عنوان پایان‌نامه
طراحی و ساخت نانو سامانه گرافن -نقره - هرسپتین و بررسی اثر گذاری ان بر رده سلول سرطانی
- رشته تحصیلی
- مهندسی شیمی- بیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس یک فنی شماره ثبت: 1835.;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 79885;کتابخانه پردیس یک فنی شماره ثبت: 1835.;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 79885
- تاریخ دفاع
- ۰۴ بهمن ۱۳۹۵
- دانشجو
- حسین گلزار
- استاد راهنما
- فاطمه یزدیان
- چکیده
- هدف از پژوهش حاضر تهیه نانوهیبرید هدفمند اکسید گرافن- نقره-تراستوزوماب (هرسپتین) به منظور اثرگذاری بر رده سلول سرطانی سینه می‌باشد. مکانیزم عملکرد این نانوسامانه بر پایه اتصال هدفمند تراستوزوماب (هرسپتین) به گیرنده‌های Her2 موجود در سطح سلول‌های سرطانی و تأثیر آنتی اکسیدانی یون نقره بر این سلول‌ها استوار می‌باشد. بدین ترتیب اکسیدگرافن به روش هامر بهبود یافته سنتز شد و سپس با استفاده از آنالیزهایی نظیر UV-Spectroscopy، FTIR، XRD، Raman، SEM و TEM اکسید گرافن سنتز شده تعیین مشخصه شد. در ادامه از طریق افزودن محلول نیترات‌نقره و به تبع آن کاهش یون‌های نقره در محول اکسیدگرافن، نانوهیبرید اکسیدگرافن- نقره تولید شد و با استفاده از روش نقره سنجی موهر و آنالیز UV-Spectroscopy، آنالیز آماری جهت بیشینه کردن میزان بارگذاری نقره بر روی اکسیدگرافن انجام شد. براساس نتایج، شرایط بهینه با توجه به بیشترین میزان بارگذاری نقره، برای دما برابر با 40 درجه سانتی گراد و برای زمان 87/9 دقیقه حاصل شد. اتصال نقره به اکسیدگرافن توسط آنالیزهای FTIR، TEM و XRD مورد تأیید قرار گرفت. سپس با استفاده از روش EDC/Sulfo-NHS تراستوزوماب هم به عنوان عامل هدفمندسازی و هم به عنوان دارو به نانوهیبرید اکسیدگرافن-نقره متصل شد. اطمینان از اتصال تراستوزوماب به نانوهیبرید اکسیدگرافن-نقره به وسیله آنالیز FTIR مشخصه یابی و تشکیل پیوند آمید تأیید شد. در ادامه تست SRB به منظور بررسی میزان سمیت نانو هیبرید سنتز شده در محیط برون تن انجام گرفت. برای این منظور، مقدار 5-50?g/ml از سه ترکیب اکسیدگرافن، اکسیدگرافن-نقره، اکسیدگرافن-نقره-تراستوزوماب (هرسپتین) بر رده سلول سرطانی MCF-7 اثر داده شد و نتایج حاصله پس از گذشت 24 و 48 ساعت گزارش شد. با توجه به نتایج، اثر کشندگی نانوهیبرید اکسیدگرافن-نقره-تراستوزوماب (هرسپتین) در مقدار 10?g/ml بسیار مطلوب بوده و در واقع این مقدار سبب کشندگی 50% (IC50) سلول‌های سرطانی شده است که این مقدار در مقایسه با کشندگی 35% داروی ضد سرطان 5-FU نشان از مؤثر بودن هدفمندسازی نانوهیبرید سنتز شده دارد.
- Abstract
- In this study, graphene oxide (GO)-silver (Ag)-trastuzumab (Herceptin) targeted nano hybrid was performed, to affect breast cancer cell lines. The operation mechanism of this nano system is based on targeted connection of trastuzumab to Her2 receptors which exist on the surface of cancer cells and anti-oxidant effect of Ag ions on these cells. Hence, GO was synthesized by improved Hummers method and then FTIR, XRD, Raman, SEM, UV-Spectroscopy and TEM analysis were performed to characterize synthesized GO. GO-Ag nano hybrid was performed by adding silver nitrate solution and reducing Ag ions in the GO solution. In addition, the amount of loaded Ag on the GO surface was detected by using Mohr Argentometry and UV-Spectroscopy analysis in order to maximize the Ag loading by using statistical analysis. The results showed that the optimum condition for temperature and time, according to the highest amount of loaded Ag, is 40 oc and 87.9 min, respectively. Moreover, the Ag conjugation to the GO was confirmed by FTIR, TEM and XRD analysis. At the next step, trastuzumab was conjugated to the GO-Ag nano hybrid as a targeted factor and medicine by using ECD/Sulfo-NHS method. The GO-Ag-trastuzumab nano hybrid was characterized by FTIR and formation of amide bond was confirmed. Furthermore, SRB test was used to evaluate in vitro cytotoxicity of synthesized nano hybrid. GO, GO-Ag and GO-Ag-trastuzumab were used with 5-50?g/ml to affect MCF-7 cancer cell line and results were reported after 24 and 48 hours. Statistical results indicated that cytotoxicity effect of GO-Ag-trastuzumab nano hybrid with 10?g/ml is desirable and it caused the death of 50% of cancer cells (IC 50), consequently the efficacy of targeting was determined by comparing the death of cancer cells that caused by 5-FU anticancer drug (35%) and synthesized nano hybrid.Keywords: Graphene oxide, nano hybrid, trastuzumab (Herceptin), silver (Ag).
