عنوان پایان‌نامه
تولید ریشه های موئینه در گیاه آنقوزه (ferula assa foetida)
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7013;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 77943;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7013;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 77943
- تاریخ دفاع
- ۲۰ شهریور ۱۳۹۵
- دانشجو
- فایزه رجبیان نجف آبادی
- استاد راهنما
- مصباح بابالار
- چکیده
- گیاهان دارویی به دلیل دارا بودن مواد موثره در پیکره خود، در صنعت و داروسازی اهمیت دارند و به دلیل استفاده روز افزون و تقاضای بالای این گیاهان و کشت و کار سخت آنها بهر برداری از طبیعت افزایش یافته که این امر باعث بروز مشکلاتی از قبیل از دست رفتن تنوع ژنتیکی ، تخریب زیستگاه و .. شده است. در این میان از انواع روش های کشت بافت گیاهی به عنوان رهیافت جدید می توان کمک گرفت. کشت ریشه های مویینه یکی از مناسب ترین روش کشت درون شیشه ای بشمار می آید. در این روش با ورود بخش T-DNA از پلاسمید Ri متعلق به باکتری A.rhizogenes به ژنوم گیاهی، باعث ایجاد تظاهر مورفولوژیکی به صورت ریشه های تراریخت شده مویینه در گیاه می گردد. مزیت ریشه های مویینه قابلیت بیوسنتز بالای آن در تولید مواد موثر مورد نظر است، بطوری که میزان تولید مواد موثر در کشت ریشه های مویینه غالبا بیشتر از کشت سوسپانسیون سلولی و حتی ریشه های طبیعی گیاه مادری است. علی رغم اهمیت گیاه آنغوزه در دنیا تاکنون مطالعه مناسبی در زمینه ریشه مویینه آن صورت تگرفته است.مطالعه حاضر با هدف االقای ریشه مویینه در سه ریز نمونه برگ، هیپوکوتیل و ریشه گیاه آنغوزه با استفاده از دو سویه اگروباکتریوم رایزوژنز شامل اِی‌فور و 15834 به صورت آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی انجام گرفت. همچنین جهت نوع و ترکیب مختلف محیط غذایی در تلقیح ریشه‌های مویینه در گیاه انغوزه شش محیط غذایی مختلف برپایه اِم‌اِس در قالب طرح کاملا تصادفی در سه تکرار مورد مطالعه قرار گرفت. علاوه بر این جهت رشد ریشه‌های مویینه جهت بررسی اثر نوع و مقدار نیتروژن ،7 نسبت آمونیوم به نیتروژن کل به کار گرفته شد. نتایج نشان داد که سویه های مختلف اگروباکتریوم رایزوژنز اثر معنی داری بر تعداد و بسامد ریشه های مویینه دارند. همچنین ریزنمونه های مختلف نیز بر بسامد و تولید ریشه مویینه تاثیر داشته است. و بیشترین تعداد ریشه و بسامد ریشه زایی از تلقیح ریزنمونه ریشه با سویه باکتری 15834 حاصل گردید. نتایج نشان داد که القای ریشه مویینه در ریز نمونه ریشه به طور معنی داری تحت تاثیر ترکیب محیط غذایی قرار گرفت و محیط اِم اِس بدون فسفات پتاسیم، نیترات پتاسیم،کلرید کلسیم و نیترات آمونیوم با 30 گرم ساکارز و 100 میکرومولار استوسیرینگون بیشترین تولید ریشه مویینه را داشته است. همچنین رشد ریشه‌های مویینه تحت تاثیر نوع و نسبت آمونیوم به نیتروژن کل قرار گرفت و در نسبت 2 به 3 آمونیوم به نیترات کل (20:30) بیشترین مقدار وزن تر و خشک ریشه های مویینه به دست آمد. کلمات کلیدی: ریشه مویینه، اگروباکتروم رایزوژنز، آنغوزه، آمونیوم به نیتروژن
- Abstract
- Abstract Medicinal plants due to the active ingredients in your body, are important in the pharmaceutical industry. Due to the increasing use and high demand these plants growing and the hard Cultivation of them, they Increased exploitation of nature that it would cause problems such as loss of genetic diversity, habitat destruction In the meantime, a variety of plant tissue culture techniques as a new tool can help. Vitro cultivation of root hairs is considered the most appropriate method. In this way, with the arrival of the T-DNA of bacteria belonging to A.rhizogenes Ri plasmid into the plant genome, cause morphological expression for capillary roots of the plant to be transformed. Root hairs advantage of its biosynthesis in the production of the desired functionality, so that the production of root hairs is often more effective in the cultivation of native plant cell suspension culture and natural roots. Despite the importance of asafoetida plant in the world, so far it has not been a proper study in the field of capillary roots. This study aimed to induce hairy root in leaf explants, hypocotyl and roots of asafoetida using Agrobacterium strains rhizogenes includes A4 and 15834 Four factorial experiment was conducted in a completely randomized design. Also for the inoculated nutrient medium type and different combinations of capillary roots of the plant acetone, six different nutrient medium MS times in a completely randomized design with three replications were studied. In addition, in order to evaluate the effect of capillary roots grow and the amount of nitrogen, 7 of ammonium to total nitrogen was applied.The results showed that different strains of Agrobacterium Rayzvzhnz have a significant effect on the number and frequency of capillary roots. Also different explants also had an impact on the frequency and produce hairy roots. The highest number of roots and rooting frequency, was obtained the root explants inoculated with bacteria strain 15834. The results showed that induction of hairy roots in the root explants was significantly influenced by the composition of the nutrient medium and MS medium without potassium phosphate, potassium nitrate, calcium chloride and ammonium nitrate at 30g of sucrose and 100 µMl acetosyringone had the highest production of capillary roots. The growth of hairy roots were affected by the type and ratio of ammonium to total nitrogen and In 2/3 of ammonium to nitrate, was obtained the highest amount of capillary root dry weight. key words: Hairy roots, Agrobacterium rhizogenes, Asafoetida, Ammonium to nitrogen
