عنوان پایان‌نامه
بررسی پروفیل پلاسمیدی باکتری های سودوموناس فلوسنس تحت تاثیر مقادیر مختلف عناصر روی و کادمیوم
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 44318;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 3927
- تاریخ دفاع
- ۰۸ آذر ۱۳۸۸
- استاد راهنما
- باقر یخچالی, حسینعلی علیخانی
- دانشجو
- پویان شهیدی صادقی
- چکیده
- چکیده فلزات سنگین به علت اثرات بازدارنده ای که بر روی رشد و نمو گیاهان و ریز موجودات می گذارند، از جمله آلاینده های محیط زیست به شمار می روند و به علت توسعه کاربرد آنها در صنعت و کشاورزی، بر سلامت انسان، تولید محصولات کشاورزی و موجودات زنده اثرات نا مطلوب دارند. یکی از این ریز موجودات، باکتری های سودوموناس می باشند که نوعی باکتری آزادزی است وتوانایی تولید موادی را دارد که محرک رشد گیاه محسوب می شود. از آنجایی که وجود این باکتری ها موجب تسریع و تحریک رشد گیاه و بهبود کمی و کیفی محصولات کشاورزی می شوند، این مواد تولیدی را محرک رشد گیاه و باکتری های تولید کننده این مواد را باکتری های فرا ریشه ای محرک رشد گیاه (Plant Growth Promoting Bacteria) می نامند. این باکتری ها نیاز به محیطی متعادل از نظر عناصر غذایی پرمصرف و کم مصرف و سایر عوامل محیطی مانند اسیدیته و هدایت الکتریکی خاک دارند. با کاربرد کودهای شیمیایی و سموم دفع آفات نباتی و غیره این تعادل دستخوش تغییر می گردد و به ناچار این باکتری ها یا در مواجهه با تنش موجود، از کارایی بهینه آن ها کاسته خواهد شد. اما مقاومت گونه های مختلف باکتری در برابر آلودگی فلزات سنگین متفاوت می باشد. از آنجایی که بر اساس مطالعات، بین مقاومت به فلزات سنگین و پلاسمیدهای موجود در باکتری ها رابطه ای وجود دارد، پروفیل پلاسمیدی گونه Pseudomonas flouroscens که نوعی PGPR می باشد مورد مطالعه و بررسی قرار گرفت. باکتری ها پس از جداسازی از خاک فراریشه گیاه سویا، خالص سازی و با انجام آزمون های بیوشیمیایی و زیستی شناسایی گردید. سپس جهت تعیین میزان مقاومت این سویه ها از غلظت های مختلف روی و کادمیوم در محیط کشت جامد H.E.P.E.S,M.E.S استفاده گردید. در طول دوره گرما گذاری قطر کلونی های سویه های مختلف باکتری یادداشت و بر اساس اطلاعات به دست آمده سویه ها به چهار گروه مختلف دسته بندی گردید. سپس دو سویه برای هر گروه مقاومتی روی و کادمیوم در نظر گرفته شد. در مرحله بعد سویه ها تحت غلظت های مختلف روی و کادمیوم قرار گرفته و به مدت دو ماه گرما گذاری شدند. پس از طی مدت گرما گذاری سویه ها مجددا کشت گردیده و از کشت های حاصل با استفاده از روش لیز قلیایی پلاسمید استخراج گردید. سپس تعداد 320 پروفیل پلاسمیدی از سویه ها تهیه شد. بررسی ها نشان داد که اثرات سمی کادمیوم حتی در شرایطی که مقدار آن کمتر از روی بود، شدیدتر است. از سوی دیگر در تیمار با کادمیوم تمام سویه های مورد آزمون، پلاسمید از دست دادند. در حالی که در تیمار با روی تنها سویه شماره 38 پلاسمید از دست داد. همچنین سویه های شماره 5 ، 8 و 36 دارای مقاومت چند گانه (Multiple Different Resistance) بودند. تنها در یک مورد(سویه شماره 38) در اثر تیمار با غلظت mgl-1 150 وmgl-1 200 روی افزایش در تعداد پلاسمیدها را شاهد بودیم که می تواند در اثر جهش و پدیده حذف ایجاد شده باشد.
- Abstract
- Heavy metals are considered as environmental pollutions because of their preventability effects on plants and micro-organisms growth and have unsuitable impressions on human health , agriculture productions & living beings as their application in industry and agriculture .One of the micro-organisms is pseudomonas who is a free living bacteria and could produce some materials which is calculated plant growth stimulant .By virtue that the bacteria make acceleration of plant growth and quality & quantity improvement of agriculture productions , the production materials are named plant growth stimulant and the productive bacteria of the materials are called Plant Growth Promoting Bacteria . The bacteria needs to equivalent environment from point of useful &useless nutrition elements and other environmental factors like soil acidity and electrical conductivity. The equivalent are changing by using the chemical fertilizer and antipest , so it would decrease from optimal efficiency of the bacteria in presence with the tension . But the resistance of different types of the bacteria would different against heavy metal pollutions . As there is a relationship between the resistance to the heavy metals and plasmids in bacteria according to the studies , the plasmid profile , pseudomonas flouroscens which is kind of PGPR was studied . The bacteria was purification after isolation from soya ultra-root soil , then previewed by bio-chemical & biology tests . To determine the resistance rate of the strains , it was used from different viscosity of zinc & cadmium in solid culture medium M.E.S & H.E.P.E.S .In thermo-tropism term , the colonies diameter of bacteria different strains are noted and classified in four different groups based on access data . Then it was considered two strains for every resistance group of zinc and cadmium . After thermo-tropism term , the strains was cultivated and plasmid was exploited by using alkaloid mucous method .Then it was prepared 320 plasmid profile from strains .The studies show that cadmium poison effect even in condition that its sum was less than zinc , was severe . From the other hand in treatment with cadmium , all tested strains has lost plasmid . Although in treatment with zinc , the sole strain No. 38 has lost plasmid . Also, the strains Nos. 5, 8 & 36 have Multiple Different Resistance . The only case (strain No. 38) in treatment with zinc , viscosity 150 mgl-1 & 200 mgl-1 , we observe increasing in the numbers of plasmids plasmid , maybe under mutation and deletion phenomenon .
