عنوان پایان‌نامه
نقش نتیریک اکساید القاء شده توسط پکتین ها در پیشرفت آپوگتوز در های CH۳/B۶
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم جانوری -فیزیولوژی جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 59809
- تاریخ دفاع
- ۲۷ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- سیما پایا
- استاد راهنما
- حوری سپهری
- چکیده
- نیتریک اکساید برای اولین بار به عنوان یک فاکتور شل کننده مشتق شده از عروق((EDRF در سلولهای اندوتلیوم رگی مطرح شد. نیتریکاکسید در فرایندهای مختلف بیولوژیکی مانند انتقال عصبی، دفاع ایمنی و تنظیم مرگ تدریجی سلول(آپوپتوزیس) نقش دارد.GH3/B6 سلولهایی هستند که از تومور هیپوفیز قدامی مشتق شده اند. این سلولها قابلیت سنتز و ترشح هورمون رشد و پرولاکتین را دارا میباشند.پکتین پلیساکاریدیبا ترکیب پیچیده میباشد که از واحدهای گالاکتوزید تشکیل شده است. این ترکیب در دیواره سلولی تمام بافتهای گیاهی یافت میشود. پکتینها معمولا" از سیب، چغندر و مرکبات تهیه میشوند.در این مطالعه اثر پکتین سیب (AP)بر افزایش میزان ترشح NO و تاثیر آن بر القا آپوپتوز در دودمان سلولی GH3/B6 مورد مطالعه قرار گرفته است. دراین پژوهش سلولها با غلظتهای (3، 5/1، 1، 5/0، 1/0 و 0) AP تیمار شدند و میزان NO رها شده در زمانهای 6 و 24 ساعت بررسی شد. نتایج حاصل از این بررسی مشخص کرده که APپس از 6 ساعت انکوباسیون در این سلولها سبب رهاسازی NO میگردد. رنگ آمیزی EB/AO در این زمان نشان داد که افزایش غلظت AP سبب افزایش معنیدار درصد سلولهایی که دچار آپوپتوز شده، میگردد. ادامه بررسی بوسیله وسترن بلات پروتئینهای دخیل در آپوپتوز نشان داد که همانند نتـایج مورفولوژی با افـزایش غلظت AP سطح پروتئیـن کـاسپاز 3 در این سلولها افـزایش و پروتئین Bcl2( پروتئین آنتیآپوپتوتیک) به طور معنیدار کاهش مییابد. بررسی چرخه سلولی در این زمان نشان داد که AP سبب توقف چرخه سلولی در مرحله Sub-G1 میگردد که نشان دهنده هدایت سلولها به سمت مرگ برنامهریزی شده است. بنابراین میتوان گفت AP با القا تولید NO سبب هدایت سلولهای GH3/B6 به سمت مرگ برنامهریزی شده میگردد و تغییر بیان پروتئینهای دخیل در آپوپتوز تأیید کننده این نقش AP میباشند. با توجه به کاربرد مشتقات پکتینی در جلوگیری از پیشرفت و رشد سرطانها و تومورها و فقدان بررسی کافی در مورد اثر اسید پکتیک بر این نوع تومور، باعث شد تا اثر آپوپتوزی اسید پکتیک را روی سلولهای تومور هیپوفیز قدامی مورد بررسی قرار دهیم. واژگان کلیدی: سلول های GH3/B6، پکتین، نیتریک اکساید، آپوپتوز
- Abstract
- Nitric oxide was defined as endothelium-derived relaxing factor (EDRF) in vascular cells. NO plays role in different biological process such as immune responses and apoptosis regulation. GH3/B6 cells were derived from pituitary tumor cells. These cells are able to secrete growth factor and prolactin. Pectic acid a complex polysaccharide with galactoside units is found in the cell wall of all plants. Pectin usually derived from apple, beets and citrus. Purpose: In the present research, the effect of apple pectin (AP) on NO release and apoptosis induction in GH3/B6 cells is investigated. In this study the cells were treated with different concentrations of AP (0, 0.1, 0.5, 1, 1.5, 3 mg/ml) and the amount of NO released was determined in 6 and 24h. The results showed AP is able to induce NO releasing after 6h. During this time AP increased the number of apoptotic cells following concentration increasing which was shown with EB/AO staining studies. Western blot analysis of apoptotic proteins also showed that AP caused positive expression of Caspase3 and blocked Bcl2 level. At the same time cell cycle analysis indicated that AP blocked cell cycle in Sub-G1 phase which conducts cell to apoptosis. It can be suggested that AP is able to induce apoptosis in GH3/B6 cells via NO production. This process is identified with expression of apoptosis proteins. Due to the use of derivatives pectin in inhibition of growth cancers and tumors and lack of adequate study on the effects of acid pectic on this kind of tumor, it caused to study the AP apoptotic affect on anterior pituitary tumor cells. Key word: GH3/B6 cells, Pectin, Nitric oxide, Apoptosis
