عنوان پایان‌نامه
بررسی بیان کمی Wnt۲b , Wnt۵a و Wnt۱۱ در تخمدان سرطانی انسان با روش...
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم جانوری -فیزیولوژی جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 3719;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 40398
- تاریخ دفاع
- ۰۷ اسفند ۱۳۸۷
- دانشجو
- پروانه محسنی مقدم
- استاد راهنما
- قمرتاج حسین
- چکیده
- سرطان تخمدان یکی از شایعترین و کشنده ترین سرطانها در بین زنان است که بیش از 90% آن از نوع اپیتلیالی می باشد. مسیرهای مولکولی مختلفی در بروز سرطان نقش دارند، اختلال در مسیر Wnt signaling و دخالت آن در بروز سرطان در مطالعات متعددی گزارش شده است. بیانWnt2b ، Wnt5a و Wnt11 در دودمانهای سلول اپیتلیالی سرطان تخمدان گزارش شده است. ولیکن تا کنون بیان Wnt5a و Wnt11 و Wnt2b در نمونه های سرطان تخمدان انسان مورد بررسی قرار نگرفته لذا در این مطالعه بررسی بیان کمی این مولکولها در نمونه های سرطان تخمدان انسان در مقایسه با بافت سالم تخمدان مورد بررسی قرار گرفته است. استخراجRNA از دودمان های سلولی آدنوکارسینومای تخمدانی انسان به نامهای Skov3 و Ovcar3 به عنوان کنترل مثبت و همچنین بیوپسی بافت سرطان تخمدان و بافت سالم تخمدان انسان (10n= برای هر گروه) با استفاده از RNAlater و Trizol انجام شد. پرایمرها از طریق نرم افزار Gene Runner بیان Wnt2b ، Wnt11 و Wnt5a طراحی گردید. سنتز cDNA با استفاده از oligo dT صورت گرفت و سپس بیان ژنها با روش Real time PCR انجام گردید. بیان Wnt5a و Wnt11 در دودمانهای سلولی Skov3 و Ovcar3 مشاهده شد ولیکن Wnt2b بیان ضعیفی را نشان داد و به همین دلیل در نمونه های انسانی صرف نظر گردید. در 66% نمونه ها ی سروزی بیان Wnt5a نسبت به بافت سالم افزایش نشان داد. جالب توجه است که در نمونه ی T5 که بیمار به فاصله کوتاهی بعد از عمل فوت کرده بود افزایش Wnt5a تقریبا 10 برابر بیش از بافت سالم بوده است. افزایش در بیان Wnt5a در مورد نمونه های تومور طبقه نشده (unclassified tumor) و تومور طبقه بندی نشده استرومایی (unclassified stromal tumor) نیز دیده شد. در نوع های دیگر بیان Wnt5a به میزان 83% در نمونه سرطان نوع موسینوسی و تراتومای بالغ خوش خیم کاهش نشان داد. بیان Wnt11 در 3 نمونه افرایش و در 3 نمونه دیگر سروزی کاهش نشان داد. در Unclassified stromal tumor و Unclassified tumor نیز افزایش بیان و درتومور موسینوسی و تراتومای بالغ خوش خیم کاهش در بیان این ژن مشاهده شد. جالب توجه است که در 83% نمونه های سروزی ارتباط معکوسی بین بیان Wnt5a و بیان Wnt11 دیده شد. ادامه این مطالعه با نمونه های بیشتر می تواند کمکی به درک و یا یافتن شاخصی برای روند پیشرفت سرطان تخمدان باشد.
- Abstract
- Ovarian cancer is one of the most common and lethal cancer in women, with more than 90% described as epithelial cell type. Wnt signaling alteration plays an important role in cancer genesis. The expression of Wnt2b, Wnt5a and Wnt11 was reported in ovarian cancer cell lines; however, their expression levels in human ovarian cancer specimen compared to normal ovarian tissue remains to be determined. RNA was extracted from ovarian cancer cell lines as positive control and human ovarian tissue specimens (n=10/group, cancerous and normal tissues) by RNAlater and Trizol. Primers were designed by using Generunner software and cDNA were synthesized with oligodT primers which were further assessed by Real time RT-PCR. We observed Wnt5a and Wnt11 expression in positive controls but Wnt2b showed a weak expression. For this reason we did not further perform Wnt2b expression quantification in our study. In 66% of collected samples the level of Wnt5a was increased compared to normal tissue specimens. It should be noted that a great Wnt5a expression (10 x increases) was observed in an ovarian serous epithelial type tumor who was passed away after cancer diagnostic. Also in unclassified tumor and unclassified stromal tumor Wnt5a expression was increased. While, 83% decrease was observed in mucinous subtype and mature teratoma. The levels of Wnt11 expression was various in serous epithelial-cell type ovarian cancer which showed increased levels in 3 out of 6 samples. In unclassified tumor and unclassified stromal tumor Wnt11 showed increased expression. While Wnt11 an expression level was decreased by 30% in mature teratoma and mucinous subtype. Interestingly, in 83% of serous type cases we observed an inverse relation between Wnt5a and Wnt11 expression levels. Further study with more cases could help for finding a marker which would be able to determine ovarian cancer progression.
