عنوان پایان‌نامه
مطالعه ی بیان چندژن هدف B-Catenin درسلول هایHT-۲۶تیمارشده بافعال کننده های Gaq
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم‌سلولی‌مولکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 4921;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56068
- تاریخ دفاع
- ۲۷ شهریور ۱۳۹۱
- دانشجو
- مصطفی زمانی
- استاد راهنما
- سیدمحمود عرب نجفی
- چکیده
- پروتئین ?-Cateninیکی از ملکولهای کلیدی در مسیر پیامرسانی Wnt/?-Catenin میباشد که در فرآیندهای مختلف سلولی نقش دارد. این مسیر پیامرسانی با ممانعت از فعالیت کمپلس تخریب، سطح پروتئین ?-Catenin آزاد سلولی را افزایش میدهد که در نتیجه باعث ورود این پروتئین به هسته و افزایش بیان ژنهای هدف آن میگردد. فعالیت غیر عادی پروتئین ?-Cateninدر عده از بیماریها از جمله سرطان روده مشاهده شده است. گیرندههای مسیر Wnt از نظر ساختاری شباهت زیادی به گیرندههای GPCR (G-Protein Coupled Receptors) دارند. مطالعات قبلی و کنونی دانشمندان نیز شواهد افزایندهای را در وجود رابطه بین این دو مسیر نشان میدهد. مطالعات آزمایشگاه ما نیز نشان داده است که فعال شدنِ G?q باعث ممانعت از فعالیت آنزیم GSK3-? و در نتیجه افزایش میزان درون سلولی پروتئین ?-Cateninمیگردد. از این رو تصمیم بر آن شد، تا برای مطالعه و درک بهتر این رابطه از سلولهای HT-29 که در واقع گرفته شده از آدنوکارسینومای روده میباشند استفاده شود. این سلول ها با فعال کنندههای G?q مانند ترومبین و کارباکول تیمار شدند و تغییرات بیان ژنهای هدف پروتئین ?-Cateninدر این سلول ها توسط آزمایشات PCR و سیستم گزارشگر TOPflash بررسی شد. این آزمایشات نشان داد که آگانویست‌های G?q باعث تحریک بیان ژنهای هدف پروتئین ?-Cateninمی‌شود (کمتر از دو برابر) که این تحریک پذیری در سیستم گزارشگر TOPflash بیشتر قابل مشاهده بود ( تا حدود دو برابر و نیم.)
- Abstract
- ?-Catenin is one of the key molecules of the Wnt/?-Catenin pathway which plays an important role in different cellular functions. Wnt/?-Catenin pathway increases the free cellular level of ?-Catenin protein by blocking the function of the destruction complex. This increase, therefore, causes the entrance of ?-Catenin into the nucleus and transcription of its target genes. Aberrant activity of ?-Catenin protein has been observed in many different diseases such as colon cancer. Wnt receptors have a structural similarity to GPCRs. The works of scientists has shown an increased evidence for existence of a relation between these two pathways. Experiments from our laboratory also showed that the activation of G?q inhibits the GSK3-? enzyme activity, and thus causes and increase in the level of free cellular ?-Catenin. Therefore to better study and understand this relationship, we decided to use adenoma carcinoma HT-29 cells. These cells were treated with G?q activators such as Thrombin and Charbachol, and the variation in ?-Catenin target genes were investigated by measuring these variations by PCR and TOPFlash reporter assay. Our experiments showed that G?q agonists stimulates the expression of ?-Catenin target genes (less than two times), this stimulation was more significant in TOPflash reporter assay experiments (less than two and a half times).
