عنوان پایان‌نامه
اثرات سیلیبینین بر روی بیان چند ژن خاص در رده ی سلولی سرطان تخمدان به نام SKOV-۳ و حساس کردن آن به داروی پاکلی تاکسل
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم‌سلولی‌مولکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5417;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 64099
- تاریخ دفاع
- ۱۲ شهریور ۱۳۹۳
- دانشجو
- مریم نمازیان
- استاد راهنما
- نسرین معتمد
- چکیده
- سرطان تخمدان یکی از انواع سرطان های کشنده در بین زنان می باشد. در حال حاضر معمول ترین و موثرترین روش درمان سرطان تخمدان، شیمی درمانی می باشد. مرسوم ترین و موثرترین داروی شیمی درمانی برای سرطان تخمدان پاکلی تاکسل بوده، با این وجود کارایی بالینی آن به دلیل گسترش مقاومت دارویی کاهش یافته است. بنابراین به نظر می رسد شناخت مکانیسم و مسیرهای دخیل در این مقاومت و ارائه راهکارهایی برای برطرف شدن این مشکل کاری اساسی و لازم باشد. سیلیبینین یک آنتی اکسیدانت گرفته شده از گیاه خار مریم است که باعث القای آپپتوز در سلول های سرطانی می شود. در این مطالعه ابتدا تاثیرکشندگی سیلیبینین و پاکلی تاکسل (هریک به تنهایی) بر روی رده ی سلولی 3-SKOVبه وسیله ی تست MTT مورد بررسی قرار گرفت و مقاومت این سلول ها به داروی پاکلی تاکسل تایید شد و سپس به منظور شکستن مقاومت سلول ها به داروی پاکلی تاکسل، سلول ها به وسیله ی ترکیب این دو دارو تیمار شدند و همچنین در ادامه علل شکسته شدن این مقاومت مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از تست MTT نشان دادند که سیلیبینین به میزان قابل توجهی باعث مهار تکثیر سلولی والقای آپپتوز در سلول های 3-SKOV شد که به وسیله ی تست فلوسایتومتری هم تایید گردید. همچنین ترکیب دو دو داروی سیلیبینین و پاکلی تاکسل اثر کشندگی مضاعفی بر روی این سلول ها نشان داد. تست کاسپاز 3 نشان داد که یکی از عللی که سیلیبینین از طریق آن باعث حساس شدن سلول ها به داروی پاکلی تاکسل می شود، افزایش دادن فعالیت کاسپاز 3 در سلول ها است. نتایج حاصل ازReal-Time PCR نشان دادند که سیلیبینین باعث کاهش بیان ژن های Survivin و HLA-G می شود که این موضوع هم می تواند باعث کاهش مقاومت سلول ها به شیمی درمانی شود. بکارگیری همزمان دو داروی سیلیبینین وپاکلی تاکسل می تواند گام نوین و موثری در درمان سرطان تخمدان باشد. کلمات کلیدی: سرطان تخمدان، شیمی درمانی، پاکلی تاکسل، مقاومت دارویی، سیلیبینین
- Abstract
- Ovarian carcinoma is one of the most lethal cancers in women. Chemotherapy is the most common and effective strategy in treatment of ovarian cancer. Due to the absence of definitive presenting symptoms, many patients will have advanced stage disease at the time of diagnosis, so they will not respond to chemotherapy. Paclitaxel is one of the most effective chemotherapeutic drugs to date, used clinically for the treatment of ovarian cancer. However, its clinical efficacy has been hampered due to the development of drug resistance. Therefore, it is essential to find out the mechanisms of this resistance and search for the strategies to solve this problem. Silibinin is a flavonoid antioxidant extracted from milk thistle, and it can induce apoptosis in cancer cells. It can also reduce the expression of proto-oncogenes and induce the expression of tumor-suppressor genes. In this study, at the first step, we evaluated the cytotoxic effects of each of these two drugs alone (paclitaxel or silibinin) on SKOV-3 cells by MTT test, and we proved that these cells are resistant to paclitaxel. Then, in order to reduce this resistance, we treated these cells with the combination of paclitaxel and silibinin. We also did caspase-3 activity assay and Real-time PCR to find out how this resistance had been reduced. MTT results showed that silibinin can significantly inhibit cell proliferation and induce apoptosis in SKOV-3 cells which we could also prove by flow cytometry. Surprisingly, the combination of silibinin and paclitaxel can reduce cell proliferation much more than paclitaxel or silibinin alone. Caspase-3 activity assay represented that silibinin can sensitize these cells to paclitaxel through increasing caspase-3 activity. Real-time PCR results showed that silibinin can highly reduce HLA-G and Survivin genes expression which can be responsible for sensitizing cells to chemotherapy. It seems that combination therapy with paclitaxel and silibinin can be an Key words: ovarian cancer, chemotherapy, paclitaxel, drug resistance, silibinin
