عنوان پایان‌نامه
بررسی آلودگی ذرت به deoxynivalenol و فوزاریومهای مولد آن در منطقه مغان
- رشته تحصیلی
- مهندسی‌کشاورزی-بیماری‌شناسی‌گیاهی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 48605;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 513;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 469
- تاریخ دفاع
- ۱۴ مرداد ۱۳۸۸
- دانشجو
- زهرا علی اکبری
- استاد راهنما
- حشمت اله امینیان
- چکیده
- پوسیدگی خوشه ذرت که توسط گونه های فوزاریوم ایجاد می شود مشکلی فراگیر است که درپی آن، دانه ها می توانند به مایکو توکسین های خطرناکی همچون تریکوتسین ها آلوده شوند. مایکوتوکسین ها متابولیت های ثانویه قارچ ها هستند که توسط برخی از قارچ ها روی محصولات کشاورزی در مزارع و یا انبار رشد می کنند تولید می شوند. میزان آلودگی یک محصول به یک مایکوتوکسین به موقعیت جغرافیایی ، نوع فعالیت های کشاورزی و میزان حساسیت گیاه نسبت به تهاجم قارچی در کلیه مراحل رشد ، انبار داری و یا فرآوری وابسته است. باتوجه به سطح زیر کشت ذرت در مغان که حدوداً 10000 هکتار برآوردشده بود، به ازای هر 500 هکتار یک نمونه 5-10 کیلوگرمی به طور تصادفی به گونه ای جمع آوری شد که 500 هکتار را پوشش دهد و همچنین تفاوت های اقلیمی وآب وهوایی نواحی مختلف را در بر گیرد. تمامی نمونه ها از بلال ذرت در مرحله برداشت از مزرعه و قبل از مرحله سیلو جمع آوری شد. پس از جدا شدن دانه ها از چوب بلال ابتدا هر نمونه به دو قسمت تقسیم گردید یک قسمت برای مطالعات توکسیکولوژی وقسمت دوم برای مطالعات قارچ شناسی استفاده شد. برای جداسازی فوزاریوم های خوشه از محیط کشت های Nash-Snyder Agar ، PDA وCzapeck استفاده شد. سپس جدایه های حاصل با بهره گیری از محیط کشت PDA وبا استفاده از محیط CLA وکلیدهای معتبر، شناسایی گونه های فوزاریوم(مشخصات مورفولوژیک وفیزیولوژیکی) تعیین گردید. باتوجه به نتایج حاصل از این تحقیق فراوانترین گونه های فوزاریوم جداشده از نمونه های آلوده عبارت بودنداز: Fusarium verticillioides (34/42%) ، Fusarium proliferatum (87/33%)، moniliforme Fusarium (33/15%)، Fusarium nygamai (86/4%)، Fusarium oxysporum(06/3%). سنجش میزان د اکسی نیوالنول در40 نمونه ذرت استان اردبیل (مغان)که در مرحله برداشت جمع آوری شده بودند به روشIAC +HPLC (کروماتوگرافی مایع با کارایی بالاو ستون های ایمونو افینیتی) انجام شد. آلودگی به دی اکسی نیوالنول در 45% از کل نمونه ها مشاهده گردید. گستره آلودگی به د اکسی نیوالنول در نمونه های آلوده برابر با ng/g 4/59-55/542 و میانگین کل آلودگی ng/g 30/95 بود که این مقدار از حد مجاز تعیین شده برای ذرت در جهان (1 ppm)کمتر می باشد. برای بررسی امکان توکسین زایی جدایه های مشکوک به گونه های مولد داکسی نیوالنول تعداد ده جدایه(از هر گونه دو جدایه) به عنوان نماینده از جدایه های گونه های فوزاریوم که از دانه ذرت مغان جدا شده بود انتخاب شد وهر یک روی پودر برنج عاری از آلودگی کشت گردید و میزان د اکسی نیوالنول تولید شده توسط هر جدایه، (یک هفته در دمای 27-25 درجه سانتی گراد نگهداری شدند وسپس به منظور ایجاد شوک سرمایی فلاسک ها به مدت دو هفته در دمای 12 درجه سانتی گراد قرار داده شدند) با استخراج آن از بستر هر جدایه برآورد گردید. نتایج نشان داد که جدایه های Fusarium moniliforme,، F.nygamai ، .oxysporum F و F.verticillioides تولید داکسی نیوالنول ننمودند و تنها یک جدایه Fusarium proliferatum تولید داکسی نیوالنول نمود. برای اطمینان از تولید داکسی نیوالنول توسط جدایه Fusarium proliferatum جدایه آن به طریق مصنوعی به بلال مایه زنی کرده و پس از ده روز میزان DON در دانه های آن اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که جدایه اخیر در دانه های ذرت نیز تولید DON نمود.
- Abstract
- Decay of the corn ear by Fusarium species will create a overall comprehensive problem, the seeds can produce dangerous toxin such as Trichothecenes. Mycotoxins are the secondary metabolites of fungus on some agricultural products in the farms and of factories. Amount of pollution mycotoxins related to location, agricultural activities and the sensitivity of plants to fungal infection in all stages of growth, storage or processing. Cultivation of maize in Moghan rigion was approximately 10000 hectares, 5-10 kg samples of the ear corn randomly collected per 500 hectares harvesting time. Samples of the maize collected before siloing grains separeted from the wood sample was divided into two parts: one part for Toxicology studies, another part for mycological studies. For isolation of Fusarium species used media of Nash-Snyder Agar, PDA and Czapeck , the CLA used identification them. Results of this investigation showed that: Fusarium verticillioides (42/34%), F. proliferatum (33/873%), F. moniliform (15/33%), F. nygamai (4 / 86%), F. oxysporum (3 / 06%) isolated respectively. Deaoxynivalenol measurement in 40 samples of the corn grain of Ardebil Province (Moghan) in harvest stage by IAC + HPLC (liquid chromatography and high efficiency columns immunoaffinity) methodes. Infection of deaoxynivalenol observed in 45% of the samples in 59/4-542/55 ng / g , the mean total of that was 95/30 ng / g that is less than for corn in the world to determine (1 ppm). Review of the possibility of toxin produce of suspicious isolates of the species fusarium deaoxynivalenol ten isolates (two isolates of each species) as the representative isolates of them. They cultured, rice powder and the amount of pollution of Don was measureda, (one week in temperatures of 27-25 ? C and then kept in order to create a shock of cold two weeks in the temperature 12 ? C,) with extraction of the isolates from each cultured was estimated. The results showed that isolates of Fusarium moniliforme, F.nygamai,F. Oxysporum ,F.verticillioides didn't produce deaoxynivalenol and only Fusarium proliferatum isolates produced it. Deaoxynivalenol production by Fusarium proliferatum inoculated artificial of the maize and after ten days the amount of DON in grains was investigated. The results showed that recent isolates produced DON in maize grain.
