عنوان پایان‌نامه
بررسی بلوغ و تکوین تخمکهای نا بالغ تخمدانهای پیوندی پس از انجماد شیشه ای
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم جانوری - تکوینی جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 3982;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 44066
- تاریخ دفاع
- ۱۴ مهر ۱۳۸۸
- دانشجو
- آرش بهبهانیان
- استاد راهنما
- بهمن زینلی
- چکیده
- چکیده: هدف از انجام این تحقیق بررسی بلوغ تخمک های بدست آمده از تخمدان های منجمد شده ی شیشه ای پس از پیوند اتولوگ این بافت میباشد. در این راستا تخمدان چپ موش های 2 هفته ای تحت بیهوشی عمومی از بدن آنها جدا شد. تخمدان ها به روش شیشه ای با استفاده از محیط های با پایه EG و DMSO بر روی کرایوتاپ منجمد شدند و به مدت 2 هفته در منبع نیتروژن در دمای C°196- نگهداری شدند. پس از 2 هفته تخمدان ها ذوب شده و بلافاصله به همان موش ودر ناحیه عضله گلوتئوس پیوند زده شد. پس از 3 هفته تخمدان ها از ناحیه پیوندی خارج شده و به عنوان گروه vit-trans در نظر گرفته شدند. تخمدان سمت راست نیز در همین زمان جدا شد و به عنوان گروه Opp در نظر گرفته شد. از تخمدان موش های 7 هفته ای نیز برای گروه کنترل (7w-fresh) استفاده شد. در این مرحله تعدادی از تخمدان ها در هر گروه مراحل بافت شناسی را طی کردند و باقی برای بررسی توان تکوینی مورد کشت آزمایشگاهی قرار گرفتند. بدین منظور تخمدان های باقی مانده در تمامی گروه ها تشریح شد و پس از جمع آوری، تخمک های هر گروه به طور جداگانه تحت مراحل بلوغ آزمایشگاهی، لقاح آزمایشگاهی و کشت جنین قرار گرفتند. طبق نتایج بدست آمده امکان بقا و بازیابی فعالیت تخمدان بر طبق تکوین فولیکولها، کشت و لقاح تخمک ها و کشت جنین ها تا مرحله ی هشت سلولی، پس از انجماد تخمدان به روش شیشه ای با کرایوتاپ و متعاقبا پیوند آن در عضله گلوتئوس وجود دارد. سه لغات کلیدی: تخمدان موش، انجماد شیشه ای، پیوند اتولوگ، لقاح آزمایشگاهی، بلوغ آزمایشگاهی
- Abstract
- Abstract The aim of this study is to investigate the possibility, quantity and quality of maturation of oocytes gained from vitrified-autotransplanted mouse ovaries. For this reason, left ovaries of 2 weeks old mice were removed after anesthesia. The ovaries vitrified by cryotop method with the mediums composed of DMSO and EG and preserved for 2 weeks in liquid nitrogen tank. After 2 weeks the ovaries were thawed and immediately transplanted in the gluteus muscle of the same mouse. After 3 weeks the ovaries removed from transplantation site and considered as Vit-trans group. The right ovaries were removed at the same time and considered as Opp group. The ovaries of 7 weeks old mice were considered as experimental group (7w-fresh). On this step, some of the ovaries from each group used for histology analysis and the rest of them cultured in vitro to investigate the developmental potential. For this reason, the rest of the ovaries of each group dissected separately and the oocytes in vitro matured (IVM), fertilized (IVF) and the embryos cultured to become blastocyst. Our results suggest that there is the possibility to survive and recover the ovarian function by the consideration of follicle development, culture and fertilization of oocytes and embryo culture to eight cell stage, after vitrifying the ovary with cryotop and transplanting into gluteus muscle. Key words: mouse ovary, vitrification, autotransplantation, in vitro maturation, in vitro fertilization
