عنوان پایان‌نامه
طراحی و تهیه لیپوزوم پوشش دار شده با کیتوزان و مطالعه رهایش کنترل شده داروی ان استیل سیستئین
- رشته تحصیلی
- نانوبیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده علوم و فنون نوین شماره ثبت: 532;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78090;کتابخانه دانشکده علوم و فنون نوین شماره ثبت: 532;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78090
- تاریخ دفاع
- ۲۷ شهریور ۱۳۹۵
- دانشجو
- حامد حامدی نسب
- استاد راهنما
- علی حسین رضایان قیه باشی
- چکیده
- N - استیل سیستئین (NAC) مشتق L - سیستئین می باشد، که با شکستن پیوندهای دی سولفیدی سبب کاهش ویسکوزیته و الاستیسیته موکوس می شود. به دلیل وزن مولکولی بالا و نیمه عمر پایین NAC، قادر به عبور از غشاء سلولی نمی باشد. بنابراین جهت تقویت اثرات NAC ( افزایش نیمه عمر و اثر درمانی) و همچنین افزایش جذب آن، محصور سازی NAC درون سیستم های دارو رسانی از جمله لیپوزوم ضروری است. لیپوزوم پوشش دار شده با کیتوزان نسبت به لیپوزوم بدون پوشش خاصیت مخاط چسبی بیشتری دارد. هدف از این مطالعه تهیه لیپوزوم پوشش دار شده با کیتوزان برای رسانش ریوی NAC بود. ابتدا لیپوزوم های خالی با ترکیب لیپیدی شامل دی پالمیتوئیل فسفاتیدیل کولین، دی پالمیتوئیل فسفاتیدیل گلیسرول و کلسترول تهیه شد. سپس با اضافه کردن قطره قطره کیتوزان به سوسپانسیون لیپوزومی، لیپپوزوم های با پوشش کیتوزان تهیه شد. با تغییر درصد دی پالمیتوئیل فسفاتیدیل گلیسرول (0 تا 10)، افزایش غلظت کیتوزان و نسبت حجمی کیتوزان به لیپوزوم (1 تا4) بهترین شرایط برای پوشش دار کردن لیپوزوم با کیتوزان مورد بررسی قرار گرفت. از تکنیک های FTIR، TEM، SEM، HPLC و DLS برای بررسی خواص فیزیکوشیمیایی لیپوزوم های پوشش دارشده با کیتوزان استفاده شد. بازده پوشش دار شدن بوسیله سنجش فسفات اندازه گیری شد. تست سمیت برروی سلولهای اپی تلیال A549 صورت گرفت. افزایش نسبت حجمی کیتوزان به لیپید و غلظت کیتوزان منجر به افزایش بیشتر در اندازه و پتانسیل زتای لیپوزوم های دارای درصد بالاتر DPPG شد. تصاویر TEM و SEM حاکی از شکل کروی لیپوزوم ، لیپوزوم پوشش دار شده با کیتوزان و اندازه بزرگتر لیپوزوم پوشش دارشده با کیتوزان بود. آنالیزهای FTIR نیز اتصال موفقیت آمیز کیتوزان به لیپوزوم را ثابت کرد. اندازه گیری درصد محصورسازی و رهایش دارو با HPLC نشان داد که افزایش غلظت و اندازه لیپوزوم منجر به افزایش درصد محصورسازی و کیتوزان سبب افزایش پایداری لیپوزوم در طی رهایش دارو می شود. می توان با ترکیب مناسب ویژگی های لیپوزوم و کیتوزان، لیپوزوم هایی بارهایش کنترل شده، طولانی و ویژه تهیه کرد.
- Abstract
- N-acetylcysteine (NAC) is L-cysteine derivative that has been known for its ability to break disulfide bonds for decrease the mucous viscosity as well as elasticity . However, the half-life of NAC is short, and because of its high molecular weight is not able to cross cell membrane barriers. Therefore, there is a necessity for encapsulation of NAC into a delivery system such as liposome to prolong its effects, enhance its efficacy and improve the uptake of NAC. In addition, mucoadhesive properties of chitosan coated liposomes were substantially better than non-coated ones. The purpose of the present study was to formulate effective chitosan(CHT) coated liposomes to pulmonary delivery of N-acetylcysteine .Initially, empety liposomes were prepared with DPPC, DPPG and cholesterol, followed by coating with chitosan by dropwise addition of chitosan solution in liposome dispersion. The best condition for chitosan coating was investigated by changes in chitosan concentration, percentage of DPPG in liposomal formulation (from 0 to 10) and chitosan to liposome volume ratio (from 1 to 4). The present work reports some of the physicochemical properties of chitosan-coated liposomes by DLS, TEM ,FTIR, SEM and HPLC methods.the chitosan coating efficiency was calculated by phosphate assay method. The toxicity of was investigated on A549 epithelial cells. The particle size and zeta potential of liposome containing a higher DPPG percentage after coating, was increased more than lower DPPG. Images of TEM and SEM indicated that morphology of coated and uncoated liposome was spherical. The size of coated liposomes was larger than that of uncoated liposome, which indicated the successful attachment CH on liposome surface. FTIR analysis proved the chitosan successfully connected to liposomes. The encapsulation efficiency and the drug release was measured by HPLC. By increasing the size and concentration of liposomes, the encapsulation efficiency was increased. It was found that chitosan increases liposome stability during drug release. The appropriate combination of liposomal and chitosan characteristics may produce liposomes with specific, prolonged and controlled release.
