عنوان پایان‌نامه
طراحی و ساخت حس گر زیستی پروتئین بر پایه روش تشدید پلاسمون سطحی
- رشته تحصیلی
- مهندسی پزشکی - بیو مواد
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 64654;کتابخانه دانشکده علوم و فنون نوین شماره ثبت: 123
- تاریخ دفاع
- ۱۶ شهریور ۱۳۹۳
- دانشجو
- قاسم محمدخانی
- استاد راهنما
- علی حسین رضایان قیه باشی, علیرضا نیک فرجام
- چکیده
- خاصیت تشدید پلاسمون موضعی سطح نانوذرات طلا در ساخت انواع مختلفی از حسگر‌های زیستی نوری مورد استفاده قرار گرفته است. در این پژوهش نانوذرات طلا با روش کاهش توسط سیترات سنتز شدند. سپس با استفاده از لیگاند 11 MUA سطح نانوذرات طلا با گروه کربوکسیل عامل‌دار شد. در ادامه نانوذرات عامل‌دار شده، به آنتی‌بادی مونوکلونال ضد دیگوکسین اتصال یافتند و در نهایت دیگوکسین حل شده در بافر و محلول در FBS با غلظت‌های متفاوت با آنتی‌بادی مونوکلونال متصل به نانوذرات انکوبه شدند. برای مشخصه‌یابی نمونه‌ها در مراحل گوناگون پژوهش از آزمون‌ها و آنالیز‌های، پراش اشعه ایکس (XRD)، طیف‌سنجی UV-vis، میکروسکوپ الکترونی روبشی گسیل میدانی (FEEM)، توزیع اندازه ذره توسط روش تفرق نوری (DLS)، آزمون پتانسیل زتا، طیف‌سنجی مادون قرمز (FTIR)، و وزن سنجی حرارتی(TGA) استفاده شد. اندازه نانوذرات طلا سنتز شده 2/11 نانومتر می‌باشد و طیف جذبی نانوذرات در 520 نانومتر پیک داده است. اندازه نانوذرات عامل‌دار شده با لیگاند 2/13 نانومتر مشخص گردید. نتایج FTIR بیانگر اتصال مناسب لیگاند از سمت گروه تیولی خود به نانوذرات طلا می‌باشد. بار سطحی نانوذرات متصل به لیگاند و نتایج طیف‌سنجی UV-vis مربوط به نانوذرات اتصال یافته به 11 MUA در pH های مختلف حاکی از آن است که نانوذرات پایدار شده با لیگاند در pH > 4 پایداری مناسبی دارند. نانوذرات متصل به آنتی‌بادی به ترتیب 45/29- و 69/11- بدست آمد و در نهایت طبق نتایج طیف‌سنجی UV-vis مربوط به نانوذرات اتصال یافته به دیگوکسین کمترین میزان دیگوکسین که بوسیله‌ی زیست‌حسگر ساخته شده شناسایی شد، ng/ml2 مشخص گردید. کلمات کلیدی: حسگر زیستی، تشدید پلاسمون موضعی سطح، نانوذرات طلا، 11 MUA و طیف سنجی UV-vis
- Abstract
- The Localized Surface Plasmon Resonance (LSPR) property of gold nano particles has been utilized to configure various optical biosensors. The nanoparticles were synthesized using sodium citrate reduction method. After that, by means of 11MUA ligand the surface of gold nanoparticles were functionalized by carboxyl group. Then the functionalized nano particles bound to monoclonal antibody digoxin. Finally, the digoxin with different concentration having dissolved in buffer and FBS solution bound with monoclonal antibody. To characterize samples, UV-vis Spectrophotometry, X-Ray Diffraction , Field Emission Scanning Electron Microscope, Dynamic Light Scattering, Thermogravimetric analysis, Fourier Transform Infrared and Zeta tests were conducted . the synthesized nanoparticles size was 11.2 nanometer and the extinction spectrum of gold nanoparticles was maximized at 520 nanometer. The functionalized gold nano particles was 13.2 nanometer which is in agreement with the size having calculated based on Scherer equation. The FTIR result revealed that gold nanoparticles bound with the ligand through its thiol (-SH end). The surface charge of gold nano particles that bound with ligand and monoclonal antibody were -29.45 and -11.69 respectively. Finally, according to the UV-vis Spectrophotometry of gold nano particles which bound with digoxin the detection limit of configured bio sensor was determined 2ng/ml. Keywords: Biosensor, Localized Surface Plasmon Resonance, Gold Nanoparticles, UV-vis Spectrophotometry
