عنوان پایان‌نامه
انتخاب مولدین ماده ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) براساس شاخص پاسخ به استرس و ارتباط شاخص رشد با مارکر ریز ماهواره
- رشته تحصیلی
- مهندسی منابع طبیعی - تکثیر و پرورش آبزیان
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6929;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75094;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6929;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75094
- تاریخ دفاع
- ۱۲ مرداد ۱۳۹۵
- دانشجو
- احمد قبادخانی
- استاد راهنما
- محمدعلی نعمت الهی
- چکیده
- مطالعه حاضر با هدف انتخاب مولدین ماهی قزل¬آلای رنگین¬کمان (Oncorhynchus mykiss) براساس شدت پاسخ به استرس و با استفاده از مارکرهای مولکولی ریزماهواره مرتبط با سطوح کورتیزول انجام گرفت. به این منظور، از یک جکعیت بزرگ مولدین مزرعه نگین هراز، تعداد 64 ماهی ماده براساس شکل ظاهری و اندازه مناسب، و سلامت انتخاب شده و به صورت جداگانه نگهداری شدند. از عامل استرس¬زای تراکم برای القای استرس در ماهیان استفاده شد؛ پس از 30 دقیقه اعمال استرس، نمونه¬گیری از خون به منظور سنجش هورمون کورتیزول و از باله دمی به منظور بررسی¬های ژنتیکی انجام گرفت. مقادیر کورتیزول از ng/ml 1/0 تا ng/ml 4/51 در بین ماهیان مختلف، متفاوت بود که بر این اساس به سه گروه الف) افراد کم-واکنش (دامنه¬ای از صفر تا ng/ml 1)، ب) افراد متوسط-واکنش (دامنه¬ای از 01/1 تا ng/ml 10)، و ج) افراد زیاد-واکنش (از ng/ml 01/10 به بالا) تقسیم¬بندی شدند. سپس، از 6 مارکر ریزماهواره که 3 عدد از آنها مختص واکنش به استرس بودند برای بررسی فراوانی آللی و ارتباط جایگاه¬های مرتبط با غلظت کورتیزول استفاده گردید. تمامی جایگاه¬های ریزماهواره شامل OMM1189، OMM3089، OMM3026، OMM1130، OMM5153 و BX913059 دارای چند شکلی و پراکنش آللی متمایزی بودند؛ در مجموع این جایگاه¬ها به ترتیب دارای تعداد 11، 16، 11، 26، 12 و 12 آلل بودند. در این رابطه، هتروزیگوسیتی مشاهده شده (Ho) از 3/0 در جایگاه OMM3026 تا حداکثر 00/1 در جایگاه OMM1189 متفاوت بود. هتروزیگوسیتی مورد انتظار (He) هم مقادیر مختلفی از 759/0 تا 944/0 را نشان داد. نتایج کاملاً مشابهی در رابطه با شاخص هتروزیگوسیتی مورد انتظار بی¬غرض (uHe) مشاهده شد که کمترین مقدار در جایگاه OMM3026 (778/0) و بیشترین مقدار در جایگاه OMM1130 (968/0) مشاهده شد. نتایج مربوط به شاخص تثبیت نیز به همین شکل در مارکرهایی که مقدار هتروزیگوسیتی پایین بود حالت مثبت داشته و با افزایش هتروزیگوسیتی، این شاخص کاهش یافته بود. همچنین، مارکرهای OMM1130 و BX913059 از تعادل هاردی-واینبرگ انحراف داشتند. بهرحال، تنها دو آلل 264 و 278 از جایگاه OMM5153 ارتباط معنادار آماری مثبتی با غلظت کورتیزول نمونه¬ها داشتند. نتایج حاصل از مطالعه حاضر نشان داد ماهیان ماده مولد را می¬توان بر مبنای شدت پاسخ استرسی دسته¬بندی نمود، و بنابراین، امکان به¬
- Abstract
- Abstract The present study aimed to investigate selection of adults of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) based on intensity response to stress with the use of cortisolrelated microsatellite molecular markers. To do this, 64 healthy, well-grown and in good morphological condition adult females were selected from a big population in Negin Haraz farm, and maintained separately in a raceway. We used confinement stress to administer stress in fish; after 30 min stress induction, blood and a piece of caudal fin from each fish was sampled for cortisol assay and genetic assessments, respectively. The concentration of cortisol ranged of 0.1 ng/ml to 51.4 ng/ml among the females; which categorized in three groups of low-response (0 to 1 ng/ml), middle-response (1.01 to 10 ng/ml) and highresponse (higher than 10.01 ng/ml). Then, 6 microsatellite markers (three of them were proprietary for stress) were used to assess allele frequency and the relationship between markers with cortisol concentration. All of the markers including OMM1189, OMM3089, OMM3026, OMM1130, OMM5153 and BX913059 had different polymorphism and allele distribution; totally, they had 11, 16, 11, 26, 12, and 12 alleles, respectively. The observed heterozygosity (Ho) was different from 0.3 in OMM3026 to a maximum of 1.0 in OMM1189. The expected heterozygosity (He), also, showed different values from 0.759 to 0.944. Completely same results were observed for unbiased expected heterozygosity (uHe) which the lowest and highest uHe was measured in OMM3026 (0.778) and OMM1130 (0.968), respectively. Fixation index (F) was positive in markers with lower heterozygosity, and decreased with increase heterozygosity. Also, OMM1130 and BX913059 were deviated from Hardy-Weinberg equilibrium. Only two alleles 264 and 278 of OMM5153 were significantly had positive correlation with cortisol concentration. The results showed that rainbow trout females can be categorized based on their intensity response to stress; thus it is possible to select breeders for this trait. However, considering the insignificant correlations between molecular markers and stress responses, it is suggested that in addition to increasing the number of samples, genetic map of Iranian rainbow trout must be produced and suitable markers should select accordingly. Keywords: stress, cortisol concentration, microsatellite marker, heterozygosity, rainbow trout
