تاثیر ترکیبات سیگنالی بر بیان ژن های کلیدی و میزان تولید متابولیت های ثانویه در شاهدانه
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7014;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76378;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7014;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76378
- تاریخ دفاع
- ۲۴ شهریور ۱۳۹۵
- دانشجو
- سارا جلالی
- استاد راهنما
- سیدعلیرضا سلامی
- چکیده
- شاهدانه (Cannabis sativa L.) به عنوان یک منبع فیبر، روغن، غذا و دارو اهمیت زیادی دارد. تاکنون بیش از 480 ماده مختلف از شاهدانه جداسازی و شناسایی شده است. تتراهیردروکانابینول (THC -9?) و کانابیدیول (CBD) دو ترکیب مهم این گیاه هستند. در این مطالعه تأثیر سالیسیلیک اسید در پنج سطح (شاهد، 0/3، 0/5، 1 و 1/5 میلی مولار) و گابا در چهار سطح (شاهد، 0/1 و 10 میلی مولار) بر بیان نسبی ژن های کلیدی THCAS، CBDAS، OLS و PT در مسیر بیوسنتز کانابینوئیدها از طریق Real-Time PCR و همچنین ارزیابی کمی میزان THC و CBD، با استفاده از روش HPLC، در زمان 72 ساعت پس از تیمار مورد بررسی قرار گرفت. نتایج مربوط به بیان نسبی ژن های هدف THCAS، CBDAS، OLS، PT و آنالیز کمی دو ترکیب THC و CBD در این تحقیق نشان داد که بیان نسبی ژن THCAS در تیمار سالیسیک اسید افزایش و در غلظت 1 میلی مولار به بالاترین سطح رسید، در حالی است که بیان سه ژن CBDAS، OLS و PT در این تیمار کاهش یافت. در تیمار گابا نیز ژن THCAS افزایش بیان داشت و در غلظت 0/1 میلی مولار به بالاترین سطح خود رسید. همچنین بیان سه ژن CBDAS، OLS و PT در تیمار 1 میلی مولار گابا کاهش یافت. در تیمار گابا همبستگی معنیدار و بسیار قوی بین بیان نسبی ژن THCAS و میزان متابولیت THC مشاهده شد. نتایج حاصل از HPLC گیاهان تیمار شده نشان داد که بیشترین میزان متابولیت THC در تیمار سالیسیلیک اسید با غلظت یک میلی مولار و در تیمار گابا با غلظت 0/1 میلی مولار حاصل می شود که با نتایج به دست آمده از بیان نسبی ژن های مورد بررسی در این تحقیق همخوانی داشت.
- Abstract
- Cannabis (Cannabis sativa L.) is important as a source of fiber, oil and food, and for its medicinal properties. So far, more than 420 different material isolation and identification of cannabis Two most important of cannabinoids are ?9-tetrahydrocannabinol (THC) and cannabidiol (CBD). In the current study, the effects of salicylic acid in five levels (control, 3/0, 5/0, 1 and 5.1 mM) and GABA in four levels (control, 1.0, 1 and 10 mM) were investigated on expression changes in key genes THCAS, CBDAS, OLS, PT responsible for principle cannabinoids production through q RT-PCR and also THC and CBD content in related samples were measured using HPLC at 72 hours after treatment. In this study the results of the relative expression in target genes, THCAS, CBDAS, OLS, PT and quantitative analysis of THC and CBD content indicated that, in Salicylic acid treatment THCAS expression increased and reached its highest level in 1 mM concentrations, while in this treatment the expression of three genes CBDAS, OLS and PT decrease. Also in GABA treatment THCAS expression increased and reached its highest level in 0/1 mM concentrations however the expression of three genes CBDAS, OLS and PT reached their lowest level in the 1 mM concentrations. In GABA treatment between relative THCAS expression and the THC content, The correlation is significant and there was a strong relationship between them. The result of HPLC indicate that the highest THC content were in salicylic acid treatment in 1 mM concentration and in GABA treatment at 1.0 mM concentration. These results were consistent with results from gene expression experiments. Key word: Cannabis- gene expression- GABA- THC- CBD