عنوان پایان‌نامه
« مطالعه ویروسهای بذر زاد لوبیا چشم بلبلی در توده های بذری آن »
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی - بیماری شناسی گیاهی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6150;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 65886
- تاریخ دفاع
- ۲۵ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- زهرا زهدی سیناب
- چکیده
- در تحقیق حاضر به منظور شناسایی ویروس¬های بذرزاد لوبیا چشم بلبلی 200 ژنوتیپ از بانک ژن (دانشکده¬ی کشاورزی دانشگاه تهران) و هفت رقم محلی از شهرهای تبریز، اهواز، کرمان، زنجان، شیراز، خرم آباد و کرج مورد استفاده قرار گرفت. از میان بذور کاشته شده در گلخانه¬، بوته¬های سبز شده با علائم ویروسی با آزمون¬های سرولوژیکی الایزا و TPIA با آنتی¬سرم-هایBCMV، SMV،CABMV، TRSV، TSV، TBRSV، CSMV، ToMV، AMV، CPMV، CMMV، CMoV، CMV، SBMV، TRV و RuCMV مورد بررسی قرار گرفتند. درصد آلودگی بر اساس نتایج بدست آمده بیانگر آلودگی به ویروس-های AMV، CPMV، CPMMV،CMoV ، CMV، SBMV، TRV و RuCMV به ترتیب 08/2، 3/3، 96/2، 87/1، 21/11، 74/0، 74/4 و 4/2 بود. بیشترین درصد آلودگی مربوط به ویروس موزائیک معمولی لوبیا و ویروس موزائیک خیار بود. ارقام اهواز و کرج بیشترین و ژنوتیپ-های بانک ژن کمترین درصد آلودگی بذری را نشان دادند. آلودگی بذری درگیاهان مایه¬زنی شده به ویروس¬های TRV و RuCMV، 61/5 و 94/3 درصد بود. درصد بذرزادی ژنوتیپ¬های بانک ژن به ویروس¬های TRV، RuCMV، CMV و BCMV در شرایط مزرعه¬ای در هفته¬های سوم و هفتم پس از کاشت به¬ ترتیب 33/1 و 6 درصد برای CMV، 2 و 8 درصد برای BCMV به دست آمد. هیچ کدام از این گیاهان به ویروس¬های TRVو RuCMV آلوده نبودند. با استفاده از الکتروفورز پروتئین(SDS-PAGE) و وسترن بلات وزن مولکولی پروتئین پوششی ویروس¬های BCMV، TRV، RuCM و CMV به ترتیب 5/34، 29، 31 و 5/24 تخمین زده شد. سپس واکنش RT-PCR با استفاده از جفت آغازگرهای مربوط به ناحیه¬ی کد کننده پروتئین پوششی برای ویروس¬های BCMV، TRV، RuCM و CMV انجام شد و به ترتیب قطعات1400، 463، 750 و 675 جفت باز تکثیر و توالی نوکلئوتیدی تکثیر شده CMV و RuCMV تعیین شدند. این اولین گزارش از آلودگی لوبیا چشم بلبلی به ویروس¬های RuCMV و TRV و بذر زاد بودن این ویروس¬ها در لوبیا چشم بلبلی در دنیا می¬باشد.
- Abstract
- This study was carried out to detect the presence of Cowpea seed borne viruses in 200 regenerated cowpea germplasm from the genebank collection of the College of Agriculture & Natural Resources of Tehran University and 7 Local varieties of Tabriz, Ahwaz, Kerman Branch, Shiraz, Khorramabad. Out of the samples grown in a greenhouse, samples with viral symptoms investigated with ELISA and TPIA tests.Viral infected samples was tested with BCMV, SMV, CABMV, TRSV, TSV, TBRSV, CSMV, ToMV, AMV, CPMV, CMMV, CMoV, CMV, SBMV, TRV and RuCMV Anti-serums. Infection rate for AMV, CPMV, CPMMV, CMoV, CMV, SBMV, TRV and RuCMV were 2.08%, 3.3%, 2.96%, 1.87%, 11.21%, 0.74%, 4.74% and 2.4% , respectively and any infection was not found with other Anti-serums. Higher infection rate was related to Bean common mosaic virus and cucumber mosaic virus. Karaj and Ahvaz Varieties and gene bank genotypes had shown highest and lowest seed infection rate, respectively. Seed-infection rate in inoculated plants was 5.61% and 3.94% for TRV and RuCMV, respectively. Seed-infection rate of gene bank genotypes for TRV, RuCMV, CMV and BCMV under field condition in 3rd and 7th weeks was investigated and results showed 1.33% and 6% for CMV and 2% and 8% for BCMV and none of them were infected by TRV and RuCMV. Molecular weights of virus coat protein were estimated 34.5, 29, 31 and 24.5 KD for BCMV, TRV, RuCM and CMV, respectively, Using protein electrophoresis (SDS-PAGE) and Western-blot. Then 1400, 463, 750 and 675 bp fragments from encoding coat protein of BCMV, TRV, RuCM and CMV virus have been amplified with RT-PCR reaction and amplified fragments of CMV and RuCMV were sequenced. This is the first time that TRV and RuCMV viruses have been identified in cowpea using ELISA, RT-PCR and sequencing approaches and TRV and RuCMV have been identified as seed-borne viruses in cowpea.
