عنوان پایان‌نامه
بررسی آنزیمی تمایز استخوانی سلول های بنیادی بر روی داربست PLLA با پوشش ماتریکس خارج سلولی مشتق از ژله وارتون
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم‌سلولی‌مولکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6455;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78975;کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6455;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78975
- تاریخ دفاع
- ۰۱ دی ۱۳۹۵
- دانشجو
- مرضیه سادات احمدی
- استاد راهنما
- سیدجلال زرگر, احسان سیدجعفری اولیائی نژاد
- چکیده
- امروزه استفاده از داربست های نانوالیافی و نانو ذرات سرامیکی در مهندسی بافت استخوان گسترش فراوانی یافته است. در مطالعه حاضر داربست های نانوالیافی پلی لاکتیک اسید به روش الکتروریسی ساخته شد و به روش پلاسما مورد اصلاح سطحی قرار گرفت، سپس باژله وارتون گرفته شده از بند ناف پوشش داده شد. خصوصیات داربست ها توسط میکروسکوپ الکترونی مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله بعد سلول های بنیادی مزانشیمی بعد از جداسازی از بافت چربی وکشت بر روی داربست ها سرعت رشد و تکثیرشان توسط آزمون MTT بررسی شد. در ادامه پتانسیل تمایزی سلول های بنیادی مزانشیمی به سمت سلول های استخوانی با استفاده از فاکتورهای تمایزی استخوانی به مدت 21 روز توسط بررسی مارکرهای استخوانی متداول مانند آلکالین فسفاتاز قلیایی ، رسوب نمک های کلسیم دار مورد مطالعه قرار گرفت. بررسی های میکروسکوپ الکترونی ، ساختار مناسب نانو الیاف الکتروریسی شده و پوشش دهی عالی ژله وارتون بر سطح الیاف را نشان دادند. نتایج بدست آمده از آزمون MTT ، رشد و تکثیر سلول ها و زیست سازگاری نانوالیاف ها را تایید نمود. نتایج حاصل از بررسی شاخص های استخوانی نیز نشان داد که تمایز برروی نانوالیاف های پلی لاکتیک اسید پوشیده شده با ژله وارتون به طور معنا داری نسبت به کنترل افزایش یافته است. در مجموع این تحقیق نشان داد که داربست های نانوالیافی پلی لاکتیک اسید به همراه ژله وارتون بستری مناسب برای رشد ، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی در شرایط برون تن می باشند.
- Abstract
- Nano-fibrous and ceramic nanoparticles have been increasingly used in tissue engineering. In the present study, electrospun poly-lactic acid nanofibers were exposed to oxygen plasma and coated with wharton's jelly. The physical properties of fabricated scaffolds were assessed using SEM. Mesenchymal stem cells (MSCs) were isolated from adipose tissue and seeded on the scaffolds. The growth and proliferation rate of cultured cells were assessed using MTT assay. Osteogenic differentiation of MSCs using osteogenic medium was assessed by evaluating alkaline phosphatase, deposited calcium salts, and expression of related genes. SEM results verified the formation of bead-free non-woven nanofibers and uniform coating of wharton's jelly. MTT assay demonstrated that the scaffolds were biocompatible and they supported cell growth and proliferation. Cell seeding on PLLA nanofibers and PLLA nanofibers coated with wharton's jelly significantly improved the osteogenic differentiation of MSCs in comparison with standard issue culture plate. Conclusively, we have demonstrated that the fabricated scaffolds were an ideal candidate for growth, proliferation, and osteogenic differentiation of MSCs in vitro.Keywords:tissue engineering,osteogenic differentiation, stem cells, nanofibers, Wharton's jelly
