عنوان پایان‌نامه
تاثیر استرس اکسید اتیو بر مسیر NOTCH وارتباط آن با مسیر سیگنالینگ NUMBدر رده ی سلولی((SK-N-MC
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 59716;کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 12100
- تاریخ دفاع
- ۱۷ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- مریم کمره ای
- استاد راهنما
- بی بی راضیه یزدان پرست
- چکیده
- چکیده: استرس اکسیداتیو نقشی حیاتی در بیماری زایی بیماری های تحلیل برنده عصبی مثل بیماری آلزایمر ایفا می کند. هنگامی که توازن بین تولید گونه های فعال اکسیژن و دفاع آنتی اکسیدانی از بین می رود به استرس اکسیداتیو منجر می شود که باعث مرگ نورونی در بیماری آلزایمر می شود. استرس اکسیداتیوی که توسط گونه های فعال اکسیژن به ویژه پراکسیدهیدروژن و آنیون سوپراکسید القا می شود مسیرهای سیگنالینگ متنوعی را فعال می سازد که در بیماری زایی آلزایمر نقش دارند. یکی از این مسیرها مسیر سیگنالینگ از طریق رسپتورهای Notch می باشد که پروتئین Numb به عنوان مهارکننده این مسیر مطرح شده است که در یوبی کوئیتیناسیون و تخریبNICD Intracellular Domain) (Notch نقش ایفا می کند. در این مطالعه از Curcumin به عنوان یک آنتی اکسیدان طبیعی و از EUK134 به عنوان یک آنتی اکسیدان سنتتیک استفاده گردید. توانایی این دو آنتی اکسیدان در حفاظت از سلول های نوروبلاستومای انسانی SK-N-MC در برابر استرس اکسیداتیو القا شده توسط H2O2 و منادیون مورد مطالعه قرار گرفت. این نتیجه به دست آمد که Curcumin توانایی بیشتری برای جمع آوری آنیون های سوپراکسید دارد اما EUK134 توانایی بیشتری برای جمع آوری رادیکال های هیدروکسیل تولیدی توسط پراکسیدهیدروژن دارد. بنابراین این دو آنتی اکسیدان تمایل به جمع آوری نوع خاصی از رادیکال آزاد دارند. هم پراکسیدهیدروژن و هم منادیون سبب افزایش میزان NICDو بنابراین فعال شدن مسیر سیگنالینگ Notch شدند. همچنین میزان HES1و CyclinD1 و P21 در پاسخ به این دو اکسیدان افزایش یافت که نشان می دهد هنگامی که NICD وارد هسته می شود رونویسی ژن های هدف را تحریک می کند. به طور کلی فعال شدن مسیر سیگنالینگ Notch مستقل از نوع رادیکال آزاد می باشد و از هر دو نوع آنتی اکسیدان Curcumin و EUK134 می توان برای کاهش اثرات نامطلوب رادیکال های آزاد استفاده کرد. نتایج حاصل از وسترن بلات نشان داد که آپوپتوز القا شده توسط پراکسیدهیدروژن و منادیون وابسته به P53 می باشد. به نظر می رسد که میزان پروتئین P53 در پاسخ به NICD افزایش می یابد که باعث فعال کردن P21 و سوق دادن سلول به سمت آپوپتوز می شود. همچنین افزایش میزان HES1 در پاسخ به فعال شدن مسیر سیگنالینگ Notch باعث کاهش بیان MDM2 می شود که متعاقباً به فعال شدن P53 و آپوپتوز منجر می شود.
- Abstract
- Abstract Oxidative stress plays a crucial role in the pathogenesis of neurodegenerative diseases including Alzheimer's disease (AD). Oxidative stress corresponds to imbalances between oxidant generation and antioxidant defence mechanism leading to neural death in AD. Oxidative stress induced by Reactive Oxygen Species (ROS) specially hydrogen peroxide(H 2O2 ) and menadione activates a variety of intracellular signaling pathways involved in AD. Notch signaling pathway is considered as an example of these pathways and also Numb protein has been regarded as inhibitor of Notch pathway which participates in NICD (Notch Intracellular Domain) ubiquitination and degredation. In the present study, Curcumin and EUK134 were used as natural and synthetic antioxidants, respectively. Ability of these antioxidants in protection of SK-N-MC neuroblastoma cells against ROS-induced oxidative stress was investigated. Our data showed that Curcumin is more capable to scavenge superoxide anion radicals. However, EUK134 is potent to scavenge hydroxyl radicals produced from H2O2 better than superoxide anion radicals. Thus, these antioxidants tend to scavenge special types of free radicals. Both H 2O2 and menadione increased NICD levels leading to Notch signaling activation. HES1, CyclinD1 and P21 protein levels were also increased in response to these two oxidants approving that Notch target genes are transcripted upon NICD presence in nucleus. Collectively, Notch signaling activation is independent from free radicals type and both antioxidants could be used to reduce the indesirable effects of free radicals. Western blot analysis showed that H 2O2 and menadione-induced apoptosis is dependent on P53. It is reasonable to assume that NICD expression increases in response to P53, resulting in P21 activation and
