بررسی تولید گیاهان هاپلوئید در گردو به روش بکرزایی
- رشته تحصیلی
- مهندسی تولیدات گیاهی- اصلاح گیاهان باغبانی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 41961;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 263
- تاریخ دفاع
- ۲۰ تیر ۱۳۸۸
- دانشجو
- محمد سادات حسینی گروه
- استاد راهنما
- کورش وحدتی, محمود لطفی
- چکیده
- چکیده در این مطالعه به منظور تولید گیاهان هاپلوئید گردوی ایرانی (Juglans regia L.)، ژنوتیپ¬ها و ارقام‘Z63’ ، ‘Z67’، هارتلی و پدرو بعنوان والد مادری و ژنوتیپ¬های ‘Z30’ و ‘Z53’ بعنوان والد پدری انتخاب شدند. در این آزمایش که در سال¬های 1387 و 1388 انجام گرفت، همزمان با جمع آوری دانه گرده از دو ژنوتیپ گرده¬زا، ایزوله سازی گل¬های ماده درختان مادری نیز انجام شد. به منظور عقیم سازی دانه¬های گرده والدین پدری آنها با استفاده از منبع کبالت 60 در پنج سطح مختلف (50، 150، 300، 600 و 900 گری) اشعه گاما پرتوتابی شدند. پس از جمع آوری گرده¬ها به منظور تعیین اثر اشعه گاما بر میزان زنده¬مانی گرده¬ها آزمون جوانه¬زنی دانه¬های گرده انجام شد. نتایج نشان داد که با افزایش شدت دز اشعه میزان جوانه¬زنی دانه گرده کاهش معنی¬دار دارد. در زمان¬های 30 و 45 روز پس از گرده¬افشانی به منظور نجات جنین¬های نابالغ، میوه¬ها به آزمایشگاه انتقال داده شدند و پس از ضد عفونی به منظور غلبه بر دوره خواب در محیط کشت DKW کشت شدند و به مدت 30 روز در دمای چهار درجه سانتیگراد قرار گرفتند. نتایج در بین دو زمان برداشت نشان داد که زمان برداشت 30 روز بعد از گرده¬افشانی نسبت به زمان 45 روز، بعلت ریزش کمتر میوه¬ها در دزهای بالای اشعه بهتر است. در زمان 30 روز بعد از گرده¬افشانی میزان تشکیل میوه در دزهای بالاتر از 300 گری به شدت نسبت به دزهای 50 و 150 گری کاهش نشان داد. میوه¬ها در دزهای پایین دارای جنین و آندوسپرم بودند و در دزهای بالاتر بیشتر خالی از جنین و آندوسپرم یا فقط حاوی جنین و یا آندوسپرم بودند. به منظور تعیین سطح پلوئیدی گیاهان باززایی شده از روش¬های شمارش کروموزومی وآنالیزهای فلوسایتومتری استفاده شد که در هر دو روش تولید گیاهان هاپلوئید تائید شد. در مجموع دو سال آزمایش پنج گیاه هاپلوئید تولید شد. این گیاهان در دو دز 300 و 600 گری تولید شدند. میوه¬های حاصله از دزهای 50 و 150 گری همگی دیپلوئید بودند.
- Abstract
- For the first time in the world, we report the regeneration of five haploid lines in walnut (Juglans regia) by in situ parthenogenesis followed by embryo rescue. The cultivars ‘Hartley’, ‘Pedro’ and Iranian native selected genotypes ‘Z63’ and ‘Z67’ were selected as female parents for pollination with five levels of gamma-ray-irradiated pollens (50, 150, 300, 600 and 900 Gy) of ‘Z53’ and ‘Z30’. Pollination with such irradiated pollens induced fruit set and development of parthenogenetic embryos. The immature embryos of the nuts were extracted 30 and 45 days after pollination, and cultured in in-vitro culture. The embryos were stratified for 30 days at 4 ?C, for overcoming the dormancy. Ploidy level of the plantlets was determined by chromosome counting and flow cytometrical analysis. Haploid plants were obtained in ‘Hartley’, ‘Pedro’, ‘Z63’ and ‘Z67’, after pollination with irradiated pollens at 300 and 600 Gy. The plants which obtained from 50 and 150 Gy, were diploid. The techniques used for induction of haploid walnut plants by irradiated pollen were very successful and can be used in breeding programs. Key words: walnut, haploid, irradiated pollen, parthenogenesis, homozigosity