عنوان پایان‌نامه
اثر افزودن سوپر اکسید دسموتاز و ملاتونین به محیط انتقال تخمدان بر آپپتوزیس کمپلکس اووسیت - کومولوس در دماها و زمانهای متفاوت نگهداری
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7058;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76809;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7058;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76809
- تاریخ دفاع
- ۲۴ شهریور ۱۳۹۵
- دانشجو
- عباس گودرزی قزقپان
- استاد راهنما
- احمد زارع شحنه
- چکیده
- بررسی‌های انجام شده در چند دهه گذشته نشان داده است وقایعی که پس از جداسازی تخمدان از بدن دام رخ می‌دهد بر کیفیت اووسیت‌ها و فولیکول‌ها بسیار تأثیر گذار است. به‌منظور تعیین شرایط بهینه نگهداری طولانی مدت تخمدان گوسفند، آزمایشی با افزودن ملاتونین (800 میکرومولار) و سوپراکسید دسموتاز (50 واحد بین‌المللی در میلی‌لیتر) به‌عنوان آنتی‌اکسیدان به محیط انتقال تخمدان گوسفند (PBS) در دمای 4 و 20 درجه سانتی‌گراد طی زمانهای 3، 12، 24 و 48 ساعت انجام شد. برای ارزیابی اثرات آنتی‌اکسیدان‌ها فراسنجه‌های تولید برون‌تنی رویان (IVEP) نظیر نرخ بلوغ، نرخ لقاح، نرخ تسهیم در رویان‌ها، نرخ بلاستوسیت و کل بلاستومرها در بلاستوسیست، اندازه‌گیری شد. نتایج نشان داد که بکارگیری ملاتونین و سوپراکسید به‌صورت معنی‌داری موجب کند شدن افت نرخ لقاح به‌عنوان شاخصی از موفقیت بلوغ برون‌تنی شده است. همچنین، مدت زمان نگهداری نیز به‌صورت معنی‌داری بر فراسنجه‌های IVEP تاثیرگذار بود (0/05 ?P)، بطوری‌که با افزایش زمان نرخ بلوغ، نرخ لقاح، نرخ تسهیم و نرخ بلاستوسیست کاهش یافت. شمارش کل بلاستومرها در بلاستوسیست نشان داد که بکارگیری آنتی‌اکسیدان‌ها موجب افزایش تعداد بلاستومرها به‌عنوان شاخصی از کیفیت رویان‌ها شده است (0/05 ?P). واکاوی داده‌ها نشان داد که برای نگهداری طولانی مدت تخمدان دمای 4 درجه سانتی‌گراد نسبت به 20 درجهسانتیگراد در زمانهای بیش از 3 ساعت بازدهی بهتری دارد (0/05 ?P). در بخش دوم پس از انجام بافت‌شناسی تخمدان، مرفولوژی فولیکولهای پری‌آنترال مطالعه شد. شمارش فولیکولهای پری‌آنترال نشان داد، بکارگیری آنتی‌اکسیدان در محیط انتقال تخمدان به‌صورت بهینه‌ای نسبت به تیمار کنترل سرعت تخریب فولیکولهای پری آنترال را کاهش داده است (0/05 ?P). به‌صورت کلی نتایج این پژوهش نشان داد که بکارگیری SOD و ملاتونین در انتقال تخمدان گوسفند، آسیب‌های برآمده از نگهداری طولانی مدت تخمدان را کاهش می‌دهد. بنابراین، زمانیکه نیاز به نگهداری طولانی مدت تخمدان وجود دارد، می‌توان این آنتی‌اکسیدان‌ها را در محیط انتقال تخمدان بکارگرفت.
- Abstract
- Investigations in the past decades has shown that oocyte quality and follicles morphology are very impressionable after the isolation of the ovaries from animal. in order to determine the optimal conditions for long-term preservation of the ovaries in sheep, an experiment was conducted with adding melatonin (800 µM) superoxide dismutase (50 IU/ml) as antioxidants in ovary transport medium (PBS) at 4 and 20°C in periods of 3, 12, 24 and 48 hours. To evaluate the antioxidant effects on in vitro embryo production (IVEP) parameters such as maturation rate, fertilization rate, cleavage rate, blastocyst rate and number of blastomeric cells after ovarian storage in experiment condition were assessed. Results showed that use of melatonin and SOD reduced decline in fertilization rate as indicator of success IVM (P ? 0/05). Furthermore, ovarian storage time has significant effect (P ? 0/05) on IVEP parameter. Therefore, maturation rate, fertilization rate, cleavage rate and blastocyst rate decreased with increasing of storage time. As well as, use of antioxidant increase the number of blastomeric cells as an indicator of embryo quality. Analysis of the data revealed that 4°C has better performance than 20°C in aspect of IVF parameters to long-term preservation of the ovaries. In the second part, after ovarian histology; morphology of preantral follicles were evaluated, counting of preantral follicle showed, use of antioxidant in ovary transport medium leading to more healthy follicle and reduced the rate of follicle degeneration (P ? 0/05). Generally, data shown, use of antioxidant in storage medium has beneficial effect in compared whit control (P ? 0/05). Key words: in vitro embryo production, melatonin, ovary, preantral follicle, superoxide dismutase.
