عنوان پایان‌نامه
(بررسی تاثیرات فاکتور رشد FGF-۱۰ بر روند انتقال سلولهای اپیتلیال به مزانشیمال (Epithelial –to-Mesenchymal Transition)و ایجاد متاستاز در دو رده سلولی سرطان پستان)
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11157ب;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 58497
- تاریخ دفاع
- ۰۵ مهر ۱۳۹۱
- دانشجو
- علی ابوالحسنی
- استاد راهنما
- غلامحسین ریاضی
- چکیده
- امروزه سرطان یکی از شایع ترین و در عین حال مهمترین بیماری ها در سراسر جهان می باشد و تحقیقات گسترده ای در جهت پیشگیری و درمان سرطان صورت می گیرد. یکی از عوامل ایجاد مرگ در سرطان، متاستاز آن به قسمتهای مختلف بدن است که این حالت در انواع مختلف سرطان ایجاد می شود و به عنوان تومورهای بدخیم شناخته می شود. ایجاد متاستاز نتیجه تغییرات زیادی در سیستم ملکولی بدن و توده توموری می باشد که یکی از این موارد ایجاد حالت EMT است که در آن سلوهای اپیتلیال به سلولهای مزانشیمال که دارای قدرت تحرک زیادی می باشند، تبدیل می شوند. فاکتورهای ملکولی و سیگنال های سلولی زیادی در ایجاد حالت EMT نقش دارند که این عوامل در کنار هم سبب بروز EMT می شوند. یکی از این عوامل فاکتور رشد FGF می باشد که در تحقیقات بسیاری ثابت شده است که این فاکتور در ایجاد تمایز، رگ سازی، تکثیر و مهاجرت سلول های توموری دخالت دارند. امروزه تحقیقات بسیاری بر روی این مسیر سیگنالی انجام شده است و تمرکز بیشتر این تحقیقات بر روی شناسایی تاثیرات این فاکتور در روند ایجاد مراحل مختلف سرطان بوده است تا شاید به کمک این اطلاعات راهی جهت مهار مسیرهای مربوطه و درمان سرطان یافت شود. در بین این خانواده فاکتور FGF10 را مورد بررسی قرار دادیم. تحقیقات نشان داده است که این فاکتور نقش مهمی در مراحل مختلف جنینی مخصوصا در مرحله گاسترولاسیون دارد. همچنین این فاکتور باعث ایحاد EMT در مرحله گاسترولاسیون می گردد. با توجه به این اطلاعات به بررسی تاثیر این فاکتور در ایجاد EMT در مرحله متاستاز سرطان پرداختیم. در این مطالعه به بررسی میزان تاثیر فاکتور FGF10 در دو رده سلولی سرطان پستان پرداختیم. در ابتدا توسط روش های MTT و Colony agar assay نشان دادیم که این فاکتور به ترتیب در زنده مانی و تومورزایی سلول ها نقش تحریکی دارد و باعث افزایش این ویژگی ها می شود. همچنین با روش های رنگ آمیزی Hoechst و AO/Eth به این نتیجه رسیدیم که این فاکتور باعث عدم ایجاد آپوپتوز می گردد. در ادامه نقش افزایش دهندگی این فاکتور در تحرک و تهاجم سلول ها را با روش Matrigel Migration assay و wound healing assay نشان دادیم. و در نهایت میزان بیان فاکتورهای اختصاصی که در مکانیسم EMT دخالت دارند را با روش Real time PCR مورد بررسی قرار دادیم . نتایج نشان داد که این فاکتور باعث افزایش میزان بیان فاکتورهای مزانشیمالی می گردد و در نقطه مقابل میزان بیان فاکتورهای اپیتلیالی را کاهش می دهد. با توجه به این نتایج می توانبه این استنباط رسید که فاکتور FGF10 می تواند باعث افزایش حرکت و مهاجرت سلول ها و افزایش احتمال ایجاد EMT و متاستاز گردد.
- Abstract
- Nowadays cancer is one of the most important and widespread disease in the world and many wide researches apply to treatment and prevention of cancer. One factor that cause death in cancer is metastasis of that cancer to others part of body that can incidence in many kind of cancer and we can name this situation to malignant tumor. Incidence of metastasis is result of many variation on molecular system of the body and tumor that one state of that is incidence of EMT (Epithelial to Mesenchymal Transition). In this state epithelial cells transform to mesenchymal cells that have high potential of mobility and migration. Many kind of molecular factors and cellular signaling have role in incidence of EMT that these factors work with together and cause EMT incidence.one of these factors is FGF (fibroblast growth factor) that in many researches ascertain that FGF have important role in differentiation, angiogenesis, proliferation and migration of tumor cells. Nowadays many researches occur on this signaling pathway and more focus of these researches is on detection effects of this factor in occurrence of different procedure in cancer until these data can help to find methods for inhibit of signaling and treat cancer. We investigate FGF10 in this family. Researches demonstrate this factor has important role in different steps of embryonic specially in gastrulation. Also this factor can induce EMT in gastrulation. So we investigate effects of this factor in induction of EMT in metastasis step of cancer. In this study we investigate effects of this factor on two breast cancer cell lines. At first via MTT assay and colony agar assay demonstrated, this factor has inductive role on viability and tumorigenesis of cells respectively and can increase these property. Also by Hoechst and Acridine Orange/ Ethidium bromide staining method find this result that this factor can inhibit apoptosis occurrence. In next step demonstrate effect of this factor on increase migration and invasion of cells via matrigel migration assay and wound healing assay respectively. Finally investigate expression rate of specific factors that have important role in EMT by Real time PCR method. Data shows that this factor can increase expression rate of mesenchymal factors and in the other hand decrease expression rate of epithelial factors. According to this result we can find that FGF10 factor not only can increase migration and mobility of cells but also can increase probability of incidence EMT and metastasis.
