عنوان پایان‌نامه
اثر بوتیلیتد هیدروکسی آنیزول (BHA) در رقیق کننده منی همراه با گلیسرول و دی متیل سولفوکساید به عنوان محافظ سرما بر فراسنجههای کیفی اسپرم بز
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6725;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72801;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6725;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72801
- تاریخ دفاع
- ۲۵ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- مهدی رحمت زاده
- استاد راهنما
- احمد زارع شحنه
- چکیده
-
هدف از پژوهش حاضر تاثیر آنتی اکسیدان بوتیلیتد هیدروکسی آنیزول (BHA) به همراه غلظت های مختلف گلیسرول و دی متیل سولفوکساید به عنوان سرما محافظ بر بهبود انجماد پذیری اسپرم بزهای مهابادی می باشد. از چهار راس بز نر نژاد مهابادی (3-4 سال) واقع در ایستگاه پژوهشی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران به مدت پنج هفته و هر هفته دو نوبت اسپرم گیری شد. این مطالعه در دو آزمایش جداگانه انجام شد. در آزمایش اول، ارزیابی های لازم بر روی غلظت های مختلف بوتیلیتد هیدروکسی آنیزول (صفر، یک، دو و چهار میلی مولار) جهت تعیین سطح مطلوب BHA انجام شد. در آزمایش دوم سطح مطلوب BHA و گروه شاهد در سطوح مختلف سرما محافظ های گلیسرول (5 و 7 درصد) و DMSO (5 و 7 درصد) جهت بهبود فراسنجه های کیفی اسپرم بز مورد ارزیابی قرار گرفت. پس از اسپرم گیری، منی جمع آوری شده برای دو ساعت در دمای پنج درجه سلسیوس به تعادل دمایی رسید و به پایوت های 0/25 میلی لیتری کشیده شد. پس از تعادل دمایی، پایوت ها در بخار ازت مایع منجمد شدند و جهت ذخیره سازی در داخل ازت مایع غوطه ور گردیدند. فراسنجه های اسپرم، از جمله جنبایی کل، جنبایی پیش رونده توسط نرم افزار کاسا (Computer Assisted Sperm Analysis; CASA)، زنده‌مانی، یکپارچگی غشا و ناهنجاری کل ارزیابی شد. نتایج آزمایش یک نشان می دهد که افزودن سطوح مختلف BHA به رقیق کننده اسپرم بز سبب بهبود معنی دار جنبایی کل شده است (0/05>P). همچنین افزودن چهار میلی مولار آنتی اکسیدان سبب بهبود معنی دار زنده مانی و یکپارچگی غشا اسپرم نسبت به گروه شاهد شده است (0/05>P). نتایج نشان داد که افزودن سطوح مختلف از این آنتی اکسیدان به رقیق کننده اسپرم بز تفاوت آماری معنی داری را در اسپرم های نابهنجار نسبت به گروه شاهد ایجاد نکرد (0/05
P). همچنین تیمار A/G5% بیشترین جنبایی پیش رونده، زنده مانی و ALH را نسبت به سایر گروه های تیماری نشان داد (0/05>P). یافته ها نشان داد که تیمارهای A/G5% و G5%، سبب بهبود یکپارچگی غشا نسبت به سایر گروه های تیماری شده است (0/05>P). نتایج نشان داد که افزودن سطوح مختلف از این آنتی اکسیدان به رقیق کننده اسپرم بز تفاوت آماری معنی داری را در اسپرم های نابهنجار نسبت به گروه شاهد ایجاد نکرد (05/0
P). همچنین تیمار A/G5% بیشترین جنبایی پیش رونده، زنده مانی و ALH را نسبت به سایر گروه های تیماری نشان داد (05/0>P). یافته ها نشان داد که تیمارهای A/G5% و G5%، سبب بهبود یکپارچگی غشا نسبت به سایر گروه های تیماری شده است (05/0>P). نتایج نشان داد که افزودن چهار میلی مولار BHA در سرما محافظ های گلیسرول و DMSO به رقیق کننده، تفاوت آماری معنی داری را در اسپرم های نابهنجار نسبت به گروه شاهد ایجاد نکرد (05/0
- Abstract
- The aim of this study was to evaluate the effects of Butylated hydroxyanisole with different concentrations of glycerol and dimethyl sulfoxide as cryoprotectant on freezability of Mahabadi Goat semen. Semen was collected from Mahabadi male Goat (3-4 years), twice a week for five weeks at the College of Agriculture and Natural Resources Research station University of Tehran. This study was performed in two experiments. In the first experiment: evaluations of necessary were performed on different concentrations of Butylated hydroxyanisole (zero, one, two and four mM) for determining optimum level of BHA. In a second experiment: the optimum level of BHA and control were evaluated at different levels of glycerol (5 and 7%) and DMSO (5 and 7%) for improving quality parameters of goat semen. After ejaculation, semen equilibrated at 5 ?C for 2 h, and aspirated into 0.25 mL straws. After equilibration, straws were frozen in liquid nitrogen vapor and plunged into liquid nitrogen for storage. Sperm parameters, including motility and progressive motility by CASA (Computer Assisted Sperm Analysis), viability, membrane integrity and total abnormality sperm, were assessed. The results of first experiment show that addition, different levels of BHA to the extender for freezing of goat semen can improve motility (P>0.05). Also addition 4 mM antioxidants significantly improved the viability and membrane integrity of sperm than the control group (P>0.05). Addition different levels of antioxidant to Goat semen extender showed no significant difference in abnormal sperm than the control group (P>0.05). So addition of 4 mM of antioxidants to extender improves the freezability of goat semen. Results of second experiment show that treatments A/G5% and A/D5% were improvement total mobility compared to the other treatments (P>0.05). Also, A/G5% group showed most progressive mobility, viability and ALH than the other treatment groups (P>0.05). The results showed that A/G5% and G5% treatments, were improvment the membrane integrity compared to the other treatment groups (P>0.05). The results showed that addition 4 mM of BHA in glycerol and DMSO cryoprotectant to Goat semen extender no significant difference in abnormal sperm than the control group (P>0.05). Finally addition of optimum level of BHA in glycerol be improvment the quality of sperm parameters than the DMSO cryoprotectant. Key Words: Butylated hydroxy anisole, Cryoprotectant, Dimethyl sulfoxide, Freezability, Goat semen.
