عنوان پایان‌نامه
بررسی تاثیرات کمبود کولین جیره غذایی بر عوامل درگیر در تنظیم چرخه سلولی و حیات آن
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 44481;کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 10751ب
- تاریخ دفاع
- ۳۰ شهریور ۱۳۸۸
- دانشجو
- صفیه آقازاده اصل دین آباد
- استاد راهنما
- بی بی راضیه یزدان پرست
- چکیده
- بیماری کبد چرب غیر الکلی (NAFLD) شایع‌ترین بیماری مزمن کبدی است که اغلب با ناهنجاری‌های متابولیکی از جمله مقاومت انسولینی، چاقی و هیپر لیپیدمی دیده میشود. استئوهپاتیت غیر الکلی (NASH) تنها یک مرحله از طیف گسترده NAFLD است که با تجمع چربی در هپاتوسیت، بالونینگ، التهاب و گاهی فیبروز تشخیص داده میشود و می‌تواند به سیروز و سرطان کبدی منتهی گردد. علیرغم تلاش‌های گسترده برای شناسایی مکانیسم بیماری‌زایی NASH، هنوز مکانیسم دقیق بیماری ناشناخته است. با این وجود، استرس اکسیداتیو و آسیب‌های ناشی از آن نقش مهمی را ایفا می‌کند. از این رو، مطالعات متعددی جهت استفاده از آنتی اکسیدان‌ها در درمان NASHسوق داده شده‌اند. لذا در این مطالعه اثرات دو گیاه توکریوم پولیوم و سیلیبوم ماریانوم با قدرت آنتی اکسیدانی بالا بر NASH و یکسری از مسیرهای سیگنالینگ درگیر در بیماری‌زایی NASH از جمله MAPKها، مسیر AKT/PKB، پروتئین‌های مهارکننده تومور و فعالیت کاسپاز3 به عنوان مارکر آپوپتوز، در مدل غذایی فاقد متیونین و کولین مورد ارزیابی قرار گرفت. در مطالعه اول (مرحله پیشگیری)، موش‌های صحرایی به پنج گروه تقسیم شدند: گروه کنترل غذای نرمال دریافت کردند، گروه MCD با غذای فاقد کولین و متیونین (MCD diet) تغذیه شدند، گروه MCD+E غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره اتیل استاتی گیاه توکریوم پولیوم، گروه MCD+C غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره تام گیاه توکریوم پولیوم و گروه MCD+S غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره گیاه سیلیبوم ماریانوم را دریافت کردند. پس از هشت هفته، موش‌های صحرایی کشته شده و نمونه‌های کبد آن‌ها جهت مطالعات هیستوپاتولوژی و ایمونوبلاتینگ پروتئین برداشته شد. در مطالعه بعدی (مرحله درمان)، موش‌های صحرایی مبتلا به NASH پس از سه هفته تیمار با عصاره‌های توکریوم پولیوم و سیلیبوم ماریانوم کشته شدند. یافته‌های هیستولوژی نشان داد که غذای فاقد متیونین و کولین علایم بالینی NASH را با درجه یک ایجاد کرد. مطالعات ایمونوبلاتینگ نیز حاکی از افزایش فعالیت کاسپاز3 و JNK همراه با افت شدید در بیان پروتئین‌های p15، p16، p53 و p21 و فعالیت AKT درمیان موش‌های گروه MCD بود. تیمار دهانی عصاره اتیل استاتی در هر دو مرحله پیشگیری و درمان توانست به طور چشمگیری از بروز علائم هیستولوژی NASH و افزایش فعالیت کاسپاز3 جلوگیر
- Abstract
- Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), the most common chronic liver disorder, is frequently associated with the clinical features of metabolic syndrome such as obesity, insulin resistance, and dyslipidemia. Non-alcoholic steatohepatitis (NASH) represents a subset of NAFLD and is characterized by steatosis, inflammation and ballooning degeneration with or without fibrosis. Under progressive states, NASH might lead to liver cirrhosis and hepatocarcinoma. Although the exact mechanism(s) that mediates transition of steatosis to NASH development remains unknown, oxidative stress and inflammatory responses play key roles in NASH pathogenesis. Regarding the pronounced role of oxidative stress in NASH development, antioxidants with the potential to prevent or attenuate oxidative stress represent promising candidates for treatment of NASH patients. In the present study, we were aimed to evaluate the probable effects of Teucrium polium and Silybum marianum, with potent antioxidant activity, on methionine choline deficiency diet fed rats with particular attention to their effects on signaling pathways including MAPKs, AKT, tumor suppressor genes and caspase3 activation. In the first step (prevention phase), rats were randomized in five groups: control group was fed a normal diet, MCD group received a MCD diet, MCD+E group was fed a MCD diet plus ethyl acetate extract of T.polium orally, MCD+C group was fed a MCD diet plus crude extract of T.polium orally and MCD+S group was fed a MCD diet plus extract of S.marianum orally. After 8 weeks, rats were sacrificed and the livers were taken for histopathological and western blotting examinations. In the next step (treatment phase), the NASH affected rats were treated with T.polium and S.marianum for three weeks. Feeding MCD diet remarkably developed histopathological features of NASH. In addition, significant increase in the level of hepatic caspase3 activation and JNK phosphorylation accompanied with a decrease in the level of
