عنوان پایان‌نامه
اثر افزودن غلظت زیرحد کشنده اتانول به رقیق کننده منی برای بهبود انجماد پذیری اسپرم گاو
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 5608;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 61879
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- حسین واثقی دودران
- استاد راهنما
- مهدی ژندی
- چکیده
- به کاربردن تنش در محدوده زیر حد کشندگی در فرآیند حفاظت انجمادی اسپرم موضوعی است که مطالعه¬ای بر روی آن صورت نگرفته و هنوز ساز¬و¬کار¬های مولکولی آن شناخته نشده است. مطالعات جدید نشان می¬دهد که قرار¬دادن سلول در یک شرایط استرس¬زای کنترل شده می¬تواند بر زنده¬مانی سلول در مراحل بعدی تأثیر مفیدی بگذارد. در این آزمایش اثر افزودن غلظت¬ زیر حد کشنده اتانول به رقیق-کننده منی برای بهبود انجماد¬پذیری اسپرم گاو مورد آزمایش قرار گرفت. نمونه¬های منی از چهار راس گاو نر نژاد هلشتاین با استفاده از مهبل مصنوعی جمع¬آوری شد. گروه¬های تیماری شامل غلظت¬های صفر، 01/0، 03/0، 06/0، 09/0، 15/0 درصد اتانول مطلق در رقیق¬کننده تجاری اپتیدیل بود. نتایج این آزمایش نشان¬دهنده آن است که رقیق¬کننده حاوی 09/0 درصد اتانول (E9) دارای درصد بالایی از جنبایی کل، جنبایی پیش¬رونده و زنده¬مانی است. با وجود این که تفاوت معنی¬داری در یکپارچگی غشای پلاسمایی بین تیمار¬ها مشاهده نشد، اما میزان پراکسیداسیون لیپیدی در تیمار E9 (62/0) کاهش معنی¬داری با تیمار شاهد (93/1) داشت. همچنین نتایج نشان داد که اسپرم¬های با میتوکندری فعال در تیمار E9 بالاترین درصد (08/57) را داشتند و نسبت به تیمار¬های حد واسط E6 (38/40) ,E3 (38/16)و شاهد (49/13) تفاوت معنی¬داری در میزان فعالیت میتوکندریایی مشاهده شد. نتایج ارزیابی جا¬به¬جایی فسفاتیدیل¬سرین غشا نیز نشان داد که تیمار E9 دارای بالاترین درصد اسپرم¬های زنده (62/94) و کمترین درصد اسپرم¬های آپوپتوز¬شده (10/56) می¬باشد. نتایج نشان دهنده آن است که پاسخ اسپرم¬ها به استفاده از اتانول در رقیق¬کننده وابسته به غلظت می¬باشد. در این پژوهش افزودن میزان 09/0 درصد اتانول به عنوان غلظت زیر حد کشنده به رقیق کننده موجب افزایش مقاومت نسبت به محافظت انجمادی شد.
- Abstract
- Applying stress in sub-lethal range in the process of cryopreservation of sperm is a field that hasn’t been studied and its molecular mechanisms have not been identified. New studies show that putting the cell in a stress situation could have a positive impact on its survival. In this experiment, effect of adding sub-lethal concentration of ethanol to semen diluent to improve bull’s sperm freezability was examined. Semen samples from 4 bulls of Holstein were collected using artificial vagina. Treated groups included 0, 0/01, 0/03, 0/06, 0/09, and 0/015 percent absolute ethanol in optidyl commercial diluent. The results of this experiment indicate that 0/09% ethanol (E9)-containing diluent has a high percentage of total motility, progressive motility, and viability. In spite of the fact that there was no significant difference in plasma membrane integrity among treatments, there was a significant difference between lipid peroxidation amount in treatment E9 (0/62) and the treatment of control (1/93). Results also showed that sperms with active mitochondria in treatment E9 had the highest percentage (57/08) and there was a significant difference in mitochondrial activity compared to mediocrity treatments E3 (38/18), E6 (38/40), and controls (49/13). The results of evaluating displacement of membrane phosphatidylcholine showed that the treatment E9 has the highest percentage (62/94) of living sperms and the lowest percentage of apoptotic spermatozoa (10/56). The results suggest that sperms’ response to using ethanol in diluent is dependent on its concentration. In this study, addition of 0/09 ethanol as the sub-lethal concentration to the diluent leads to increase in resistance against cryopreservation.
