عنوان پایان‌نامه
القای ریشه های موئین در گیاه باریحه ferulagammusa با استفاده از اگرو باکتریوم ریزو ژنز وتاثیر آن در تولید متا بو لیت های ثانو یه
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی-اصلاح نباتات
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 3983;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 45162
- تاریخ دفاع
- ۱۷ بهمن ۱۳۸۸
- استاد راهنما
- فرنگیس خیال پرست, منصور امیدی
- دانشجو
- فروغ منتظری
- چکیده
- باریجه از گیاهان در حال انقراض و بسیار ارزشمند دارویی، صنعتی و بومی ایران است که از اقلام مهم صادراتی کشور محسوب میشود. اخیراّ تلاشهای زیادی در زمینه تولید متابولیتهای ثانویه از طریق کشت ریشه های مویین گیاهان صورت گرفته است.درپژوهش حاضر،امکان دستورزی ژنتیکی F.gummosa با هدف القای ریشه مویین بررسی شد.به دلیل خواب طولانی بذر و منو کارپیک بودن گیاه،کشت درون شیشه ای جنین باریجه در محیط های حاوی4 سطح زغال فعال ، با روشهای مختلف کشت بذر و کشت جنین،مقایسه شد.همکشتی ریز نمونه های هیپوکوتیل،کوتیلدون،برگ،ریشه، جنین های 14-10روزه وکالوس، با استفاده از4 سویه اگروباکتریوم رایزوژنز شامل15834، A4، 1724و 2659 انجام شد. اثر3محیط کشت فاقد هورمونMS1، MS1/2 وMS1/4 برریشه زایی، بررسی شد. همچنین سه محیط MS1/4، B5وMS1/4+ VB5 به منظوراستقرار ریشه های مویین درمحیط مایع،مقایسه شد.درنهایت کشت عمودی جنین،به طوریکه نیمی از جنین درون محیط باشد و برگهای جنینی روبه بالا باشند،در محیط پایه MS1/4 جامد حاوی 5/0 گرم در لیتر زغال فعال، برای تهیه ریزنمونه های قوی برگزیده شد.القای ریشه مویین در گیاه باریجه،تحت تاثیرسویه های اگروباکتریوم رایزوژنزو نوع ریزنمونه قرار گرفت،به نحوی که بعد از حدود 14روز از تلقیح تنها ریز نمون? جنین های14-10روزه و سویه اگروباکتریوم 15834 منجر به القای ریشه مویین گردید. محیط MS1/2 برای ظهور و محیط B5 در مرحله استقرار ریشه های مویین موثر بود. ماهیت تراریختی ریشه های مویین در مقایسه با شاهد ،تایید شد . الکتروفورز محصولات PCR، تلفیق موفق T-DNA در ژنوم ریشه های مویین را اثبات کرد.
- Abstract
- Ferula gummosa B. is an endangered and highly valuable medicinal plant belonging to the Apiaceae family and endemic of Iran whose mass production is exposed to serious problems.Recently hairy root research for the production of important secondary metabolites has received a lot of attention. In this article , we study the possibility of hairy root induction ,in Ferula gummosa B. .Due to being monocarpic and prolonged seed dormancy, various methods of seed and embryo culture and 4 levels of charcoal effects were compared, in optimizing in vitro culture of medicinal plant of galbanum (Ferula gummosa B.). 4 strains of Agrobacterium rhizogenes (15834,A4. 1724,2659) were used by infecting different explants (hypocotyle, cotyledons, leaf, 10-14 day old embryo and callus ). The effects of 3 levels of hormone free MS medium(1, ½ , 1/4 ) on hairy root production were tested. In addition , the effects of basal madia types (MS1/4 , B5 , MS1/4+ VB5) were compared in establishment of hairy root cultures. Finally, the best option for steril seedling production of Ferula gummosa was vertically culture of embryo in MS 1/4 medium containing 0.5 g/L char coal. Results showed that different kinds of Agrobacterium rhizogenes and explants were affected on hairy root induction. 14 days after infection, only , 10-14 day old embryos produced hairy root by strain 15834. MS1/2 medium for appearance and B5 medium for establishment were effective.In comparison with testifier ,genetic transformation by sucssesful introducing T-DNA ,was confirmed by PCR products electrophoresis.
