عنوان پایان‌نامه
بررسی میزان mrna و یا بیان ژنهای tnf-aوtgf-b در موش های nafld قبل و بعد از تیمار با عصاره های t.poliumوs.marinumب
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 43081;کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 10612ب
- تاریخ دفاع
- ۳۰ شهریور ۱۳۸۸
- دانشجو
- رحیم امینی راستابی
- استاد راهنما
- بی بی راضیه یزدان پرست
- چکیده
- بیماری کبد چرب غیر الکلی (NAFLD) یک نارسایی متابولیکی کبدی است که ممکن است به فیبروز و یا سیروز ختم گردد. استئوهپاتیت غیر الکلی (NASH) یک مرحله از NAFLD محسوب می‌گردد که بوسیله حضور استئوسیز، التهاب، بالونینگ و فیبروز در کبد تشخیص داده می‌شود. اگرچه مکانیسم‌های دقیقی که انتقال استئوسیز را به استئوهپاتیت واسطه می‌شوند ناشناخته باقی مانده است، اعتقاد بر این است که دو سیتوکین TNF-? و TGF-? نقش‌های کلیدی در بیماری‌زایی NASH بازی می‌کنند. با توجه به این موضوع، هدف این مطالعه بررسی اثرات عصاره‌های توکریوم پولیوم و سیلیبیوم ماریانوم، گیاهان دارویی با خصوصیات درمانی متعدد، بر روی بیان TNF-? و TGF-? کبدی در یک مدل آزمایشگاهی NASH بود. در مطالعه اول (مرحله پیشگیری)، موش‌های صحرایی به پنج گروه تقسیم شدند: گروه کنترل غذای نرمال دریافت کردند، گروه MCD با غذای فاقد کولین و متیونین (MCD diet) تغذیه شدند، گروه MCD+E غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره اتیل استاتی گیاه توکریوم پولیوم دریافت کردند، گروه MCD+C با غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره تام گیاه توکریوم پولیوم تغذیه شدند و گروه MCD+S غذای MCD همراه با تیمار دهانی عصاره گیاه سیلیبیوم ماریانوم دریافت کردند. پس از هشت هفته، موش‌های صحرایی کشته شده و نمونه‌های کبد آن‌ها جهت مطالعات هیستوپاتولوژی و ملکولی (وسترن بلاتینگ و (Real-time PCR برداشته شد. در مطالعه بعدی (مرحله درمان)، موش‌های صحرایی مبتلا به NASH پس از سه هفته تیمار با عصاره‌های توکریوم پولیوم و سیلیبیوم ماریانوم کشته شدند. بررسی‌ها نشان داد که غذای فافد کولین و متیونین منجر به گرید یک استئوسیز، بالونینگ و التهاب در کبد موش‌های صحرایی شده و سطح mRNA و پروتئینی TNF-? و TGF-? را نیز افزایش داده است. تزریق عصاره اتیل استاتی توکریوم پولیوم، هم در مرحله پیشگیری و هم در مرحله درمان به طور قابل توجهی فاکتورهای هیستوپاتولوژیکی و بیان این دو سیتوکین را کاهش داد. عصاره تام توکریوم پولیوم اگرچه از افزایش سطح TNF-? و TGF-? جلوگیری نمود، در فاز درمان بر روی بیان سیتوکین‌ها تاثیری اعمال نکرد. تزریق عصاره سیلیبیوم ماریانوم نتوانست از وقوع NASH در میان حیوانات آزمایشگاهی جلوگیری نماید. بهرحال، تیمار با عصاره سیلیبیوم ماریانوم به طور قابل توجهی سطح TNF-? و TGF-? را در فاز درمان کاهش داد.
- Abstract
- ABSTRACT Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a metabolic disorder of the liver that may progress to fibrosis or cirrhosis. Nonalcoholic steatohepatitis (NASH) is a stage of NAFLD which is characterized by steatosis, inflammation, ballooning and fibrosis in the liver. Although the exact mechanisms that mediate transition from steatosis to steatohepatitis remain unknown, cytokines such as TNF-? and TGF-? are believed to play key roles in NASH pathogenesis. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of Teucrium polium and Silybum marianum, medicinal plants with multiple therapeutic properties, on hepatic TNF-? and TGF-? levels in an experimental NASH model. In the first study (prevention phase), rats were randomized in five groups: control group was fed a normal diet, MCD group received a MCD diet, MCD+E group was fed a MCD diet plus ethyl acetate extract of T.polium orally, MCD+C group was fed a MCD diet plus crude extract of T.polium orally and MCD+S group was fed a MCD diet plus extract of S.marianum orally. After 8 weeks, rats were sacrificed and the livers were taken for histopathological and molecular (western blotting and Real-time PCR) examinations. In the next study (treatment phase), the rats with NASH were treated with T.polium and S.marianum for three weeks. The MCD diet led to grade 1 liver steatosis, inflammation and ballooning. In addition, significant increase in hepatic mRNA and protein levels of TNF-? and TGF-? were documented. Administration of T.polium ethyl acetate extract significantly decreased histopathological factors and the hepatic TNF-? and TGF-? expression both in the prevention and in the treatment phase. Although T.polium crude extract significantly prevented the rise of TNF-? and TGF-? level, it did not affect cytokines expressions among the treatment group. Administration of S.marianum extract didn’t prevent the development of NASH among the experimental animals. However, treatment with this extract significantly decreased hepatic TNF-? and TGF-? levels among the treated group.
