عنوان پایان‌نامه
مطالعه تأثیر آنتی اکسیدانهای غیر آنزیمی بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن (BHT)، بوتیلیتد هیدروکسی آنیزول (BHA) و کوئرسیتین و آنتی اکسیدان آنزیمی کاتالاز بر بهبود انجماد پذیری اسپرم اسب
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6230;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 67236
- تاریخ دفاع
- ۳۰ شهریور ۱۳۹۳
- دانشجو
- افشین سیفی جمادی
- استاد راهنما
- احمد زارع شحنه
- چکیده
- هدف از این پژوهش مطالعه تاثیر آنتی‌اکسیدان¬های غیرآنزیمی بوتیلیتد هیدروکسی‌تولوئن (BHT)، بوتیلیتد هیدروکسی آنیزول (BHA)، کوئرسیتین و آنتی اکسیدان آنزیمی کاتالاز بر بهبود انجماد¬پذیری اسپرم اسب ترکمن می¬باشد. در این پژوهش چهار سر نریان بالغ ترکمن با میانگین سنی 8 تا 10 سال برای اسپرم-گیری به کار گرفته شد. پس از اسپرم گیری، منی جمع¬آوری شده فیلتر شد تا ژلاتین آمیخته شده با منی جدا گردد. پس از آن منی هر نریان به طور جداگانه در لوله¬های آزمایش 50 میلی-لیتری ریخته و در محفظه¬ی عایقی که با آب 32 تا 35 درجه پر شده است قرار داده و به آزمایشگاه منتقل ¬شد. در آزمایشگاه منی به نسبت 1 به 1 با رقیق¬کننده آمیخته و با شدت g×600 به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ شد. پس از آنمنی به گروه¬های تیماری مختلف تقسیم و به یخچال چهار درجه منتقل شد تا دمای آن به چهار درجه سانتی¬گراد کاهش یابدپس از انجماد پایوت¬ها برای ارزیابی اسپرم در داخل تانک ازت نگه¬داشته شد. داده ها حاکی از آن است که افزودن 200 واحد کاتالاز به رقیق¬کننده اسپرم اسب، سبب بهبود فراسنجه‌های جنبایی اسپرم نسبت به گروه شاهد منفی و سایر گروه¬های تیماری شده است (05/0P<). زنده¬مانی و یکپارچگی غشایی اسپرم¬های تیمار شده با 200 واحد بین¬المللی بر میلی¬لیتر کاتالاز نسبت به گروه¬های تیماری و گروه شاهد منفی تفاوت معنی¬داری ایجاد کرده بود (05/0P<). نشان داده شده است که درصد جنبایی کل وVAP در تیمار یک میلی مول BHT نسبت به سایر گروه¬های تیماری و گروه¬های شاهد مثبت و منفی بیشترین بوده و تفاوت معنی¬دار ایجاد کرده است (05/0P<). نتایج نشان می¬دهد که درصد زنده¬مانی اسپرم¬های تیمار شده با 1میلی¬مول BHT نسبت به شاهد مثبت و منفی و سایر سطوح BHT بالاتر بوده و تفاوت معنی¬دار دارد (05/0P<). در مورد درصد اسپرم¬های با غشای سلولی سالم نیز تیمار یک میلی مول BHT بیشترین بوده و تفاوت معنی¬دار دارد (05/0P<). همچنین یافته¬ها نشان داد که افزودن دو میلی¬مول آنتی¬اکسیدان غیرآنزیمی BHA سبب افزایش جنبایی کل، جنبایی پیش¬رونده، VSL، VAP و LIN نسبت به گروه شاهد مثبت و منفی و سایر سطوح BHA شده است که این تفاوت از نظر آماری معنی¬دار می¬باشد (05/0P<). گروه تیماری دو میلی مول BHA زنده¬مانی و یکپارچگی غشایی بهتری نسبت به سایر گروه¬ها و گروه شاهد مثبت و منفی داشت که این تفاوت از نظر آماری معنی¬دار بود (05/0P<). افزودن 10 میکرو¬مول در میلی¬لیتر کوئرستین سبب بهبود جنبایی کل، جنبایی پیش‌رونده و ALH نسبت به گروه شاهد مثبت و منفی و سایر گروه¬های تیماری شده است (05/0P<). اما با افزایش سطح استفاده از کوئرسیتین درصد زنده¬مانی و یکپارچگی غشای پلاسمایی نسبت به گروه کنترل مثبت و منفی کاهش پیدا کرده بود(05/0P<). پیشنهاد می¬شود که افزودن آنتی¬اکسیدان¬های مختلف به رقیق‌کننده اسپرم اسب¬های ترکمن سبب بهبود در ویژگی¬های حرکتی و سایر فراسنجه¬های کیفی آن¬ها می¬شود.
- Abstract
- The aim of this study was to evaluate the effects of Butilated Hidroxy Toloen (BHT), Butilated Hidroxy Anisol (BHA), Quercetin as the non-enzymatic and catalase as enzymatic antioxidant on freezability of Turkoman stallion semen. In this study we use four healthy stallions. In this experiment, after collection, ejaculate was filteredto eliminate the gel fraction. The ejaculates were each time (n = 4: r=6) pooled and extended at a 1:1 ratio with INRA-82 extender.Diluted semen was centrifuged with 600 × g for 10 minute at room temperature.After centrifugation supernatant removed and sperm-rich pellet were dividedinto equal aliquots and diluted in main extender supplemented with dfferent doses of antioxidants.Therefore, samples were cooled to 4 to 6°C and freezed using liquid Nitrogen and styrofom box. After freezing the strows thowed in 37°C and evaluated for viability, membrane integrity, CASA parameters and total abnormalities. Our results showed that addition of 200 IU/ML catalase improved motility parameters, viability and membrane integrity of stsllion semen compared with control group (p<0.05). Addition of 1 mM BHT increased total motility, viability, membrane integrity and VAP parameter when compared with positive and negative control group (p<0.05). But there had no significant effect in progressive motility, VSL, ALH, BCF and MAD parameters using 1mM BHT with negative and positive control group (p>0.05). Our results demonstrated that addition of 2mM BHA to horse semen extender could improved total motility, progressive motility, VSL, VAP, LIN, viability and membrane integrity when compared with positive and negative control group (p<0.05). There are significant effect in total and pogressive motilityusing 10 µm/ml quercitin compared with positive and negative control goup (p<0.05). But quercitin had no any significant effect on viability and membrane integrity (p>0.05). Increasing quercitin level from 10 to 30 µM/ml decreased viability and membrane integrity of Turkoman horse sperm (p>0.05). In conclusion we concluded that adition of different antioxidants to horse semen extender, can improve quality of sperm after freez-thowing procces.
