عنوان پایان‌نامه
کشت همزمان سلول های اندوتلیال و اپی تلیال در یک بیوراکتور اختصاصی
- رشته تحصیلی
- مهندسی بافت
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 60263;کتابخانه دانشکده علوم و فنون نوین شماره ثبت: 14
- تاریخ دفاع
- ۰۴ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- علی دریاب
- استاد راهنما
- قاسم عموعابدینی
- چکیده
- با توجه به آخرین دادهها که در آوریل 2011 از سویسازمان جهانی بهداشتمنتشر گردید سالانه 7718 تن ازایرانیان و 400000 تن از آمریکایی ها به دلیل بیماری های ریوی جان خود را از دست می دهند. مرگ و میر ناشی از بیماری ریه در ایران به 7718 است که در واقع 2.29%از کل مرگ و میر ها می باشد. برای بسیاری از بیماری ها، پیوند ریه تنها درمان قطعی است، با این حال در هر سال تنها 2700پیوند ریه انجام می شودکه به دلیل کمبود افراد دهنده بامحدودیت روبرو شده است. توسعه مهندسی بافت ریه با استفاده از سلولهای خود بیمار، می تواند تاثیر قابل توجهی در درمان بیماری های ریه داشته باشد.در این پایان نامه، طراحی و امکان سنجی یک بیوراکتور که قادر به انجام کشت بلند مدت کل بافت ریه در آزمایشگاه است انجام شد. با ساخت یک بیوراکتور اختصاصی مهندسی بافت ریه، ابتدا ریه طبیعی موش طی فرآیند دسلولار کردن با استفاده از بیوراکتور سلول زدایی شدند و بافت آسلولار بدست آمد. سپس در همان بیوراکتور سلول های اندوتلیالبر روی داربست آسلولار بدست آمده کشت شدند. جهت تایید عملکرد بیوراکتور، بافت ریهطبیعی به مدت 7 روز کشت داده شد که نشان داد بیوراکتور قادر است شرایط زنده ماندن سلول ها و مورفولوژی ریه را نگه دارد. نتایج حاصل ازمیکروسکوپالکترونیروبشیبافت آسلولار نشان دهندهحذفسلولیودرعینحالحفظمعماریکلیآلوئولار است. ایننتایج،همراهبایافته های مطالعاتبافتشناسینشانمیدهدکهمعماریکلیراههواییریویوساختارآلوئولار،ازجملهجداره های آلوئولار،درداربست دسلولار شده دستنخوردهباقی مانده اند.نتایج رنگ آمیزی H&Eنشان می دهد که سلول های اندوتلیال به داربست دسلولار شده چسبیدهاند و این نشان از زنده مانی و رشد سلول ها تحت شرایط کشت در بیوراکتور در مجاورت بافت دسلولار دارد.یافته هایحاصلهاز بررسی های بافت سلول نشانی شده مجدد تواناییکشت اندوتلیومبرروی بافت ریهدسلولار شده را نشان دادند. اینیافته ها گام های اولیهدر جهت اهداف کلیدی برای ریه مهندسی بافت است. واژه‌های کلیدی: مهندسی بافت ریه، بیوراکتور مهندسی بافت، داربست دسلولار شده
- Abstract
- Based on last data which is declared by WHO in 2011, Lung disease is the most common cause of death in Iran and the United States, resulting in 7718 and 400,000 deaths respectively annually. For many diseases, lung transplantation is the only definitive treatment, yet only 2700 lung transplants are performed each year, limited primarily by a lack of donor organs. The development of engineered lung tissue, which could be created using a patient’s own cells, could have a significant impact on the treatment of end-stage lung disease. In this thesis, we describe the first work intended to engineer whole lung tissue. We utilize a decellularized rodent lung scaffold that is then seeded with pulmonary cells in order to create engineered lung tissue. We will first describe the production of a decellularized lung matrix, which retains several key characteristics of normal lung matrix and is superior to other matrix options for lung tissue engineering. We will then document the design and validation of a bioreactor that is capable of the long-term culture of whole lung tissue in the laboratory. To validate the bioreactor design, we culture native lung tissue for up to 7 days and demonstrate that the bioreactor enables the maintenance of cell viability, cellular differentiation state, and lung morphology. We then demonstrate that the decellularized scaffolds, when cultured in the bioreactor with a suitable cell source, can support the adherence of endothelial cells. In summary, this work demonstrates the development of tools, techniques and platforms for the growth of engineered lung tissues, and provides a foundation for the continued development of whole, functional engineered lung tissue. Keywords: Lung Tissue Engineering, Bioreactor,Decellularization
