عنوان پایان‌نامه
جدا سازی باکتری های شور پسند مولد سیدروفور از خاک زراعی منطقه اشتهارد کرج
- رشته تحصیلی
- زیست فناوری (بیوتکنولوژی) - میکروبی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5605;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 67219
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۹۳
- دانشجو
- لیلا میرفیضی
- استاد راهنما
- محمدعلی آموزگار, احمدعلی پوربابائی
- چکیده
- بسیاری از میکروارگانیسم ها برای کسب و محلول سازی آهن از سیستمی کارآمد استفاده می کنند که شامل ترکیباتی با میل ترکیبی بالا نسبت به آهن، تحت عنوان سیدرفور می باشند. با توجه به اهمیت بیوتکنولوژیک باکتری های نمک دوست و متابولیت هایی که توسط این گروه از میکروارگانیسم ها تولید می شوند، بررسی توانمندی این گروه از جهت تولید چنین ترکیباتی ضروری به نظر می رسد. هدف از این تحقیق جداسازی باکتری های نمک دوست مولد سیدرفور از خاک های زراعی می باشد. جداسازی اولیه باکتری ها از خاک توسط تهیه سری رقت های متوالی و کشت بر روی محیط 12% نمک MH انجام شد. هفت جدایه نمک دوست پس از تفکیک باکتری های نمک دوست از باکتری‌های تحمل کننده نمک، حاصل شد. توانایی تولید سیدرفور جدایه ها توسط تست های عمومی O-CAS وCAS assay solution مورد بررسی قرار گرفت. با روش CAS مایع، شش جدایه تولیدکننده سیدرفور شناسایی شدند که از میان آنها دو جدایه با بیشترین توان تولید سیدرفور برای ادامه پژوهش انتخاب شدند. تست های اختصاصی برای شناسایی ماهیت شیمیایی سیدرفورها انجام شد و عوامل محیطی موثر در تولید سیدرفور از جمله غلظت نمک، منبع کربن، pH ، دما و حضور فلز دیگر بهینه سازی شدند. سیدرفور تولیدی توسط هر دو جدایه از نوع سیدرفورهای هیدروکساماتی شناخته شد. همچنین مشخص شد که برای جدایه 1-DS غلظت 5/2% نمک، دمای C30، 9pH و منبع کربن لاکتات کلسیم ، و برای جدایه 6-SS غلظت نمک 5% ، دمای C30 ، 7 pH ، و منبع کربن گلوکز و لاکتات کلسیم ، بیشترین تاثیر را در افزایش سیدرفور تولیدی دارند. برای هر دو جدایه فلز روی با غلظت 40 M بعنوان دوز موثر در افزایش میزان سیدرفور تولیدی شناخته شد.
- Abstract
- To sequester and solubilize ferric iron many microorganisms utilize an efficient system consisting of compounds with high iron affinity, termed siderophores. By Considering the importance of the metabolites produced by halophilic microorganisms and their biotechnological applications, investigation for the production of such compounds seems necessary. The aim of this study was isolation of siderophre producing halophilic bacteria from agricultural soils. Initial isolation of soil bacteria using serial dilutions were performed, followed by separation of halophilic bacteria from halotolerant ones, which resulted in seven isolates. Production of siderophore was measured using universal tests including O-CAS plates and CAS assay solution. By exploiting the CAS solution methods, six siderophore producing halophile isolates were identified, among which two isolates with the highest possible siderophore production were selected. Specific tests were performed for identifying chemical nature of siderophores, and the effect of environment factors such as salt concentration, carbon source, pH, temperature and the presence of other metals in siderophore production were optimized. DS-1 isolate grew best at 300C, pH 9, by calcium lactate as a carbon source, while SS-6 isolate could optimally produce siderophore at 300 C, pH 7, using glucose and calcium lactate as carbon source. For both isolates, zinc with the concentration of 40 M was determined, as affecting concentration for siderophore production. Keywords: Halophile, Siderophore, Hydroxamate, CAS
