عنوان پایان‌نامه
تاثیر برخی الیسیتورهای غیر زیستی بر بیان ژنهای دخیل در تولید برخی آلکالوئیدهای در مامیران کبیر Chelidonium majus L
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی -بیوتکنولوژی کشاورزی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6704;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72606;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6704;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72606
- تاریخ دفاع
- ۱۹ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- سیدمحمد هاشمی سردرود
- استاد راهنما
- محمدرضا نقوی
- چکیده
- گیاه مامیران کبیر یا گیاه پرستو با نام علمی (Chelidonium majus L.)یکی از مهمترین گیاهان دارویی به خاطر دارا بودن آلکالوئیدهای بنزوفنانتریدینی مانند سنگواینارین، بربرین و کلیدونین می¬باشد. این دسته از ترکیبات، در حفاظت گیاهان مقابل عوامل بیماریزا، به عنوان جذب گرده افشانها، رقابت گیاه با گیاه و همزیستی گیاه با میکروب نقش دارند. در این تحقیق با استفاده از تکنیک¬ کشت سوسپانسیون سلولی و با استفاده از الیسیتورهای غیر زیستی شامل متیل جاسمونات و سالسیلیک اسید میزان بیان ژن¬های ( CFS،STS و TNMT) در پاسخ به متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید در چهار زمان مختلف (12، 24، 48 و 72 ساعت) مورد بررسی قرار گرفتند. علاوه بر آن، تولید متابولیت¬های ثانویه از قبیل کلیدونین، سنگواینارین و بربرین در سوسپانسیون سلولی این گیاه در زمان های مختلف مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج آنالیز بررسی بیان ژن¬ها نشان دادند که هر دو الیسیتور اثر مثبت بر روی افزایش بیان ژن های مربوطه و تولید متابولیت های ثانویه داشتند به جز ژن TNMTکه در پاسخ به متیل جاسمونات در تیمار 72 کاهش بیان نشان داد. همچنین نتایج حاصل از کروماتوگرافی نشان داد که تیمارهای الیسیتور در مدت زمان های طولانی تر بیشتر توانست میزان تولید متابولیت های ثانویه را افزایش دهد. در نهایت براساس نتایج به دست آمده باید گفت که میزان بیان ژن های مذکور با تولید آلکالوئیدهای مرتبط رابطه مستقیم دارد و سوسپانسیون سلولی گیاه مامیران کبیر می تواند در پاسخ به الیستورهای مذکور می تواند منبع مناسبی برای تولید متابولیت های ثانویه باشد.
- Abstract
- Rock poppy or greater celandine (Chelidonium majus L.) is one of the most significant medicinal plants due to valuable source of the pharmacological units such as sanguinarine, chelidonine and berberine. Forthermore, the expression level of various genes (CFS, SPS and TNMT) in the benzophenanthridine alkaloids pathway for response to methyl jasmonate and salicylic acid elicitation at different time points (12, 24, 48 and 72 h) were examined. Afterwards, in vitro production of sanguinarine, berberine and chelidonine was investigated. Quantitative reverse-transcription PCR analysis demonstrated that the expression of all referred genes increased with increasing time point except TNMT which decreased in MJ elicitation at 72h. Furthermore, High-performance liquid chromatography analysis exhibited that the benzophenanthridine alkaloids yield of greater celandine cell suspension increased in both mthyl jasmonate and salicylic acid elicitation in longer time courses. Our findings suggest that Rock poppy cell suspension culture may produce sanguinarine, berberine and chelidonine using methyl jasmonate and salicylic acid as an abiotic elicitor and also can be as a good source for referred commercial alkaloids. Keywords: Benzophenantridin alkaloids, Cell suspension culture, Chelidonium majus L., Elicitation, Gene expression.
