عنوان پایان‌نامه
بهینه سازی تولید لاین های دابل هاپلوئید در خیار
- رشته تحصیلی
- مهندسی تولیدات گیاهی- اصلاح گیاهان باغبانی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 42068;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 265
- تاریخ دفاع
- ۲۰ تیر ۱۳۸۸
- دانشجو
- شهاب صالحی
- استاد راهنما
- محمود لطفی
- چکیده
- چکیده گیاهان هاپلوئید و دابل هاپلوئید مواد اولیه با ارزشی در مطالعات ژنتیکی، سیتوژنتیکی و همچنین در اهداف اصلاحی (تهیه نقشه ژنومی، تولید لاین خالص و بذر هیبرید) می¬باشند. در این تحقیق از روش القای جنین¬های هاپلویید با استفاده از گرده¬های پرتو دیده برای تولید لاین¬های خالص در خیار استفاده شد. چهار رقم هیبرید ( سوپردامینوس، سوپر مونارچ، نگین و سلطان) و چهارده توده محلی خیار بعنوان ژنوتیپ¬های مادری استفاده شدند. گلهای نر در 14 نوبت جمع¬آوری، با دوز 250 گری پرتوتابی و برای گرده¬افشانی استفاده شدند. میوه¬ها بطور طبیعی تشکیل و اغلب حاوی بذرهای پوک بودند. بذرهای بدست آمده ابتدا به مدت تقریباً 10 روز در محیط مایع کشت می¬شدند تا جنین¬های هاپلوئید موجود رشد بیشتری کنند و در نتیجه به راحتی قابل تشخیص شوند. تعداد جنین¬های استحصالی بسته به ژنوتیپ مواد مادری متفاوت و اغلب در ارقام هیبرید بالاتر بود. در مجموع 145 جنین هاپلوئید بدست آمد که تعداد 92 جنین کروی و قلبی شکل، 39 جنین لپه¬ای و 14 جنین هم بی¬شکل بودند که از این تعداد جنین 17 گیاه حاصل شد. برای دیپلوئید نمودن گیاهان هاپلوئید دو روش درون شیشه¬ای و گلخانه¬ای مورد استفاده قرار گرفت که تیمار درون¬شیشه¬ای سرشاخه¬های 3 سانتی¬متری، در کلشیسین (mg/l500) به مدت 6 ساعت، بهترین نتیجه را در بر داشت. برای تعیین سطح پلوئیدی گیاهان پس از تیمار از تکنیک شمارش گرده¬های بارور استفاده شد. تعداد گرده¬های بارور گیاهان هاپلوئید و دیپلوئید به ترتیب کمتر از 4 و بیشتر از 22 بود و در گیاهان میکساپلوئید بین 4 تا 22 بود. سطح پلوئیدی گیاهانی که با این روش آزمون شده بودند با آنالیز فلوسیتومتری مطابقت داشت.
- Abstract
- Abstract Haploid and doubled haploid plants are valuable materials for genetic and cytogenetic studies as well as plant breeding purposes (production of pure line, hybrid seeds and gene mapping). In this research, we attempted using irradiated pollen technique to produce haploid and doubled haploid cucumber as fast and efficient method. Four hybrid cultivars (dominus, monarch, negeen and sultan) and 14 local open pollinated cultivars are used as maternal genotypes. Male flowers collected for 14 times and exposed to gamma radiation at 250 Gy. Then the following day pollination was performed with those irradiated pollens, these pollens caused fruit set naturally with empty seeds. Only a few numbers of seeds arisen by irradiated pollen include haploid embryos. Seeds of cucumber were floated in liquid medium for about 10 days before excision of the embryos. This innovated method caused haploid embryos develop more, and so be identified easily without needing to inspect the seeds one by one. The number of embryos obtained varied according to genotype of donor plants and was generally higher among F1 hybrids. Several methods used to induce chromosome doubling. The most effective procedure was in vitro treatment of 3 cm shoot tip explants with 500 mg/l colchicine for 6h. Our comparison of in vivo and in vitro colchicine treatments was based on pollen numbers. Untreated haploid and diploid plants had pollen number of <4 and >22, respectively. Too 50 shoot tips of plants that survived after in vivo treatment and ploidy level was determined by flowcytometry used to assess the effect of treatment based on pollen number counting technique. Mixoploids showed a bimodal distribution, with pollen number of either <4 or >22.
