اسلایدهای هیستولوژیکی تهیه گردید. ساختار عمومی بافتی قشر مغز (با رنگ‌آمیزی عمومی H&E) ، لایه‌بندی کورتیکال(با مطالعه الگوی بیانCSPGبه روش ایمونوهیستوشیمی) و میزان تکثیر سلولهای منطقه مجاور بطنی یا ونتریکولار(با مطالعه الگوی بیان پروتئین PCNA به روش ایمونوهیستوشیمی) مورد بررسی قرار گرفت. نتایج ما نشان می‌دهد که در جنین موشهای گروه تجربی همانند جنین موشهای گروه شم و شاهد، لایه کورتیکال (لایه CSPG منفی) در روز 14 جنینی قابل مشاهده می‌باشد. همچنین مقایسه سلولهای در حال تکثیر (PCNA مثبت) در جنین موشهای تجربی با جنین موشهای گروه شم و شاهد تفاوتی را نشان نمی‌دهد. در مجموع تیمار با لیتیوم تغییرات قابل توجهی را در مورفولوژی و سازماندهی لایه‌های قشر مغز و یا میزان تقسیم سلولی در منطقه ونتریکولار ایجاد نمی‌کند. در مطالعات آتی با تغییر در فواصل تزریق و بررسی مارکرهای مولکولی دیگر، بررسی دقیق‌تری جهت روشن‌تر شدن نقش لیتیوم و ارتباط آن با مسیر Wnt بعمل می‌آید.
- Abstract
- Lithium now a day has been introduced as a potent inducer of Wnt signaling pathway which plays a critical role during development. Although there is enough in vitro evidence on the importance of Wnt pathway on neuron migration, proliferation, differentiation and survival, insufficient in vivo evidence has been provided. In the present study, we sought to investigate the effect of lithium as an inducer of Wnt pathway on the formation and development of cortical plate in mice. Pregnant NMRI mice (day zero marked as a day of the observed vaginal plug) were set and maintained under standard condition by the Razi institute. Our results from a pilot study show that cortical plate is formed at embryonic day 13.5 (E13.5). Also to find an efficient dose of lithium carbonate, lethal dose 50% (LD50) was first determined as 385 mg/kg, hence a dose of 250 mg/kg was selected as an efficient dose. On E13.5, pregnant mice were therefore divided into two groups of experimental which were injected intraperitoneally with 250 mg/kg of lithium carbonate and a sham group which were injected with 360 mg/kg of sodium carbonate solution. An intact group of mice were also considered as a control. Mice were killed with their embryos excised after 4, 8 and 12 hours (E14), 24 hours (E14.5) and 48 hours (E15.5), fixed in Bouin's fixative and processed for histological analysis. Morphology and structure of cortices were observed using eosin & haematoxilin staining and the cortical lamination was observed using immunohistochemical localization of chondroitin sulfate proteoglycan (CSPG). Degree of proliferation in ventricular zone was assessed by immnuohistochemical localization of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Our preliminary results show that there is no significant difference either in morphology and arrangement of cortical layer or in the rate of proliferating cells in ventricular zone between the three groups.
