عنوان پایان‌نامه
بررسی مولکولی و همسانه سازی ژن (x)Glu-Al در گندم های دیپلویید و هگزاپلویید
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی -بیوتکنولوژی کشاورزی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 871;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75616;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 871;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75616
- تاریخ دفاع
- ۲۴ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- نسترن پرتوی گشتی
- استاد راهنما
- محسن ابراهیمی
- چکیده
- افزایش رشد جمعیت و بروز بحران غذا در کشورهای در حال توسعه و فقیر، موجب توجه جدی‌تر محققان و متخصصان بخش کشاورزی به راهبردی‌ترین گیاه زراعی دنیا یعنی گندم (Triticum aestivum L.) شده است. در میان فرآورده‌های گندم، نان از اهمیت ویژه‌ای برخوردار می‌باشد. کیفیت نان تولید شده عمده‌ترین عامل در تعیین ضایعات آن است و بخش عمده‌ای از علل ایجاد ضایعات نان به دلیل پایین بودن ارزش نانوایی ارقام مورد استفاده در تهیه نان می‌باشد، لذا سرمایه‌گذاری در پژوهش‌های کاربردی این زمینه ضروری به نظر می‌رسد. مهم‌ترین عامل موثر در ایجاد کیفیت و تنوع محصولات نهایی آرد گندم، پروتئین‌های ذخیره‌ای می‌باشند. مطلوبیت آرد برای تهیه نان بستگی به کمیت و کیفیت گلوتن گندم دارد. پروتئین‌های گلوتن گندم به دو دسته گلیادین‌ها و گلوتنین‌ها تقسیم می‌شوند. گلوتنین گندم به لحاظ وزن مولکولی به دو گروه، زیرواحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا (HMW-GS) و زیرواحدهای گلوتنین با وزن مولکولی پایین (LMW-GS) تقسیم می‌شوند. در کیفیت نانوایی گندم ژن‌های زیرواحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا بیشترین نقش را نشان داده است. همچنین قابل ذکر است که تغییرات ژنتیکی دخیل در بهبود ساختار آندوسپرم، مستلزم راه‌اندازهای ژنی مطلوب جهت افزایش بیان تراژن‌ها می‌باشد، لذا جداسازی راه‌انداز و ژن گلوتنین با وزن مولکولی بالا (Glu-A1x) از گندم دیپلوئید و هگزاپلوئید در این پژوهش مورد بررسی قرار گرفت. از این قطعات در برنامه‌های ساخت سازه بیانی و انتقال ژن یا بیش بیان آن می‌توان استفاده نمود. با طراحی آغازگرهای اختصاصی و به‌کارگیری آن‌ها بر روی DNA ژنومی، طی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) قطعات ژن به طول 2500 جفت باز و قطعات راه‌انداز به طول 1200 جفت باز تکثیر یافت. سپس این قطعات به ناقل pTG19 انتقال یافته و کلنی‌های سفید (تست آبی-سفید)، از طریق هضم آنزیمی، جهت تایید حضور قطعه تست شدند که وجود قطعه مورد نظر در کلنی‌ها اثبات شد. پس از توالییابی، با بررسی توالی‌های همسانه‌سازی شده با نرم‌افزارهای BLAST و ClustalW، شباهت بسیار این توالی‌ها با سایر توالی‌های ژن‌ها و راه‌اندازهای پروتئین‌های ذخیره‌ای شناخته شده، آشکار گردید. قطعه همسانه‌سازی شده و راه‌انداز تکثیر شده قابل استفاده در برنامه به‌نژادی مولکولی کیفیت گندم می‌باشد.
- Abstract
- The rise of world population and food crisis in developing countries have directed the attention of agriculture experts to the most strategic crops, namely, wheat in the world. Low quality of wheat bread is the most important factor in its wastes, thus it seems to be essential to invest on functional studies in this field. Genetic changes for the purpose of improving the baking quality of wheat bread and its endosperm construction require desirable gene promoters so as to increase tragenes expression, so separating glutenin gene primers with high molecular weight (Glu-Alx) from diploid and hexaploid wheat was examined in this study. Designing proper primers and applying them on the genomic DNA were conducted in polymerase chain reaction (PCR) and primer fragments as long as 1100 bp were produced. Then, the fragments were transmitted to the transmitter pTG19 and white colonies were evaluated through enzyme digestion. Results showed that the desired fragment was found in the studied colonies. Results of the study of sequences homologized with BLAST and ClustalW software programs also showed that these sequences had many similarities with other primers of storage proteins. Generally the results showed that the homologized primer can be used in molecular euphonic programs of wheat quality and it can be used in making expression constructions and gene transfer or its overexpression
