عنوان پایان‌نامه
اثر گیاه Salvia sahendica (مریم گلی) و دوکسوروبیسین روی مرفولولژی، سیکل سلولی و آپوپتوز در سلول های سرطان پروستات انسانی LNcap
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم جانوری -فیزیولوژی جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5215;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 60570
- تاریخ دفاع
- ۲۴ آذر ۱۳۹۲
- دانشجو
- رویا تمیمی
- استاد راهنما
- حوری سپهری
- چکیده
- درمان‌های ترکیبی می‌توانند باعث بهبود اثرات درمانی گردند و نیز از طریق فعالیت سینرژیسمی، از اثرات جانبی داروها، بکاهند. در پژوهش حاضر بررسی کردیم که آیا اثر ترکیبی عصار S.sahendica/داروی دوکسوروبیسین، باعث القای آپوپتوز در سلول‌های سرطان پروستات انسانی، LNCaP می‌شود و این که آیا این اثر از نوع سینرژیستیک است یا خیر؟ سلول‌های LNCaP، با دوزهای مختلف عصاره (???،??،??،?و ??? m/ml) و دارو (???،??،??و ??? nm/ml) به تنهایی و هم به صورت ترکیبی (دارو پیش از عصاره، بعد از عصاره و همراه با عصاره) تیمار شدند. تست MTT به منظور مطالعه اثر ترکیبی عصاره و دارو انجام شد. بیشترین اثر کاهش زیستایی هنگامی مشاهده شد که ابتدا دوز موثر دارو و سپس دوز موثر عصاره را به سلول ها اضافه کردیم (3%/17زیستایی). میزان سلول‌هایی که دچار آپوپتوز و یا نکروز شده بودند به وسیله رنگ امیزی با اتیدیوم برماید و آکریدین اورنج تعیین شد. شمارش سلول‌ها مشخص کرد که بیشترین میزان آپوپتوز هنگامی رخ می‌دهد که سلول‌های LNCaP ابتدا با دوز موثر دارو و سپس دوز موثر عصاره تیمار شوند (27%/34). بررسی چرخ سلولی توسط رنگ آمیزی قطعات DNA با رنگ پروپودیوم یداید و خواندن توسط دستگاه فلوسایتومتری انجام شد. بر اساس این آزمایش، تیمار سلول‌ها با دوز موثر دارو در ابتدا و سپس دوز موثر عصاره، باعث القای 44%/95 توقف در فاز subG1 و تیمار با دوز بی اثر دارو در ابتدا و سپس دوز موثر عصاره، باعث القای 76/47 % توقف در فاز G2/M می گردد. براساس مشاهدات انجام شده در این آزمایشات عصار S.sahendica دارای اثر القای آپوپتوز بر روی سلول‌های LNCaP است. از طرفی تیمار ترتیبی سلول های LNCaP با ترکیبی از این عصاره و داروی دوکسوروبیسن، دارای اثر سینرژیسم بر روی القای کشندگی در این سلول‌ها می‌باشد.
- Abstract
- Combination therapy can be improved therapeutic effects and reduced side effects of medications through synergistic activity. we investigated whether the combined effect of Salvia.sahendica extract/ doxorubicin chemotherapy drug induces apoptosis in human prosate cancer cell line, LNCaP. DOXO's most distinctive adverse effect is cardiotoxicity. LNCaP cells were treated with different dose of salvia (5,25,50,100 and 150µM) and DOXO (10,50,100 and 200 nM) alone and in combination (DOXO before salvia, after salvia and with salvia). The effective dose of DOXO and salvia were determined 180±1.84 and 130±2.37, respectively. MTT assay was performed to study the sequence and simultaneous combined effect of DOXO and salvia. Most cytotoxic effect was observed when the effective dose of DOXO was followed by effective dose of salvia (3.17% viability). Cells that undergo apoptosis or necrosis were determined by Acridine Orange/Ethidium Bromide (AO/EB) Staining method. Cell counting revealed that the greatest amount of apoptosis occurs when the cells are treated with an effective dose of DOXO following by effective dose of salvia (27.34%). calculating CI (combination index) by compusyn software revealed synergistic interaction between S.sahendica extraction and DOXO in LNCaP cells. Analysis of Cell cycle by flow cytometry revealed the effective dose of DOXO following by effective dose of salvia induced 44.9 % subG1arrest That was higher than the effective dose of DOXO (3.49%) or salvia (35.33%) alone. Also cells treated with noneffective dose of DOXO following by effective dose of salvia revealed 76.47% G2/M arrest that was higher than the effective dose of DOXO (62.42%) or salvia (11.09%) alone. Based on this observations the extraction of S.sahendica induces apoptosis in LNCaP cells and the sequence combination treatment resulted in synergistic effects in LNCaP cells. In this way the side effects of DOXO can reduce by reducing its dose from 180 nM/ml to 10 nM/ml .
