عنوان پایان‌نامه
« ردیابی آر ان ایهای دو رشتهای در جدایههای Sclerotinia sclerotiorum بدست آمده از میزبانهای مختلف در شمال کشور »
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی - بیماری شناسی گیاهی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 5170;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56704
- تاریخ دفاع
- ۲۸ شهریور ۱۳۹۱
- استاد راهنما
- غلامحسین مصاحبی محمدی
- دانشجو
- مرضیه قباخلو
- چکیده
- گونه قارچیSclerotinia sclerotiorum (Lib.) deBary یکی از مخرب¬ترین بیمارگرهای گیاهی با پراکنش جهانی می¬باشد. یکی از روش-های کارا در کنترل بیولوژیک این قارچ، استفاده از پدیده کم¬آزاری است که ناشی از حضور ویروس¬های قارچی می¬باشد. بنابراین با توجه به گسترش و خسارت شدید پوسیدگی اسکلروتینیایی در مزارع ایران و همچنین پتانسیل بالقوه مایکوویروس¬ها در کنترل بیماری به نظر می¬رسد که استفاده از مایکوویروس¬ها راهکاری امید بخش برای کنترل این بیماری هستند. مایکوویروس¬ها به دسته¬ای از عوامل ویروسی گفته می¬شود که در قارچ¬ها حضور پیدا کرده و موجب آلودگی-های پایدار در آن‌ها می¬شوند. مایکوویروس¬ها می¬توانند دامنه وسیعی از تغییرات فنوتیپی را به میزبان خود ایجاد کنند. کاهش بیماری¬زای از جمله اثرات حضور مایکوویرو¬س¬ها در قارچ است که اصطلاح کم آزاری برای آن بکار برده می-شود. برای جداسازی dsRNAاز میسلیوم¬های لیوفلیز شده، ستون کروماتوگرافی با سلولزCF-11 و ترکیب فنل/ کلروفورم/ ایزوآمیل الکل استفاده شد و قطعات جداسازی شده از طریق الکتروفورز افقی در ژل آگارز 8/0% مشاهده شدند و مراحل تعیین توالی انجام شد. گروه¬های سازگاری رویشی شناسایی شدند، سپس انتقال افقی از طریق هم¬دهانی بررسی شد که در پنج جدایه انتقال با موفقیت صورت گرفت. به منظور حذف مایکوویروس از جدایه¬های قارچی، از ماده سیکلوهگزیمید در سه غلظت مختلف استفاده شد و در یک جدایه حذف با موفقیت انجام شد. پتانسیل انتقال عمودی مایکوویروس¬ها در سه جدایه قارچی مورد بررسی قرار گرفت و مشخص شد که قابل انتقال از طریق آسکوسپور می¬باشند. تاثیر مایکوویروس بر خصوصیات ظاهری و بیماری¬زایی قارچ بررسی شد. مایکوویروس-هایی با وزن تقریبی 5/2 و 3 کیلو¬جفت¬باز شناسایی شدند که موجب کم¬آزاری می¬شوند. دو قطعه مزبور dsRNA دارای نرخ انتقال عمودی 55% بودند. بنابراین امید است در کنترل بیولوژیک بیماری پوسیدگی اسکلروتینایی کاربرد موفقیت آمیز داشته باشند.
- Abstract
- SpeciesSclerotinia sclerotiorum (Lib.) deBary is one of the most destructive plant pathogens with global distribution. Application of hypovirulant strains is aneffective method in biological control of this fungus which is caused by presence of fungal viruses.because of highly distribution and destruction of sclerotinia rot in Iran, Application of biological agents for controlling the pathogen could be effective and hopeful program for managing the disease in filed. Mycoviruses as known as viral agents which is existed in fungi and cause persistent infection in them. They are capable of causing a wide range of phenotypic changes in their hosts. Reducing the ability of pathogenicity is one of effects of mycoviruses that term of hypovirulant is used for this. Isolation of dsRNA from lyophilized mycelia is done based on chromatography column of CF-11 cellulose and combination of Phenol/ Chloroform/Isoamyl alcohol and separated fragments were observed using agarose gel electrophoresis 0.8%, sequencing was performed. Vegetative compatibility groups (VCGs) were determined, then horizontal transmission of mycoviruses via anastomosis between ISOLATES was dispalayed transmission in five isolates were successfully done. Mycovirus elimination via three different concentrations of cyclohexamide was done and for one isolate was successful. The potential of vertical transmission of mycoviruses were examined and mycoviruses was distinguished to be transmitted through the ascospore. The presence effect of mycoviruses on morphological characters and pathogenicity of fungus were determineted. Finaly, two mycoviruses which have approximately weight of 2.5 and 3 kilo base pairs weight were identified for causing hypovirulance. Scince this two rDNA fragment had 55% rate of vertical transmition would be the potentialbiological control agent for control of sclerotinia rot via application of mycoviruses.
