عنوان پایان‌نامه
ارزیابی ژنهای سی دی آر ۱ و پی دی اچ ۱ در جدایه های کاندیداگلابراتای مقاوم به فلوکونازول جدا شده از افراد اچ آی وی مثبت و اثرات اسانس مرزنجوش بر منع بیان این ژن ها
- رشته تحصیلی
- زیست شناسی - علوم سلولی وملکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس کیش شماره ثبت: 1708;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 67047;کتابخانه پردیس کیش شماره ثبت: 1708;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 67047
- تاریخ دفاع
- ۰۱ خرداد ۱۳۹۳
- دانشجو
- سیمین سادات کیائی
- استاد راهنما
- سیدجلال زرگر
- چکیده
- کاندیدا گلابراتا مخمری است فرصت طلب که مقاومت در حین درمان در آن ها بسیار شایع می باشد. این قارچ موجب عفونت های مخاطی و گاهی سیستمیک در افراد دچار نقص سیستم ایمنی مانند افراد مبتلا به ایدز می شود. شیوع این بیمای در افراد ایدزی نیازبه مطالعات اپیدمیولوژیکی در این زمینه را افزایش داده است. براساس تحقیقات انجام شده بیان زیاد دو ژن PDH1 و CDR1 می توانند نقش مهمی در ایجاد مقاومت در این مخمر داشته باشند. برای درمان عفونت های کاندیدایی از داروهای مختلفی استفاده می شود که از جمله آنها داروی فلوکونازول می باشد که معمولا در درمان این بیماران پاسخگو نیست لذا نیاز به کاربرد داروهای جدید به خوبی احساس می شود. گیاهان دارویی مخازن غنی از مواد موثره و اولیه ساخت بسیاری از داروها می باشند. گیاه مرزنجوش نیز به عنوان یکی از نمونه های این مجموعه با داشتن مواد موثره با ارزش(فیتو کمیکال) دارای خواص دارویی و ایمنولوژیکی مهم و قابل توجهی است. هدف از این تحقیق جداسازی سویه های مقاوم و حساس کاندیدا گلابراتا نسبت به داروی ضد قارچ فلوکونازول و تعیین حداقل غلظت بازدارندگی این دارو (با دو روش دیسک دیفیوژن و میکرودایلوشن)و همچنین مقایسه حساسیت جدایه های کاندیدا گلابراتای مقاوم و حساس به فلوکونازول نسبت به گیاه مرزنجوش و تعیین حداقل غلظت بازدارندگی (با روش میکرودایلوشن) و در آخر مقایسه بیان ژنی ژن های CDR1 و PDH1 جدایه های مقاوم و حساس کاندیدا گلابراتا قبل و بعد از تیمار با مرزنجوش با استفاده از تکنیک Real-time PCRمی باشد. نتایج نشان داد که تعدادی از جدایه های کاندیدا گلابراتای جداسازی شده از بیماران ایدزی نسبت به داروی فلوکونازول مقاوم می باشند. همچنین با بررسی اثر اسانس مرزنجوش بر جدایه های کاندیدا گلابراتا و مقایسه آن با اثر بخشی داروی فلوکونازول بر روی آنها مشخص گردید که اسانس مرزنجوش دارای ویژگی مهارکنندگی رشد جدایه های کاندیدا گالابراتای مقاوم و حساس به داروی فلوکونازول می باشد. نتایجReal-time PCR بیانگر آن است که این اسانس در حداقل غلظت بازدارندگی دارای قدرت مهارکنندگی یا حذف این دو ژن حیاتی است. در مجموع نتایج این تحقیق نشان داد که اسانس مرزنجوش دارای خاصیت ضد مخمری مناسبی بوده و با توجه به مجاز بودن استفاده از این گیاه به صورت معمول، با بررسی های بیشتر در آینده می توان از آن در درمان عفونت های قارچی به خصوص در شرایط مقاومت دارویی استفاده کرد. کلمات کلیدی: جدایه های کاندیدا گلابراتا، فلوکلونازول، مرزنجوش،PDH1وCDR
- Abstract
- Candida glabrata has been known as anopportunistic yeast and it’s resistance to some antifungal drugs, especially fluconazole is proved .Infections with candida glabrata are common and mucosal infections in patients with immunodeficiency, such as HIV have been reported. Recent evidences indicated that disease is more prevalent in patients with AIDS , therefore the need of an epidemiological study was aimed to perform. It was shown that the expression genes CDR1 and PDH1 have an important role in resistance to yeast. In order to treat of candida infections, different groups of antifungal agents such as azole have been used in various cases. The most commonly prescribed azole group is fluconazole that is usually not response good to therapy, thus the use of new drugs are felt.Herbal agents have rich repository of primary ingredients for making many drugs. Origanum plant with Ingredients material has the high medical and immunological property. The purpose of present study was to compare the sensitive and resistance of the isolates to fluconazole with emphasize on CDR1 & PDH1 gen expression. Parallel to that the effect of oryganum essential oil for two types of Candida glabrata (resistance & sensitive) was also evaluated. Finally, the expression of the above mentioned genes before & after treatment with oryganum essential oil in different isolates were established. Following approval the species, C. glabrata isolates, obtained from AIDS patients, their sensitivity to fluconazole was determined by disk diffusion and microdilution procedures. Origanum essential oil had a strong activity to inhibit fungal grow using microdilution method. Inhibitory effect of origanum essential oil against of C.galabrata by microdilution method were measured, as well. The expression of these two genes with and without treatment with the essential oil of origanum was evaluated, using Real Time PCR method. Results showed that some isolates of C. glabrata obtained from HIV patients, were resistant to fluconazole. It was shown that the effect of origanum essential oil on C. glabrata isolates compared with effect of fluconazole on the identified isolates that origanum oil has inhibitory properties of Candida isolates resistant and susceptible to fluconazole. Real time-PCR proved that essential oils in the minimum inhibitory concentration is able to inhibitory activity and /or knockout of these vital genes. It was concluded that origanum essential oil has acceptable anti-yeast properties and with regard to legality of the use to this plant. Further investigation is needed to be done for fungal infections treatment, especially in condition of azole drug resistance yeasts. Keywords: Candida glabrata , Fluconazole, Origanum, CDR1,PDH1
