عنوان پایان‌نامه
بررسی روش های اتمسفر تعدیل یافته کنترل بیولوژیک و اثرات ضد قارچی عصاره گیاهی چریش بر میزان رشد و توکسین زایی قارچ Aspergillus flavus
- رشته تحصیلی
- مهندسی‌کشاورزی-بیماری‌شناسی‌گیاهی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 625;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 54420
- تاریخ دفاع
- ۲۹ شهریور ۱۳۹۱
- دانشجو
- نیما خالدی
- استاد راهنما
- حشمت اله امینیان
- چکیده
- این پژوهش شامل سه بخش: بررسی عوامل بیوکنترل، بررسی عصاره گیاه چریش و شرایط اتمسفر تعدیل یافته می‌باشد. در بخش کنترل بیولوژیک، فعالیت بیولوژیکی چهل و هشت جدایه آنتاگونیست شامل شش جدایه مخمر و چهل و دو جدایه باکتری بر روی رشد و توکسین زایی پنج جدایه قارچ Aspergillus flavus ارزیابی شد. با انجام آزمون چهار نقطه‌ای جدایه P11 باکتری Pseudomonas fluorescens، جدایه B33 باکتری Bacillus subtilis و جدایه M47 مخمر Pichia guilliermondii انتخاب شد و فعالیت آنتاگونیستی آن‌ها علیه قارچ در شرایط آزمایشگاهی و انباری مورد بررسی قرار گرفت. تأثیر جدایه های آنتاگونیست در کنترل رشد میسلیومی جدایه های قارچ A.flavus در آزمون کشت متقابل بین 71/41 تا 41/74 درصد، در آزمون متابولیت های فرار بین 60/46 تا 31/73 درصد، در آزمون ترکیبات غیرفرار بین 84/71 تا 11/88 درصد و در آزمون تلفیق آزمون‌های ترکیبات فرار و غیرفرار ین 75/76 تا 58/89 درصد متغیر بود. جهت بررسی تأثیر عصاره گیاه چریش از روش اختلاط عصاره با محیط کشتPDA ، عصاره آبی برگ و بذر فاقد هر گونه اثر بازدارندگی بر روی رشد جدایه های قارچ A.flavus اند و عصاره‌های متانولی و اتانولی برگ در غلظتppm 2000 به ترتیب %95/77 و %88/63 و عصاره‌های متانولی و اتانولی بذر در غلظتppm 2000 به ترتیب با %22/69 و %75/45 دارای بیشترین اثر بازدارندگی (قارچ ایستایی) بر رشد قارچ A.flavus هستند. همچنین در بررسی روش اتمسفر تعدیل یافته مشاهده شد که غلظت اشباع گاز CO2بیشترین اثر بازداندگی از رشد قارچ دارد و از طرفی غلظت اشباع گاز O2 موجب تسریع رشد قارچ می‌شود. برای تعیین تولید آفلاتوکسین توسط جدایه های F4 A.flavus و F5 A.flavus از روش TLC استفاده شد. با مقایسه Rf تیمارهای عصاره متانولی برگ، گاز CO2، مخمر P.guilliermondii M47، باکتری P.fluorescens P11 وB33 B.subtilis با Rfاستاندارد آفلاتوکسین B1 مشاهده شد در هیچکدام از تیمارهای آفلاتوکسین تولید نشده است.
- Abstract
- This study consists of three parts: Evaluation of biological control agents, evaluation of Neem (Azadirachta indica) extracts and modified atmosphere conditions. In section biological control, the biological activity forty-eight isolates of antagonists including: six yeast isolates and forty-two bacterial isolates on growth and aflatoxin production five isolates Aspergillus flavus were evaluated. The antagonist is entitled to score four points, isolate P11 of Pseudomonas fluorescens, isolate B33 of Bacillus subtilis and , isolate M47 of Pichia guilliermondii were selected and antagonistic activity them against fungi in vitro and storage were studied. Effect of antagonists in control of mycelia growth of isolates A.flavus in dual culture was 41.71 to 74.41 percent, in volatile metabolites test was 46.60 to 73.31 percent, in non-volatile metabolites test was 71.84 to 88.11 percent and in combining tests non-volatile and volatile compounds were 76.75 to 89.58 percent. For evaluate the effect of Neem extract in method extracts mixed with PDA medium, the aqueous leaves and seeds extract did not have any inhibitory effect on growth fungi isolates A.flavus and methanol and ethanol extracts of leaves in concentration 2000ppm 77.95% and 63.88% respectively and methanol and ethanol extracts of seeds in concentration 2000ppm 69.22% and 45.75% respectively maximum inhibitory effect (fungistatic) on growth A.flavus. Also in method modified atmosphere was observed which concentration saturation CO2 maximum effect of inhibitory of fungal growth and on the other hand concentration saturation O2 accelerated fungal growth. TLC methods for the determination of aflatoxin production by isolate F4 of A.flavus and by isolate F5 of A.flavus were used. By comparing Rf treatments of methanol extract of leaves, CO2 gas, isolate M47 of Pichia guilliermondii yeast, isolate P11 of Pseudomonas fluorescens, isolate B33 of Bacillus subtilis with standard Rf aflatoxin B1 were observed no aflatoxin B1 any of treatments were produced.
